| 致谢 | 第4-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 英文缩略语表 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-16页 |
| 第二章 综述 | 第16-22页 |
| 1. ABCA1概述 | 第17-18页 |
| 1.1 ABCA1的表达会受到多种机制的调控作用 | 第18页 |
| 1.1.1 ABCA1的表达受肝X受体(LXR)以及维甲酸X受体(RXR)的调控 | 第18页 |
| 1.2 ABCA1的表达受cAMP的调控 | 第18页 |
| 2. ABCB1概述 | 第18-19页 |
| 3. ABCC1概述 | 第19-20页 |
| 4. ABC家族其他转运子的抗砷作用 | 第20页 |
| 结论 | 第20-22页 |
| 第三章 材料 | 第22-25页 |
| 3.1 实验细胞株与原代动物细胞 | 第22页 |
| 3.2 试剂和试剂盒 | 第22页 |
| 3.3 主要仪器设备 | 第22-23页 |
| 3.4. 常用试剂的配制 | 第23页 |
| 3.5 qPCR引物 | 第23-25页 |
| 第四章 方法 | 第25-34页 |
| 4.1 细胞株L-02的复苏、培养以及保存 | 第25-27页 |
| 4.1.1 复苏L-02细胞 | 第25页 |
| 4.1.2 L-02细胞的观察培养以及细胞传代 | 第25-26页 |
| 4.1.3 L-02细胞的冻存 | 第26页 |
| 4.1.4 细胞计数 | 第26-27页 |
| 4.2 THP-1细胞的复苏、培养及诱导成巨噬细胞 | 第27-28页 |
| 4.2.1 THP-1巨噬细胞复苏 | 第27页 |
| 4.2.2 THP-1巨噬细胞的培养以及细胞传代 | 第27页 |
| 4.2.3 PMA的配制 | 第27页 |
| 4.2.4 细胞的诱导 | 第27-28页 |
| 4.3 原代小鼠肝细胞及巨噬细胞培养 | 第28-29页 |
| 4.3.1 原代小鼠肝细胞培养 | 第28页 |
| 4.3.2 原代小鼠巨噬细胞培养 | 第28-29页 |
| 4.4 实时荧光定量PCR检测ABCA1、ABCG1和SR-BI的mRNA水平的表达 | 第29-30页 |
| 4.4.1 抽提用品Rnase-free处理 | 第29页 |
| 4.4.2 RNA的抽提 | 第29页 |
| 4.4.3 RNA的产率和纯度鉴定 | 第29页 |
| 4.4.4 RNA逆转录为cDNA | 第29-30页 |
| 4.4.5 实时定量PCR | 第30页 |
| 4.5 用Western-blot法来检测目的蛋白的表达 | 第30-32页 |
| 4.5.1 蛋白的样本制备 | 第30-31页 |
| 4.5.2 SDS-PAGE电泳 | 第31页 |
| 4.5.3 转膜 | 第31页 |
| 4.5.4 加入抗体 | 第31页 |
| 4.5.5 化学发光,显影,定影 | 第31-32页 |
| 4.5.6 凝胶图像分析 | 第32页 |
| 4.6 CCK8法检测细胞活性 | 第32页 |
| 4.7 同位素示踪胆固醇流出实验 | 第32-33页 |
| 4.8 数据处理 | 第33-34页 |
| 第五章 结果 | 第34-45页 |
| 5.1 CCK8检测L-02细胞生存率变化 | 第34页 |
| 5.2 砷暴露降低THP-1巨噬细胞内ABCA1、ABCG1的表达,从而抑制细胞内胆固醇的排出 | 第34-36页 |
| 5.2.1 qPCR检测ABCA1、ABCG1和SR-BI的基因表达量 | 第35页 |
| 5.2.2 Western blotting检测ABCA1、ABCG1和SR-BI蛋白表达量 | 第35页 |
| 5.2.3 ~3H同位素示踪胆固醇检测THP-1细胞内胆固醇的流出率 | 第35-36页 |
| 5.3 砷暴露降低人源原代巨噬细胞内ABCA1、ABCG1的表达,从而抑制细胞内胆固醇的排出 | 第36-38页 |
| 5.3.1 qPCR检测ABCA1、ABCG1和SR-BI的基因表达量 | 第36-37页 |
| 5.3.2 Western blotting检测ABCA1、ABCG1和SR-BI蛋白表达量 | 第37页 |
| 5.3.3 ~3H同位素示踪胆固醇检测THP-1细胞内胆固醇的流出率 | 第37-38页 |
| 5.4 砷暴露对THP-1巨噬细胞胆固醇流出及相关基因表达的时效性影响 | 第38页 |
| 5.5 砷暴露抑制RAW264.7巨噬细胞内ABCA1、ABCG1的表达,从而降低细胞内胆固醇的排出率 | 第38-40页 |
| 5.5.1 qPCR检测ABCA1、ABCG1和SR-BI的基因表达量 | 第39页 |
| 5.5.2 Western blotting检测ABCA1、ABCG1和SR-BI蛋白表达量 | 第39页 |
| 5.5.3 ~3H同位素示踪胆固醇检测THP-1细胞内胆固醇的流出率 | 第39-40页 |
| 5.6 砷暴露抑制小鼠原代巨噬细胞内ABCA1、ABCG1的表达,从而降低细胞内胆固醇的排出率 | 第40-41页 |
| 5.6.1 qPCR检测ABCA1、ABCG1和SR-BI的基因表达量 | 第40页 |
| 5.6.2 Western blotting检测ABCA1、ABCG1和SR-BI蛋白表达量 | 第40页 |
| 5.6.3 ~3H同位素示踪胆固醇检测THP-1细胞内胆固醇的流出率 | 第40-41页 |
| 5.7 砷暴露提升L-02细胞内ABCA1、ABCG1的表达,从而促进细胞内胆固醇的排出 | 第41-42页 |
| 5.8 砷暴露提升小鼠原代肝细胞内ABCA1、ABCG1的表达,从而促进细胞内胆固醇的排出 | 第42-43页 |
| 5.8.1 qPCR检测ABCA1、ABCG1和SR-BI的基因表达量 | 第42页 |
| 5.8.2 Western blot检测ABCA1、ABCG1和SR-BI的基因表达量 | 第42页 |
| 5.8.3 ~3H同位素示踪胆固醇检测THP-1细胞内胆固醇的流出率 | 第42-43页 |
| 5.9 砷暴露对L-02肝细胞胆固醇流出及相关基因表达的时效性影响 | 第43-45页 |
| 第六章 实验讨论 | 第45-48页 |
| 第七章 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-52页 |
