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免疫磁珠分离禽流感病毒及其佐剂效应研究

摘要第7-8页
ABSTRACT第8-9页
缩略词表第10-11页
第一章 文献综述第11-23页
    1 磁性复合微粒的研究进展第11-16页
        1.1 磁性复合微粒的特征、种类及合成第11-14页
            1.1.1 磁性复合微粒的特征第11-12页
            1.1.2 磁性复合微粒的分类第12-13页
            1.1.3 磁性复合微粒的合成第13页
            1.1.4 磁性复合微粒的表面修饰第13-14页
        1.2 免疫磁珠(IMB)第14页
        1.3 磁性复合微粒的应用第14-16页
            1.3.1 免疫检测第14页
            1.3.2 细胞分离第14-15页
            1.3.3 靶向制剂第15页
            1.3.4 细菌分离的应用第15-16页
            1.3.5 蛋白质分离纯化第16页
    2 禽流感的研究进展第16-20页
        2.1 禽流感的流行与危害第17-18页
            2.1.1 高致病性禽流感第17页
            2.1.2 低致病性禽流感第17-18页
        2.2 禽流感病毒抗原抗体检测方法第18-20页
            2.2.1 禽流感病毒的分离与鉴定第18页
            2.2.2 血凝(HA)和血凝抑制(HI)试验第18-19页
            2.2.3 琼脂免疫扩散扩散(AGID)试验第19页
            2.2.4 酶联免疫吸附试验第19-20页
    4 免疫佐剂的研究进展第20-23页
        4.1 弗氏佐剂第20-21页
        4.2 无机铝盐佐剂第21页
        4.3 聚微球粒载体佐剂第21-23页
            4.3.1 脂质体第21-22页
            4.3.2 聚乳酸及其共聚物第22-23页
第二章 免疫磁珠技术分离H9亚型禽流感病毒第23-33页
    1 研究的目的和意义第23页
    2 实验材料与方法第23-27页
        2.1 实验材料第23-24页
            2.1.1 主要仪器第23页
            2.1.2 主要试剂第23-24页
            2.1.3 主要的病毒与抗体第24页
            2.1.4 主要溶液的配制第24页
        2.2 主要方法第24-27页
            2.2.1 磁性Fe_3O_4的合成第24-25页
            2.2.2 Fe_3O_4纳米粒子的表征第25页
            2.2.3 氨基末端磁性复合微粒的合成第25页
            2.2.4 用免疫磁珠技术分离H9亚型禽流感病毒方法的建立第25-27页
    3 结果与分析第27-31页
        3.1 合成的纳米Fe_3O_4悬浮液固体物含量的测定及表征第27页
        3.2 用免疫磁珠技术分离H9亚型禽流感病毒第27-31页
            3.2.1 反应介质的选择第27-28页
            3.2.2 抗H9亚型禽流感病毒血凝素单克隆抗体(McAbH94C4)包被磁珠的最佳温度的确定第28页
            3.2.3 单克隆抗体最佳包被浓度的确定第28-29页
            3.2.4 单抗包被磁珠最佳时间的确定第29页
            3.2.5 免疫磁珠的封闭效果测定第29页
            3.2.6 免疫磁珠的生物活性测定第29页
            3.2.7 免疫磁珠吸附病毒最佳浓度的确定第29-30页
            3.2.8 病毒吸附后的洗脱第30-31页
    4 讨论第31-32页
    5 结论第32-33页
第三章 免疫磁珠的佐剂效应研究第33-47页
    1 研究的目的和意义第33页
    2 材料与方法第33-40页
        2.1 材料第33-34页
            2.1.1 实验动物、细胞及生物制剂第33-34页
            2.1.2 主要试剂第34页
        2.2 主要溶液的配制第34-36页
            2.2.1 细胞培养液第34页
            2.2.2 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳溶液第34-35页
            2.2.3 封闭液的配制第35页
            2.2.4 包涵体纯化相关试剂的配制第35-36页
        2.3 主要方法第36-40页
            2.3.1 杂交瘤细胞的复苏与单克隆抗体的生产第36-37页
            2.3.2 单克隆抗体的纯化第37页
            2.3.3 猪肌钙蛋白S4的表达第37页
            2.3.4 磁珠的包被和蛋白的吸附第37-38页
            2.3.5 免疫磁珠的佐剂效应第38-40页
    3 结果和讨论第40-44页
        3.1 腹水效价的测定第40页
        3.2 单克隆抗体包被磁珠最佳浓度的确定第40-41页
        3.3 最佳封闭条件的选择第41页
        3.4 免疫磁珠吸附猪肌钙蛋白融合蛋白S4最佳浓度的确定第41-42页
        3.5 免疫磁珠吸附蛋白的特异性第42-43页
        3.6 不同免疫原对小鼠免疫效果的测定第43-44页
    4 讨论第44-46页
        4.1 封闭液的选择第44-45页
        4.2 免疫磁珠佐剂效应比较第45页
        4.3 免疫磁珠的特性分析第45页
        4.4 免疫磁珠的局限性分析第45-46页
    5 结论第46-47页
参考文献第47-52页
致谢第52页

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