| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-9页 |
| 第一章 引言 | 第14-24页 |
| 1.1 水稻条纹叶枯病的研究概况 | 第14-17页 |
| 1.1.1 水稻条纹叶枯病的发生与危害 | 第14页 |
| 1.1.2 水稻条纹叶枯病的病原及传播 | 第14-16页 |
| 1.1.3 水稻条纹叶枯病的症状 | 第16页 |
| 1.1.4 水稻条纹叶枯病的防治 | 第16-17页 |
| 1.2 植物抗病相关蛋白的研究进展 | 第17-19页 |
| 1.2.1 植物的抗病机制 | 第17-18页 |
| 1.2.2 抗病相关蛋白 | 第18-19页 |
| 1.3 植物病毒病害症状形成相关蛋白研究概况 | 第19-20页 |
| 1.4 蛋白质组学分析技术 | 第20-23页 |
| 1.4.1 iTRAQ技术 | 第20-21页 |
| 1.4.2 酵母双杂交系统 | 第21-23页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 第二章 利用iTRAQ技术挖掘水稻的RSV诱导性抗病相关蛋白及症状形成相关蛋白 | 第24-45页 |
| 2.1 材料和方法 | 第24-31页 |
| 2.1.1 材料 | 第24页 |
| 2.1.2 灰飞虱带毒率的检测 | 第24-25页 |
| 2.1.3 样品准备 | 第25页 |
| 2.1.4 水稻发病情况检测 | 第25-26页 |
| 2.1.5 蛋白质提取及定量 | 第26页 |
| 2.1.6 蛋白质酶解 | 第26页 |
| 2.1.7 iTRAQ标记 | 第26-27页 |
| 2.1.8 酶解肽段离线预分离及LC-MS/MS质谱分析 | 第27页 |
| 2.1.9 质谱数据分析 | 第27-28页 |
| 2.1.10 蛋白质鉴定及生物信息学分析 | 第28页 |
| 2.1.11 差异表达蛋白的转录水平验证 | 第28-31页 |
| 2.2 结果与分析 | 第31-41页 |
| 2.2.1 灰飞虱带毒率检测 | 第31页 |
| 2.2.2 水稻发病情况和RT-PCR检测 | 第31-32页 |
| 2.2.3 差异表达蛋白的鉴定和定量 | 第32-35页 |
| 2.2.4 差异蛋白的GO注释 | 第35-36页 |
| 2.2.5 差异蛋白的KEGG注释 | 第36-41页 |
| 2.2.6 差异表达蛋白的转录水平分析 | 第41页 |
| 2.3 讨论 | 第41-45页 |
| 2.3.1 诱导性抗病相关蛋白 | 第41-43页 |
| 2.3.2 症状形成相关蛋白 | 第43-45页 |
| 第三章 与水稻镁离子螯合酶D亚基互作的RSV组分筛选 | 第45-54页 |
| 3.1 材料与方法 | 第45-48页 |
| 3.1.1 材料 | 第45页 |
| 3.1.2 基因克隆 | 第45-48页 |
| 3.1.3 酵母双杂交 | 第48页 |
| 3.1.4 β-半乳糖苷酶活性检测 | 第48页 |
| 3.2 结果与分析 | 第48-52页 |
| 3.2.1 RSV基因的克隆 | 第48-49页 |
| 3.2.2 酵母双杂交载体的构建 | 第49-50页 |
| 3.2.3 与水稻镁离子螯合酶D亚基互作的RSV组分筛选 | 第50-52页 |
| 3.2.4 β-半乳糖苷酶活性检测 | 第52页 |
| 3.3 讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 水稻镁离子螯合酶D亚基超表达植株的获得 | 第54-60页 |
| 4.1 材料与方法 | 第54-56页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第54页 |
| 4.1.2 水稻总RNA提取 | 第54页 |
| 4.1.3 chld全长的获得 | 第54页 |
| 4.1.4 CHLD超表达载体的构建 | 第54-55页 |
| 4.1.5 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第55页 |
| 4.1.6 再生植株的分子检测 | 第55-56页 |
| 4.2 结果与分析 | 第56-59页 |
| 4.2.1 chld克隆 | 第56页 |
| 4.2.2 超表达载体的构建 | 第56-57页 |
| 4.2.3 水稻的遗传转化 | 第57-58页 |
| 4.2.4 转基因再生植株的分子鉴定 | 第58-59页 |
| 4.3 讨论 | 第59-60页 |
| 第五章 全文总结 | 第60-61页 |
| 附录Ⅰ 利用高通量测序技术鉴定辣椒病毒病病原 | 第61-67页 |
| 6.1 材料和方法 | 第61-63页 |
| 6.1.1 病样的采集 | 第61页 |
| 6.1.2 辣椒总RNA提取 | 第61页 |
| 6.1.3 辣椒sRNA序列测定 | 第61页 |
| 6.1.4 原始数据处理 | 第61-62页 |
| 6.1.5 sRNAs的拼接和注释 | 第62页 |
| 6.1.6 田间病样的RT-PCR检测 | 第62-63页 |
| 6.2 结果与分析 | 第63-65页 |
| 6.2.1 发病情况 | 第63页 |
| 6.2.2 病株sRNA序列分析 | 第63页 |
| 6.2.3 sRNAs序列的拼接和注释 | 第63-64页 |
| 6.2.4 辣椒标样RT-PCR检测 | 第64-65页 |
| 6.3 讨论 | 第65-67页 |
| 附录Ⅱ 四种辣椒病毒的多重RT-PCR体系的建立 | 第67-75页 |
| 7.1 材料与方法 | 第67-69页 |
| 7.1.1 病样采集 | 第67页 |
| 7.1.2 辣椒叶片总RNA提取 | 第67页 |
| 7.1.3 引物设计及特异性检索 | 第67页 |
| 7.1.4 四种辣椒病毒的RT-PCR检测 | 第67-68页 |
| 7.1.5 四种辣椒病毒的多重RT-PCR及反应条件的优化 | 第68页 |
| 7.1.6 四种辣椒病毒多重RT-PCR体系的确定及灵敏度测定 | 第68-69页 |
| 7.1.7 田间辣椒样品的多重RT-PCR检测 | 第69页 |
| 7.2 结果与分析 | 第69-73页 |
| 7.2.1 多重RT-PCR引物特异性检测 | 第69页 |
| 7.2.2 四种辣椒病毒的RT-PCR检测 | 第69-70页 |
| 7.2.3 四种辣椒多重RT-PCR及反应体系的优化 | 第70-71页 |
| 7.2.4 多重RT-PCR反应体系的确立 | 第71-72页 |
| 7.2.5 多重RT-PCR反应体系灵敏度的检测 | 第72-73页 |
| 7.2.6 田间辣椒样品的多重RT-PCR检测 | 第73页 |
| 7.3 讨论 | 第73-75页 |
| 附录Ⅲ 五种西瓜病毒的多重PCR体系的建立 | 第75-83页 |
| 8.1 材料与方法 | 第75-77页 |
| 8.1.1 病样采集 | 第75页 |
| 8.1.2 病毒总RNA提取 | 第75页 |
| 8.1.3 引物设计及特异性检测 | 第75页 |
| 8.1.4 五种西瓜病毒的RT-PCR | 第75-76页 |
| 8.1.5 五种西瓜病毒多重RT-PCR及条件优化 | 第76-77页 |
| 8.1.6 五种西瓜病毒多重RT-PCR体系的确立及灵敏度测定 | 第77页 |
| 8.1.7 多重RT-PCR体系特异性的检测 | 第77页 |
| 8.1.8 田间样品的多重RT-PCR检测 | 第77页 |
| 8.2 结果与分析 | 第77-82页 |
| 8.2.1 五种西瓜病毒RT-PCR检测 | 第77-78页 |
| 8.2.2 五种西瓜病毒的多重RT-PCR及条件优化 | 第78-80页 |
| 8.2.3 五种西瓜病毒多重RT-PCR体系的确立 | 第80页 |
| 8.2.4 多重RT-PCR体系的灵敏度检测和特异性检测 | 第80-82页 |
| 8.2.5 田间样品的多重RT-PCR检测 | 第82页 |
| 8.3 讨论 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-90页 |
| 附录Ⅳ | 第90-98页 |
| 致谢 | 第98-99页 |
| 作者简历 | 第99页 |
