| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 英文缩写 | 第10-14页 |
| 第1章 绪论 | 第14-29页 |
| 1.1 肝癌概述 | 第14-15页 |
| 1.2 内部凋亡通路与外部凋亡通路 | 第15-16页 |
| 1.3 肿瘤细胞对TRAIL的耐药机制介绍 | 第16-21页 |
| 1.3.1 TRAIL介绍 | 第16-17页 |
| 1.3.2 Ⅰ类细胞和Ⅱ类细胞 | 第17页 |
| 1.3.3 TRAIL诱导凋亡过程中的耐药机制 | 第17-19页 |
| 1.3.4 TRAIL在临床上的应用 | 第19-21页 |
| 1.4 miRNA与肿瘤 | 第21-23页 |
| 1.5 ISG12a与肿瘤 | 第23-24页 |
| 1.6 Msi1与肿瘤 | 第24-25页 |
| 1.7 AKT通路与肿瘤耐药 | 第25-27页 |
| 1.8 ERK通路与肿瘤耐药 | 第27-29页 |
| 第2章 肝癌细胞对TRAIL固有耐药机制的研究 | 第29-54页 |
| 2.1 前言 | 第29页 |
| 2.2 实验部分 | 第29-30页 |
| 2.2.1 实验细胞 | 第29页 |
| 2.2.2 抗体与其他主要试剂 | 第29-30页 |
| 2.2.3 组织标本 | 第30页 |
| 2.2.4 主要实验仪器 | 第30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-38页 |
| 2.3.1 细胞株培养、冻存与复苏 | 第30-31页 |
| 2.3.2 DNA梯度琼脂糖凝胶电泳实验检测TRAIL诱导细胞凋亡 | 第31页 |
| 2.3.3 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第31-32页 |
| 2.3.4 蛋白免疫印迹实验检测凋亡相关蛋白(Western blot) | 第32-33页 |
| 2.3.5 RNA提取和PCR实验 | 第33-35页 |
| 2.3.6 真核表达和沉默载体构建及质粒纯化 | 第35-36页 |
| 2.3.7 细胞转染实验 | 第36页 |
| 2.3.8 荧光素酶报告基因实验 | 第36-37页 |
| 2.3.9 动物实验 | 第37页 |
| 2.3.10 数据统计 | 第37-38页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第38-53页 |
| 2.4.1 TRAIL诱导肝癌细胞凋亡的检测 | 第38-40页 |
| 2.4.2 TRAIL诱导敏感细胞中ISG12a的表达 | 第40-42页 |
| 2.4.3 ISG12a调控体内外肿瘤细胞对TRAIL的敏感性 | 第42-44页 |
| 2.4.4 TRAIL诱导非干扰素依赖性的ISG12a表达 | 第44-45页 |
| 2.4.5 miR-942调控ISG12a的3’UTR | 第45-47页 |
| 2.4.6 ISG12a与miR-942在肝癌细胞和肝组织中的表达呈负相关关系 | 第47-48页 |
| 2.4.7 miR-942通过调控ISG12a调节肝癌细胞对TRAIL的敏感性 | 第48-50页 |
| 2.4.8 AKT通过miR-942下调ISG12a调节肝癌细胞对TRAIL的敏感性 | 第50-52页 |
| 2.4.9 AKT影响miR-942启动子活性 | 第52-53页 |
| 2.5 小结 | 第53-54页 |
| 第3章 肝癌细胞对TRAIL获得性耐药机制研究 | 第54-65页 |
| 3.1 前言 | 第54页 |
| 3.2 实验部分 | 第54-55页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第54页 |
| 3.2.2 主要试剂 | 第54-55页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第55页 |
| 3.3 实验方法 | 第55-56页 |
| 3.3.1 细胞培养 | 第55页 |
| 3.3.2 TRAIL耐药细胞系的建立 | 第55页 |
| 3.3.3 Western Blot实验 | 第55页 |
| 3.3.4 定量PCR | 第55页 |
| 3.3.5 载体构建 | 第55-56页 |
| 3.3.6 细胞转染实验 | 第56页 |
| 3.3.7 动物实验 | 第56页 |
| 3.3.8 流式检测细胞凋亡 | 第56页 |
| 3.3.9 数据分析 | 第56页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第56-64页 |
| 3.4.1 TRAIL耐药细胞株的建立 | 第56-57页 |
| 3.4.2 LH86-TR细胞凋亡通路的变化 | 第57-58页 |
| 3.4.3 多种促存活和促凋亡基因在LH86-TR细胞中的变化 | 第58-60页 |
| 3.4.4 干细胞多能性因子Msi1在耐药细胞中表达升高 | 第60-61页 |
| 3.4.5 Msi1在体内外调节肝癌细胞对TRAIL的敏感性 | 第61-63页 |
| 3.4.6 ERK参与Msi1介导的肝癌细胞对TRAIL的耐药作用 | 第63-64页 |
| 3.5 小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-87页 |
| 附录A 攻读学位期间所发表的学术论文目录和专利 | 第87-89页 |
| 附录B NDV诱导对TRAIL耐药肝癌细胞死亡的机制研究 | 第89-110页 |
| 摘要 | 第89-90页 |
| Abstract | 第90-91页 |
| B.1 前言 | 第91页 |
| B.2 材料方法 | 第91-93页 |
| B.3 结果与讨论 | 第93-105页 |
| B.3.1 不同肝癌细胞对TRAIL的敏感性差异 | 第93-94页 |
| B.3.2 NDV对耐凋亡肝癌细胞具有溶瘤作用 | 第94-96页 |
| B.3.3 NDV逆转肿瘤细胞的耐凋亡现象 | 第96-97页 |
| B.3.4 NDV诱导肝癌细胞中ISG12a的表达 | 第97-98页 |
| B.3.5 NDV在原代肝细胞中比在肿瘤细胞中诱导更强的先天免疫反应 | 第98-100页 |
| B.3.6 ISG12a在肝癌细胞中抑制病毒复制并增强NDV的溶瘤作用 | 第100-101页 |
| B.3.7 ISG12a通过RIG-I抑制NDV病毒复制调节NDV的溶瘤过程 | 第101-105页 |
| 结论 | 第105-107页 |
| 参考文献 | 第107-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
