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水稻白叶枯病菌PXO99~A中2个xrv基因功能研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
上篇 文献综述第11-20页
    第一章 类似真核生物组蛋白的核结构蛋白H-NS的研究进展第12-16页
        1 H-NS的分布和结构第12-13页
        2 H-NS的功能第13-14页
        3 本研究的目的和意义第14-16页
    第二章 水稻白叶枯病菌毒力因子的研究第16-20页
        1 hrp基因第16-17页
        2 细菌Ⅲ型分泌系统及其分泌的效应蛋白第17-20页
            2.1 Non-TAL效应物第17-18页
            2.2 TAL效应物第18-20页
下篇 研究内容第20-72页
    第一章 水稻白叶枯病菌中H-NS蛋白基因分析第22-28页
        1 材料与方法第23页
        2 结果与分析第23-25页
            2.1 PXO99~A中编码H-NS蛋白的基因第23-24页
            2.2 PXO99~A与其它Xoo菌株编码H-NS蛋白的基因一致性比较第24-25页
        3 讨论第25-28页
    第二章 xrv基因缺失突变菌株的构建及功能互补第28-46页
        1 材料与方法第29-40页
            1.1 菌株和质粒第29-30页
            1.2 培养条件和抗生素第30-32页
            1.3 引物设计与合成第32页
            1.4 细菌基因组DNA的提取第32-33页
            1.5 质粒的提取第33-34页
            1.6 质粒和载体的酶切回收第34页
            1.7 连接第34-35页
            1.8 连接产物的转化第35-36页
            1.9 核酸电泳缓冲液第36页
            1.10 序列测定第36页
            1.11 xrv基因敲除重组体的构建第36-38页
            1.12 黄单胞菌感受态的制备第38-39页
            1.13 黄单胞菌的转化方法第39页
            1.14 转化pFlp质粒消除卡那霉素抗性基因KD13第39-40页
            1.15 xrv基因回补菌株的构建第40页
        2 结果与分析第40-44页
            2.1 水稻白叶枯病菌PXO99ΔxrvA的获得和验证第40-41页
            2.2 xrvC基因无痕敲除载体的验证第41-42页
            2.3 水稻白叶枯病菌PXO99ΔxrvC的获得和验证第42-43页
            2.4 水稻白叶枯病菌PXO99ΔxrvAΔxrvC的获得和验证第43页
            2.5 xrv基因回补菌株的获得和验证第43-44页
        3 讨论第44-46页
    第三章 xrv基因缺失突变菌株的表型测定第46-56页
        1 材料与方法第47-49页
            1.1 供试菌株第47页
            1.2 植物材料第47-48页
            1.3 培养基、培养条件和抗生素第48页
            1.4 xrv突变菌株生长速率测定第48页
            1.5 水稻白叶枯病菌对烟草过敏反应的测定第48页
            1.6 Micro-HR测定第48页
            1.7 离子电导率分析第48-49页
            1.8 水稻白叶枯病菌对水稻毒力的测定第49页
            1.9 水稻中细菌生长曲线的测定第49页
            1.10 数据统计分析第49页
        2 结果与分析第49-54页
            2.1 xrvA、xrvC缺失减缓PXO99~A在NB和XOM2培养基上的生长速率第49-50页
            2.2 xrvA、xrvC缺失增强PXO99~A在烟草上引起过敏反应的能力第50-51页
            2.3 xrvA、xrvC缺失降低PXO99~A在IRBB214上的毒力第51-54页
        3 讨论第54-56页
    第四章 xrv基因在菌株毒力中的作用机制初探第56-72页
        1 材料与方法第57-63页
            1.1 供试菌株第58页
            1.2 主要试剂第58页
            1.3 特异性引物的设计与合成第58-60页
            1.4 细菌总RNA的提取第60页
            1.5 水稻叶片总RNA的提取第60-61页
            1.6 反转录第61-62页
            1.7 实时荧光定量检测hrp基因、18个non-TAL基因及Os8N3的表达情况第62页
            1.8 qRT-PCR的结果分析第62页
            1.9 腺苷酸环化酶酶活检测第62-63页
        2 结果与分析第63-69页
            2.1 xrvA、xrvC基因正调控hrp基因的表达第63-64页
            2.2 xrvA、xrvC缺失对non-TAL基因表达的影响第64-66页
            2.3 xrvA、xrvC缺失降低了PXO99~A对水稻感病基因Os8N3的诱导表达第66-68页
            2.4 xrvA、xrvC缺失不影响PthXo1蛋白向植物的分泌第68-69页
        3 讨论第69-72页
全文总结第72-74页
参考文献第74-80页
附录 本论文涉及载体的图谱及其特性第80-82页
致谢第82-84页
本论文研究受资助基金第84页
攻读学位期间发表的学术论文第84页

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