摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-22页 |
1.1 血吸虫病概述 | 第13-14页 |
1.2 日本血吸虫病诊断方法 | 第14-18页 |
1.2.1 病原学诊断 | 第14页 |
1.2.2 免疫学诊断 | 第14-16页 |
1.2.3 分子生物学诊断 | 第16-18页 |
1.3 胶体金免疫层析试验 | 第18-22页 |
1.3.1 胶体金的发现 | 第18页 |
1.3.2 胶体金的性质及制备 | 第18-19页 |
1.3.3 胶体金探针的制备 | 第19页 |
1.3.4 胶体金免疫检测技术 | 第19-20页 |
1.3.5 胶体金免疫层析技术的应用 | 第20-22页 |
第二章 链球菌蛋白G的结构域重构、表达及鉴定 | 第22-37页 |
2.1 引言 | 第22页 |
2.2 实验材料 | 第22-26页 |
2.2.1 生物材料 | 第22页 |
2.2.2 仪器设备 | 第22-23页 |
2.2.3 酶和试剂 | 第23页 |
2.2.4 试剂配制 | 第23-26页 |
2.3 实验方法 | 第26-29页 |
2.3.1 重组蛋白G的构建 | 第26页 |
2.3.2 重组质粒的构建、转化和表达 | 第26-28页 |
2.3.3 重组蛋白的纯化 | 第28页 |
2.3.4 Western blotting检测重组蛋白与IgG的结合活性 | 第28-29页 |
2.3.5 ELISA法测定重组蛋白与不同物种IgG亲和常数 | 第29页 |
2.4 结果 | 第29-35页 |
2.4.1 重组蛋白G原核表达质粒构建 | 第29-30页 |
2.4.2 重组蛋白的诱导表达和可溶性鉴定 | 第30-32页 |
2.4.3 重组蛋白的纯化 | 第32页 |
2.4.4 重组蛋白与IgG结合活力测定 | 第32-33页 |
2.4.5 ELISA法测定重组蛋白与不同物种IgG亲和常数 | 第33-35页 |
2.5 讨论 | 第35-37页 |
第三章 胶体金免疫层析试纸条的组装及优化 | 第37-48页 |
3.1 引言 | 第37页 |
3.2 实验材料 | 第37-38页 |
3.2.1 生物材料 | 第37页 |
3.2.2 仪器设备 | 第37页 |
3.2.3 酶和试剂 | 第37-38页 |
3.2.4 试剂配制 | 第38页 |
3.3 实验方法 | 第38-41页 |
3.3.1 胶体金的烧制 | 第38页 |
3.3.2 可溶性虫卵抗原(SEA)的制备 | 第38-39页 |
3.3.3 胶体金标记的最佳PH值 | 第39页 |
3.3.4 胶体金标记的最佳蛋白标记量 | 第39页 |
3.3.5 胶体金探针的制备 | 第39-40页 |
3.3.6 胶体金免疫层析试纸条的制备及优化 | 第40-41页 |
3.3.7 胶体金免疫层析试纸条保存 | 第41页 |
3.4 结果 | 第41-46页 |
3.4.1 胶体金颗粒的鉴定 | 第41-42页 |
3.4.2 胶体金标记蛋白的最佳PH值及最佳蛋白标记量 | 第42-44页 |
3.4.3 稳定液及重悬液的选择 | 第44页 |
3.4.4 金标垫及样品垫的选择 | 第44-45页 |
3.4.5 检测线、质控线及血清最佳用量 | 第45-46页 |
3.5 讨论 | 第46-48页 |
第四章 胶体金免疫层析试纸条的初步应用 | 第48-56页 |
4.1 引言 | 第48页 |
4.2 实验材料 | 第48-49页 |
4.2.1 生物材料 | 第48页 |
4.2.2 仪器设备 | 第48页 |
4.2.3 酶和试剂 | 第48页 |
4.2.4 试剂配制 | 第48-49页 |
4.3 实验方法 | 第49-51页 |
4.3.1 GICA法对实验动物血吸虫病的检测 | 第49页 |
4.3.2 GICA法对水牛、山羊血吸虫病的检测 | 第49页 |
4.3.3 GICA法对水牛不同感染强度的血吸虫病检测 | 第49页 |
4.3.4 试纸条交叉反应性的初步评价 | 第49-50页 |
4.3.5 GICA法对水牛血纸的检测 | 第50页 |
4.3.6 统计学分析 | 第50页 |
4.3.7 胶体金免疫层析试纸条的稳定性实验 | 第50-51页 |
4.3.8 胶体金免疫层析试纸条的重复性实验 | 第51页 |
4.4 实验结果 | 第51-55页 |
4.4.1 GICA法检测的敏感性、特异性 | 第51-52页 |
4.4.2 对水牛不同感染强度的检测 | 第52-53页 |
4.4.3 交叉反应性 | 第53页 |
4.4.4 对水牛血纸检测 | 第53-54页 |
4.4.5 稳定性实验 | 第54-55页 |
4.4.6 重复性实验 | 第55页 |
4.5 讨论 | 第55-56页 |
第五章 全文结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简历 | 第64页 |