摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
上篇 文献综述 | 第11-20页 |
第一章 类似真核生物组蛋白的核结构蛋白H-NS的研究进展 | 第12-16页 |
1 H-NS的分布和结构 | 第12-13页 |
2 H-NS的功能 | 第13-14页 |
3 本研究的目的和意义 | 第14-16页 |
第二章 水稻白叶枯病菌毒力因子的研究 | 第16-20页 |
1 hrp基因 | 第16-17页 |
2 细菌Ⅲ型分泌系统及其分泌的效应蛋白 | 第17-20页 |
2.1 Non-TAL效应物 | 第17-18页 |
2.2 TAL效应物 | 第18-20页 |
下篇 研究内容 | 第20-72页 |
第一章 水稻白叶枯病菌中H-NS蛋白基因分析 | 第22-28页 |
1 材料与方法 | 第23页 |
2 结果与分析 | 第23-25页 |
2.1 PXO99~A中编码H-NS蛋白的基因 | 第23-24页 |
2.2 PXO99~A与其它Xoo菌株编码H-NS蛋白的基因一致性比较 | 第24-25页 |
3 讨论 | 第25-28页 |
第二章 xrv基因缺失突变菌株的构建及功能互补 | 第28-46页 |
1 材料与方法 | 第29-40页 |
1.1 菌株和质粒 | 第29-30页 |
1.2 培养条件和抗生素 | 第30-32页 |
1.3 引物设计与合成 | 第32页 |
1.4 细菌基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
1.5 质粒的提取 | 第33-34页 |
1.6 质粒和载体的酶切回收 | 第34页 |
1.7 连接 | 第34-35页 |
1.8 连接产物的转化 | 第35-36页 |
1.9 核酸电泳缓冲液 | 第36页 |
1.10 序列测定 | 第36页 |
1.11 xrv基因敲除重组体的构建 | 第36-38页 |
1.12 黄单胞菌感受态的制备 | 第38-39页 |
1.13 黄单胞菌的转化方法 | 第39页 |
1.14 转化pFlp质粒消除卡那霉素抗性基因KD13 | 第39-40页 |
1.15 xrv基因回补菌株的构建 | 第40页 |
2 结果与分析 | 第40-44页 |
2.1 水稻白叶枯病菌PXO99ΔxrvA的获得和验证 | 第40-41页 |
2.2 xrvC基因无痕敲除载体的验证 | 第41-42页 |
2.3 水稻白叶枯病菌PXO99ΔxrvC的获得和验证 | 第42-43页 |
2.4 水稻白叶枯病菌PXO99ΔxrvAΔxrvC的获得和验证 | 第43页 |
2.5 xrv基因回补菌株的获得和验证 | 第43-44页 |
3 讨论 | 第44-46页 |
第三章 xrv基因缺失突变菌株的表型测定 | 第46-56页 |
1 材料与方法 | 第47-49页 |
1.1 供试菌株 | 第47页 |
1.2 植物材料 | 第47-48页 |
1.3 培养基、培养条件和抗生素 | 第48页 |
1.4 xrv突变菌株生长速率测定 | 第48页 |
1.5 水稻白叶枯病菌对烟草过敏反应的测定 | 第48页 |
1.6 Micro-HR测定 | 第48页 |
1.7 离子电导率分析 | 第48-49页 |
1.8 水稻白叶枯病菌对水稻毒力的测定 | 第49页 |
1.9 水稻中细菌生长曲线的测定 | 第49页 |
1.10 数据统计分析 | 第49页 |
2 结果与分析 | 第49-54页 |
2.1 xrvA、xrvC缺失减缓PXO99~A在NB和XOM2培养基上的生长速率 | 第49-50页 |
2.2 xrvA、xrvC缺失增强PXO99~A在烟草上引起过敏反应的能力 | 第50-51页 |
2.3 xrvA、xrvC缺失降低PXO99~A在IRBB214上的毒力 | 第51-54页 |
3 讨论 | 第54-56页 |
第四章 xrv基因在菌株毒力中的作用机制初探 | 第56-72页 |
1 材料与方法 | 第57-63页 |
1.1 供试菌株 | 第58页 |
1.2 主要试剂 | 第58页 |
1.3 特异性引物的设计与合成 | 第58-60页 |
1.4 细菌总RNA的提取 | 第60页 |
1.5 水稻叶片总RNA的提取 | 第60-61页 |
1.6 反转录 | 第61-62页 |
1.7 实时荧光定量检测hrp基因、18个non-TAL基因及Os8N3的表达情况 | 第62页 |
1.8 qRT-PCR的结果分析 | 第62页 |
1.9 腺苷酸环化酶酶活检测 | 第62-63页 |
2 结果与分析 | 第63-69页 |
2.1 xrvA、xrvC基因正调控hrp基因的表达 | 第63-64页 |
2.2 xrvA、xrvC缺失对non-TAL基因表达的影响 | 第64-66页 |
2.3 xrvA、xrvC缺失降低了PXO99~A对水稻感病基因Os8N3的诱导表达 | 第66-68页 |
2.4 xrvA、xrvC缺失不影响PthXo1蛋白向植物的分泌 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69-72页 |
全文总结 | 第72-74页 |
参考文献 | 第74-80页 |
附录 本论文涉及载体的图谱及其特性 | 第80-82页 |
致谢 | 第82-84页 |
本论文研究受资助基金 | 第84页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第84页 |