| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第12-26页 |
| 1.1 课题来源 | 第12页 |
| 1.2 课题研究的目的和意义 | 第12页 |
| 1.3 研究背景 | 第12-25页 |
| 1.3.1 上皮间充质转化(EMT) | 第13-20页 |
| 1.3.2 竞争性内源RNA(ceRNA) | 第20-25页 |
| 1.4 论文的主要研究内容 | 第25-26页 |
| 第二章 实验材料、仪器和方法 | 第26-43页 |
| 2.1 实验材料 | 第26-29页 |
| 2.1.1 肺癌细胞系 | 第26页 |
| 2.1.2 正常乳腺细胞 | 第26页 |
| 2.1.3 人源胚胎肾细胞 | 第26页 |
| 2.1.4 生化试剂 | 第26-28页 |
| 2.1.5 实验耗材 | 第28页 |
| 2.1.6 普通PCR、qRT-PCR和绝对定量PCR引物 | 第28页 |
| 2.1.7 用到的siRNA、shRNA的序列 | 第28-29页 |
| 2.2 实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-43页 |
| 2.3.1 A549细胞培养 | 第30-31页 |
| 2.3.2 MCF-10A细胞培养 | 第31页 |
| 2.3.3 DNA的化学转化 | 第31-32页 |
| 2.3.4 质粒提取实验 | 第32-33页 |
| 2.3.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| 2.3.6 TGF-β诱导A549/MCF-10A细胞系发生EMT的方法 | 第33-34页 |
| 2.3.7 Trizol法提取totalRNA | 第34页 |
| 2.3.8 质量检验试验 | 第34-35页 |
| 2.3.9 qRT-PCR的实验方法 | 第35-36页 |
| 2.3.10 绝对定量PCR | 第36页 |
| 2.3.11 普通PCR实验 | 第36-37页 |
| 2.3.12 基因敲除和3’UTR转入的实验 | 第37页 |
| 2.3.13 蛋白质免疫印迹实验 | 第37-40页 |
| 2.3.14 Transwell实验 | 第40-41页 |
| 2.3.15 荧光素酶报告基因实验 | 第41页 |
| 2.3.16 CDH1和VIM的免疫共聚焦和染色实验 | 第41-42页 |
| 2.3.17 流式细胞术实验 | 第42-43页 |
| 第三章 FOXP1、TGFBI与FN1在A549细胞或MCF10A细胞EMT过程中作用 | 第43-69页 |
| 3.1 FOXP1在A549细胞EMT过程中的作用 | 第43-52页 |
| 3.1.1 FOXP1转录因子的发现 | 第43-49页 |
| 3.1.2 FOXP1在A549细胞EMT过程中的作用 | 第49-52页 |
| 3.2 miR-21与FOXP1在A549细胞EMT过程中的作用与调节网络 | 第52-58页 |
| 3.2.1 miR-21结合在FOXP13’UTR的发现 | 第52-56页 |
| 3.2.2 FOXP1与miR-21调节A549细胞EMT过程 | 第56-58页 |
| 3.3 TGFBI在A549细胞EMT过程中的作用 | 第58-63页 |
| 3.3.1 miR-21在A549细胞EMT过程中的表达趋势 | 第58-59页 |
| 3.3.2 TGFBI在A549细胞EMT过程中功能 | 第59-63页 |
| 3.3.3 关键转录因子ETS2、HNF4A、JUNB对TGFBI表达的影响 | 第63页 |
| 3.3.4 FOXP1对TGFBI表达的影响 | 第63页 |
| 3.4 FN1在MCF-10A细胞EMT过程的作用 | 第63-67页 |
| 3.4.1 MCF-10A细胞EMT过程中经典的ZEB-miR200家族调节模型 | 第63页 |
| 3.4.2 FN1结合在miR200c的3’UTR的发现 | 第63-64页 |
| 3.4.3 FN1与miR-200c在MCF-10A细胞EMT过程的关系 | 第64-66页 |
| 3.4.4 SNAI1与ZEB1对FN1表达的影响 | 第66-67页 |
| 3.5 结果与讨论 | 第67-69页 |
| 第四章 miRNA与ceRNA之间的化学计量学与EMT之间的关系 | 第69-74页 |
| 4.1 miRNA与ceRNA在细胞EMT过程中的当量变化 | 第69页 |
| 4.2 在MCF-10A细胞中FN1与miR-200c之间的化学当量对EMT的影响 | 第69-71页 |
| 4.2.1 FN1与miR-200c之间的化学当量对MCF-10A细胞EMT过程中细胞形态学的影响 | 第69-70页 |
| 4.2.2 流式细胞术表明FN1与miR-200c之间的化学当量对MCF-10A细胞EMT的影响 | 第70-71页 |
| 4.3 在A549细胞中TGFBI与miR-21之间的化学当量对EMT的影响 | 第71-73页 |
| 4.3.1 TGFBI与miR-21之间的化学当量对A549细胞EMT过程中细胞形态学的影响 | 第71-72页 |
| 4.3.2 流式细胞术表明TGFBI与miR-21之间的化学当量对A549细胞EMT的影响 | 第72-73页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第73-74页 |
| 第五章 结论 | 第74-76页 |
| 参考文献 | 第76-85页 |
| 附录1 | 第85-86页 |
| 附录2 | 第86-87页 |
| 作者在攻读硕士学位期间公开发表的论文 | 第87-88页 |
| 作者在攻读硕士学位期间所参与的项目 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89页 |
