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青岛文昌鱼过氧化氢酶基因的克隆与表达研究

致谢第5-6页
摘要第6-8页
Abstract第8-9页
第一章 前言第13-17页
    1.1 文昌鱼简介第13页
    1.2 文昌鱼资源历史与现状第13-14页
    1.3 文昌鱼免疫学研究第14-15页
    1.4 研究目的第15-16页
    1.5 技术路线第16-17页
第2章 文献综述第17-25页
    2.1 过氧化氢酶的结构与功能第17-21页
        2.1.1 CAT的结构第17-19页
        2.1.2 CAT的功能第19-21页
            2.1.2.1 CAT在微生物中的功能第19页
            2.1.2.2 CAT在植物中的功能第19-20页
            2.1.2.3 CAT在动物中的功能第20-21页
    2.2 近几年研究的十种动物CAT的基因序列分析第21-23页
    2.3 过氧化氢酶的表达研究第23-25页
第三章 文昌鱼过氧化氢酶基因的克隆、生物信息学分析及功能分析第25-59页
    3.1 前言第25页
    3.2 材料与方法第25-40页
        3.2.1 青岛文昌鱼Amphicat基因cDNA序列全长的克隆第25-31页
            3.2.1.1 文昌鱼总RNA的提取第25-26页
            3.2.1.2 Amphicat基因cDNA保守序列的获取第26-28页
            3.2.1.3 cDNA全长的获取第28-30页
            3.2.1.4 文昌鱼Amphicat基因的克隆与测序第30-31页
        3.2.2 文昌鱼Amphicat基因DNA序列的克隆第31-33页
            3.2.2.1 文昌鱼DNA的提取第31-32页
            3.2.2.2 DNA片段的获取第32-33页
        3.2.3 文昌鱼Amphicat基因序列分析第33-34页
        3.2.4 文昌鱼各组织中Amphicat基因表达的初步研究第34-39页
            3.2.4.1 原位杂交中涉及到的一些试剂的配制第34-36页
            3.2.4.2 探针制备第36-37页
            3.2.4.3 文昌鱼石蜡切片的制作第37-38页
            3.2.4.4 组织切片原位杂交第38-39页
        3.2.5 重金属铬对文昌鱼Amphicat基因表达影响的研究第39-40页
            3.2.5.1 材料处理第39页
            3.2.5.2 引物设计第39页
            3.2.5.3 PCR反应第39-40页
    3.3 结果第40-56页
        3.3.1 总RNA的提取第40-41页
        3.3.2 CAT基因cDNA保守序列的获取第41-42页
        3.3.3 3 ’RACE和 5’RACE序列的获取第42-43页
        3.3.4 CAT基因cDNA全序列的获得第43页
        3.3.5 文昌鱼DNA的提取第43-44页
        3.3.6 文昌鱼Amphicat基因DNA序列的获得第44-46页
            3.3.6.1 DNA序列获取电泳结果图第44-45页
            3.3.6.2 DNA序列测序结果第45页
            3.3.6.3 DNA序列拼接后基因结构预测第45-46页
        3.3.7 Amphicat基因序列分析第46-48页
        3.3.8 CAT蛋白质的理化性质预测第48页
        3.3.9 CAT氨基酸序列相似性分析第48-51页
        3.3.10 CAT蛋白的结构与功能预测第51-52页
        3.3.11 CAT基因序列的系统进化分析第52-53页
        3.3.12 原位杂交技术检测Amphicat基因的表达水平第53-54页
        3.3.13 实时定量PCR检测Amphicat基因在重金属作用下的影响第54-56页
    3.4 讨论第56-59页
        3.4.1 文昌鱼过氧化氢酶基因序列与氨基酸序列分析第56页
        3.4.2 文昌鱼过氧化氢酶结构分析第56-57页
        3.4.3 文昌鱼过氧化氢酶功能分析第57-59页
总结与展望第59-60页
参考文献第60-66页
附录A第66-69页
附录B第69-76页
作者简历第76页

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