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miR-374b和miR-299对成肌细胞分化的作用及其分子机制

摘要第8-10页
ABSTRACT第10-11页
缩略词表(Abbreviations)第12-13页
第一章 文献综述第13-30页
    1.1 引言第13页
    1.2 骨骼肌的发育第13-19页
        1.2.1 骨骼肌的来源第13-14页
        1.2.2 骨骼肌的形成第14-15页
        1.2.3 骨骼肌形成过程中相关调控因子第15-17页
        1.2.4 调节骨骼肌形成的信号通路第17-19页
    1.3 microRNA概述第19-25页
        1.3.1 microRNA的生物合成及作用机制第20页
        1.3.2 microRNA的检测方法第20-22页
        1.3.3 microRNA靶基因的预测及鉴定第22-25页
    1.4 microRNA调控骨骼肌的发育第25-29页
        1.4.1 骨骼肌中高表达的microRNA第25-27页
        1.4.2 microRNA与成肌细胞的增殖和分化第27-28页
        1.4.3 miRNA调节肌纤维类型的转变第28页
        1.4.4 microRNA与生肌调节因子和生肌增强因子第28-29页
    1.5 本研究的目的意义第29-30页
第二章 材料和方法第30-48页
    2.1 材料第30-33页
        2.1.1 实验材料第30页
        2.1.2 主要仪器设备第30-31页
        2.1.3 主要试剂及试剂盒第31-32页
        2.1.4 常用试剂及其配置第32-33页
    2.2 方法第33-48页
        2.2.1 细胞培养第33-35页
        2.2.2 总RNA提取第35页
        2.2.3 miRNA的定量分析第35-37页
        2.2.4 基因的定量分析第37-38页
        2.2.5 双荧光素酶报告载体及其突变载体的构建第38-44页
        2.2.6 Western blotting分析第44-46页
        2.2.7 免疫荧光第46页
        2.2.8 细胞增殖实验第46-47页
        2.2.9 生物信息学分析数据库及软件第47页
        2.2.10 统计分析第47-48页
第三章 结果与分析第48-66页
    3.1 调控Myf6基因的microRNA鉴定第48-52页
        3.1.1 靶定Myf63’UTR的microRNA预测第48页
        3.1.2 构建Myf6基因 3’UTR双荧光素酶报告载体第48-49页
        3.1.3 双荧光素酶报告实验第49-51页
        3.1.4 miR-374b调控内源Myf6表达第51-52页
    3.2 miR-374b调节骨骼肌发育第52-62页
        3.2.1 miR-374b的序列保守性分析第52页
        3.2.2 miR-374b组织表达谱分析第52-53页
        3.2.3 细胞表达分析第53-55页
        3.2.4 miR-374b抑制成肌细胞分化第55-59页
        3.2.5 miR-374b对肌纤维类型的影响第59-61页
        3.2.6 miR-374b对C2C12细胞增殖的影响第61-62页
    3.3 miR-299调节骨骼肌发育第62-66页
        3.3.1 miR-299序列保守性分析第62页
        3.3.2 miR-299在不同组织中的表达分析第62-63页
        3.3.3 miR-299在C2C12细胞分化过程中的表达分析第63-64页
        3.3.4 miR-299抑制成肌细胞分化第64-66页
第四章 讨论第66-71页
    4.1 鉴定调控Myf6基因的microRNA第66-67页
    4.2 microRNA的保守性分析第67-68页
    4.3 miR-374b和miR-299的表达谱分析第68页
    4.4 miR-374b对C2C12成肌细胞增殖与分化的影响第68-69页
    4.5 miR-374b抑制慢肌纤维的形成第69页
    4.6 miR-299正向调控C2C12成肌细胞分化第69-71页
第五章 结论第71-73页
    5.1 本研究的主要成果第71页
    5.2 本研究的主要创新点第71页
    5.3 本研究不足之处第71-72页
    5.4 下一步工作计划第72-73页
参考文献第73-86页
研究生在读期间发表的主要论文第86-87页
致谢第87-88页

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