中文摘要 | 第3-5页 |
英文摘要 | 第5-6页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 绪论 | 第11-17页 |
1.1 水稻根系的形态建成 | 第11页 |
1.2 水稻根系的生理功能 | 第11-12页 |
1.3 环境因素对水稻根系的影响 | 第12页 |
1.4 水稻OsRAA1基因的相关研究 | 第12-13页 |
1.5 生长素调控植物根系的生长发育 | 第13页 |
1.6 活性氧与植物的生长发育 | 第13-15页 |
1.6.1 活性氧参与根的发育调控 | 第14-15页 |
1.6.2 ROS参与植物非生物胁迫反应的调控 | 第15页 |
1.7 课题研究的目的及意义 | 第15-16页 |
1.8 研究内容 | 第16页 |
1.9 创新之处 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-35页 |
2.1 材料 | 第17页 |
2.1.1 实验材料 | 第17页 |
2.1.2 分子生物学试剂 | 第17页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第17页 |
2.2 培养基及储存液配方 | 第17-20页 |
2.2.1 1/2MS培养基(1L)的配制 | 第17-18页 |
2.2.2 LB培养基(1L) | 第18页 |
2.2.3 YPAD培养基(1L) | 第18-19页 |
2.2.4 SD培养基(1L) | 第19页 |
2.2.5 GUS染液配方(50ml) | 第19页 |
2.2.6 植物基因组DNA和总RNA提取液配方 | 第19页 |
2.2.7 胁迫处理是所用试剂 | 第19-20页 |
2.2.8 NBT和DAB溶液的配制方法 | 第20页 |
2.3 OsRAA1超表达和RNAi干扰植株的表型鉴定 | 第20-22页 |
2.3.1 转基因植株阳性检测 | 第20-21页 |
2.3.2 T1代植株的种植 | 第21-22页 |
2.4 水稻幼苗的培养及胁迫处理 | 第22-24页 |
2.4.1 水稻总RNA的提取及反转录 | 第22-23页 |
2.4.2 荧光定量PCR(qPCR)反应体系及反应程序 | 第23-24页 |
2.5 OsRAA1与生长素关系的探究 | 第24-25页 |
2.5.1 野生型及转基因水稻的培养及表型观察 | 第24页 |
2.5.2 生长素信号路径相关基因表达量的检测 | 第24-25页 |
2.6 OsRAA1超表达、干扰植株转录组分析 | 第25-27页 |
2.7 OsRAA1转基因植株中ROS含量分析 | 第27-28页 |
2.7.1 根中ROS的组织化学染色 | 第27页 |
2.7.2 ROS相关基因的定量分析 | 第27-28页 |
2.8 OsRAA1的互作蛋白筛选 | 第28-33页 |
2.8.1 酵母双杂交BD载体的构建 | 第28-30页 |
2.8.2 OsRAA1转录激活和自身互作检测 | 第30-31页 |
2.8.3 酵母双杂交筛选 | 第31-32页 |
2.8.4 酵母质粒提取 | 第32-33页 |
2.9 OsRAA1与OsRboh基因互作的验证 | 第33-35页 |
2.9.1 构建OsRboh基因的AD载体 | 第33页 |
2.9.2 OsRAA1与OsRboh蛋白互作验证 | 第33-35页 |
3 实验结果 | 第35-55页 |
3.1 OsRAA1的异常表达抑制水稻主根的生长,并形成螺旋状根 | 第35-36页 |
3.2 OsRAA1的异常表达导致水稻花粉粒活性下降 | 第36-38页 |
3.3 OsRAA1在水稻中参与了生长素信号介导的根形态建成 | 第38-40页 |
3.4 OsRAA1超表达、RNAi干扰植株转录组分析 | 第40-49页 |
3.4.1 差异基因表达分析 | 第40-41页 |
3.4.2 差异基因的GO功能显著性富集分析 | 第41-44页 |
3.4.3 OsRAA1影响与生长素信号途径和ROS含量相关基因的表达 | 第44-49页 |
3.5 OsRAA1通过影响根中ROS的含量从而影响水稻根系的生长 | 第49-52页 |
3.6 酵母双杂交筛选OsRAA1互作蛋白 | 第52-53页 |
3.7 OsRAA1与OsRboh F蛋白互作验证 | 第53-55页 |
4 讨论 | 第55-59页 |
4.1 OsRAA1对植株生长发育的影响是多方面的 | 第55页 |
4.2 OsRAA1参与生长素信号转导途径 | 第55-56页 |
4.3 OsRAA1调节水稻根中ROS的含量 | 第56-57页 |
4.4 ROS和生长素协同作用调节植株的生长 | 第57-59页 |
5 总结 | 第59-61页 |
致谢 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
附录 | 第69页 |
A. 作者攻读硕士学位期间发表的论文目录 | 第69页 |
B. OsRAA1基因序列 | 第69页 |