| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第1章 绪论 | 第12-17页 |
| 1.1 植物倍半萜合酶研究进展 | 第12-14页 |
| 1.1.1 萜类化合物简介 | 第12-13页 |
| 1.1.2 倍半萜合酶的催化机制 | 第13-14页 |
| 1.2 黄花蒿紫穗槐二烯合酶研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3 黄花蒿法呢烯合酶研究进展 | 第15-16页 |
| 1.4 烟草马兜铃烯合酶研究进展 | 第16页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第16-17页 |
| 第2章 材料与方法 | 第17-24页 |
| 2.1 材料 | 第17-19页 |
| 2.1.1 菌种和质粒 | 第17页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18-19页 |
| 2.2 试验方法 | 第19-24页 |
| 2.2.1 快速定点突变 | 第19-20页 |
| 2.2.2 Rosetta（DE3）感受态细胞制备 | 第20页 |
| 2.2.3 感受态细胞的转化 | 第20页 |
| 2.2.4 质粒提取 | 第20-21页 |
| 2.2.5 蛋白表达和纯化 | 第21页 |
| 2.2.6 Bradford方法测定蛋白质浓度 | 第21-22页 |
| 2.2.7 Malachite Green测定无机磷酸含量法测定酶动力学常数 | 第22-23页 |
| 2.2.8 蛋白体外催化反应 | 第23-24页 |
| 第3章 紫穗槐二烯合酶C末端在其功能中的作用 | 第24-31页 |
| 3.1 菌株、载体和试剂 | 第24页 |
| 3.2 实验方法 | 第24-26页 |
| 3.2.1 ADS基因突变位点 | 第24-25页 |
| 3.2.2 突变体基因大肠杆菌感受态细胞表达纯化 | 第25-26页 |
| 3.2.3 突变体蛋白体外催化分析 | 第26页 |
| 3.2.4 突变体蛋白酶动力学测定 | 第26页 |
| 3.3 实验结果 | 第26-30页 |
| 3.3.1 ADS基因突变体 | 第26-27页 |
| 3.3.2 突变体质粒大肠杆菌表达和纯化 | 第27-28页 |
| 3.3.3 突变蛋白催化产物分析 | 第28-29页 |
| 3.3.4 催化活性的初步分析 | 第29-30页 |
| 3.4 讨论 | 第30-31页 |
| 第4章 法呢烯合酶C末端在其功能中的作用 | 第31-39页 |
| 4.1 菌株、载体和试剂 | 第31页 |
| 4.2 方法 | 第31-33页 |
| 4.2.1 BFS基因的突变 | 第31-33页 |
| 4.2.2 突变体大肠杆菌表达和纯化 | 第33页 |
| 4.2.3 突变体纯化蛋白体外催化产物分析 | 第33页 |
| 4.2.4 突变体酶动力学测定 | 第33页 |
| 4.3 结果 | 第33-37页 |
| 4.3.1 BFS基因点突变 | 第33-35页 |
| 4.3.2 突变体大肠杆菌表达和纯化 | 第35-36页 |
| 4.3.3 突变体催化产物分析 | 第36-37页 |
| 4.3.4 催化活性的初步分析 | 第37页 |
| 4.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第5章 马兜铃烯合酶C末端在其功能中的作用 | 第39-47页 |
| 5.1 菌种、载体和试剂 | 第39页 |
| 5.2 方法 | 第39-41页 |
| 5.2.1 EAS基因点突变 | 第39-41页 |
| 5.2.2 突变体大肠杆菌表达和纯化 | 第41页 |
| 5.2.3 突变体纯化蛋白体外催化产物分析 | 第41页 |
| 5.2.4 突变体蛋白酶动力学测定 | 第41页 |
| 5.3 结果 | 第41-46页 |
| 5.3.1 EAS基因点突变 | 第41-43页 |
| 5.3.2 突变体大肠杆菌表达和纯化 | 第43-44页 |
| 5.3.3 突变体催化产物分析 | 第44-45页 |
| 5.3.4 突变体动力学分析 | 第45-46页 |
| 5.4 讨论 | 第46-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 在读期间公开发表的学术论文 | 第55页 |