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水稻根特异性表达基因OsRAA1的功能研究

中文摘要第3-5页
英文摘要第5-6页
缩略词表第10-11页
1 绪论第11-17页
    1.1 水稻根系的形态建成第11页
    1.2 水稻根系的生理功能第11-12页
    1.3 环境因素对水稻根系的影响第12页
    1.4 水稻OsRAA1基因的相关研究第12-13页
    1.5 生长素调控植物根系的生长发育第13页
    1.6 活性氧与植物的生长发育第13-15页
        1.6.1 活性氧参与根的发育调控第14-15页
        1.6.2 ROS参与植物非生物胁迫反应的调控第15页
    1.7 课题研究的目的及意义第15-16页
    1.8 研究内容第16页
    1.9 创新之处第16-17页
2 材料与方法第17-35页
    2.1 材料第17页
        2.1.1 实验材料第17页
        2.1.2 分子生物学试剂第17页
        2.1.3 主要仪器设备第17页
    2.2 培养基及储存液配方第17-20页
        2.2.1 1/2MS培养基(1L)的配制第17-18页
        2.2.2 LB培养基(1L)第18页
        2.2.3 YPAD培养基(1L)第18-19页
        2.2.4 SD培养基(1L)第19页
        2.2.5 GUS染液配方(50ml)第19页
        2.2.6 植物基因组DNA和总RNA提取液配方第19页
        2.2.7 胁迫处理是所用试剂第19-20页
        2.2.8 NBT和DAB溶液的配制方法第20页
    2.3 OsRAA1超表达和RNAi干扰植株的表型鉴定第20-22页
        2.3.1 转基因植株阳性检测第20-21页
        2.3.2 T1代植株的种植第21-22页
    2.4 水稻幼苗的培养及胁迫处理第22-24页
        2.4.1 水稻总RNA的提取及反转录第22-23页
        2.4.2 荧光定量PCR(qPCR)反应体系及反应程序第23-24页
    2.5 OsRAA1与生长素关系的探究第24-25页
        2.5.1 野生型及转基因水稻的培养及表型观察第24页
        2.5.2 生长素信号路径相关基因表达量的检测第24-25页
    2.6 OsRAA1超表达、干扰植株转录组分析第25-27页
    2.7 OsRAA1转基因植株中ROS含量分析第27-28页
        2.7.1 根中ROS的组织化学染色第27页
        2.7.2 ROS相关基因的定量分析第27-28页
    2.8 OsRAA1的互作蛋白筛选第28-33页
        2.8.1 酵母双杂交BD载体的构建第28-30页
        2.8.2 OsRAA1转录激活和自身互作检测第30-31页
        2.8.3 酵母双杂交筛选第31-32页
        2.8.4 酵母质粒提取第32-33页
    2.9 OsRAA1与OsRboh基因互作的验证第33-35页
        2.9.1 构建OsRboh基因的AD载体第33页
        2.9.2 OsRAA1与OsRboh蛋白互作验证第33-35页
3 实验结果第35-55页
    3.1 OsRAA1的异常表达抑制水稻主根的生长,并形成螺旋状根第35-36页
    3.2 OsRAA1的异常表达导致水稻花粉粒活性下降第36-38页
    3.3 OsRAA1在水稻中参与了生长素信号介导的根形态建成第38-40页
    3.4 OsRAA1超表达、RNAi干扰植株转录组分析第40-49页
        3.4.1 差异基因表达分析第40-41页
        3.4.2 差异基因的GO功能显著性富集分析第41-44页
        3.4.3 OsRAA1影响与生长素信号途径和ROS含量相关基因的表达第44-49页
    3.5 OsRAA1通过影响根中ROS的含量从而影响水稻根系的生长第49-52页
    3.6 酵母双杂交筛选OsRAA1互作蛋白第52-53页
    3.7 OsRAA1与OsRboh F蛋白互作验证第53-55页
4 讨论第55-59页
    4.1 OsRAA1对植株生长发育的影响是多方面的第55页
    4.2 OsRAA1参与生长素信号转导途径第55-56页
    4.3 OsRAA1调节水稻根中ROS的含量第56-57页
    4.4 ROS和生长素协同作用调节植株的生长第57-59页
5 总结第59-61页
致谢第61-63页
参考文献第63-69页
附录第69页
    A. 作者攻读硕士学位期间发表的论文目录第69页
    B. OsRAA1基因序列第69页

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