| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第10-22页 |
| 1.1 植物MAPK级联反应途径及逆境胁迫下的应答模式 | 第10-15页 |
| 1.1.1 植物MAPK级联反应途径组成 | 第10-11页 |
| 1.1.2 MAPK级联反应途径激酶结构 | 第11-12页 |
| 1.1.3 MAPK级联反应途径在逆境胁迫下的应答 | 第12-15页 |
| 1.2 MAPKK家族 | 第15-18页 |
| 1.2.1 植物MAPKK家族概述 | 第15-16页 |
| 1.2.2 植物MAPKK在逆境胁迫应答中的作用 | 第16-18页 |
| 1.3 RNAi研究进展 | 第18-20页 |
| 1.3.1 RNAi技术及其原理 | 第18-19页 |
| 1.3.2 RNAi的特点及其应用 | 第19-20页 |
| 1.4 选题的目的 | 第20页 |
| 1.5 选题的意义 | 第20-22页 |
| 第2章 PtMAPKK6基因在缺陷型酵母菌中的功能互补 | 第22-28页 |
| 2.1 实验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 菌种 | 第22页 |
| 2.1.2 培养基 | 第22-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-24页 |
| 2.2.1 制备酵母菌感受态细胞 | 第23页 |
| 2.2.2 质粒转化酵母菌感受态细胞 | 第23页 |
| 2.2.3 转化子鉴定 | 第23-24页 |
| 2.2.4 PtMAPKK6基因在缺陷型酵母菌中的功能互补 | 第24页 |
| 2.3 实验结果及分析 | 第24-27页 |
| 2.3.1 转化pYES2-PtMAPKK6的pbs2缺陷型酵母菌的PCR鉴定 | 第24-25页 |
| 2.3.2 MAPKK功能互补酵母菌的抗逆性分析 | 第25-27页 |
| 2.4 讨论 | 第27页 |
| 2.5 本章小结 | 第27-28页 |
| 第3章 植物表达载体的构建 | 第28-51页 |
| 3.1 实验材料 | 第28-30页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第28页 |
| 3.1.2 载体和菌株 | 第28页 |
| 3.1.3 培养基及实验试剂 | 第28-29页 |
| 3.1.4 酶、试剂盒 | 第29页 |
| 3.1.5 引物 | 第29-30页 |
| 3.1.6 主要仪器设备 | 第30页 |
| 3.1.7 抗生素 | 第30页 |
| 3.2 实验方法 | 第30-42页 |
| 3.2.1 植物超表达载体的构建 | 第30-34页 |
| 3.2.2 植物抑制性表达载体pTA7002-AtMAPKK6-RNAi的构建 | 第34-42页 |
| 3.3 结果分析 | 第42-49页 |
| 3.3.1 碱裂解法提取质粒 | 第42-43页 |
| 3.3.2 双酶切获取PtMAPKK6基因片段 | 第43页 |
| 3.3.3 酶切获得线性化pTA7002表达载体 | 第43-44页 |
| 3.3.4 植物超表达载体pTA7002-PtMAPKK6的双酶切鉴定 | 第44-45页 |
| 3.3.5 植物超表达载体pTA7002-PtMAPKK6的测序鉴定 | 第45页 |
| 3.3.6 拟南芥总RNA的提取 | 第45-46页 |
| 3.3.7 AtMAPKK6基因正、反向目的基因的扩增 | 第46页 |
| 3.3.8 测序鉴定结果 | 第46-47页 |
| 3.3.9 pHANNIBAL-AtMAPKK6正向重组质粒的鉴定 | 第47-48页 |
| 3.3.10 pHANNIBAL-At MAPKK6-RNAi重组质粒的鉴定 | 第48页 |
| 3.3.11 植物抑制表达载体pTA7002-AtMAPKK6-RNAi的单酶切鉴定 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49-50页 |
| 3.5 本章小结 | 第50-51页 |
| 第4章 拟南芥遗传转化、转基因植株分子鉴定及抗氧化酶活性分析 | 第51-70页 |
| 4.1 实验材料 | 第51-53页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第51页 |
| 4.1.2 载体和菌株 | 第51页 |
| 4.1.3 培养基 | 第51页 |
| 4.1.4 酶、抗生素 | 第51-52页 |
| 4.1.5 引物 | 第52-53页 |
| 4.2 实验方法 | 第53-58页 |
| 4.2.1 农杆菌感受态制备及转化 | 第53页 |
| 4.2.2 农杆菌转化拟南芥植株 | 第53-55页 |
| 4.2.3 转基因拟南芥的筛选及鉴定 | 第55-56页 |
| 4.2.4 外源基因在转基因拟南芥植株中的表达检测 | 第56-58页 |
| 4.2.5 转基因拟南芥在逆境胁迫条件下的抗氧化酶活性分析 | 第58页 |
| 4.3 实验结果及分析 | 第58-68页 |
| 4.3.1 农杆菌转化子的PCR鉴定 | 第58-59页 |
| 4.3.2 拟南芥转基因植株的筛选 | 第59-61页 |
| 4.3.3 T1代转基因拟南芥植株的PCR鉴定 | 第61-65页 |
| 4.3.4 外源基因在拟南芥植株中的表达量检测及抗氧化酶活性分析 | 第65-68页 |
| 4.4 讨论 | 第68-69页 |
| 4.5 本章小结 | 第69-70页 |
| 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-78页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文 | 第78-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
