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玉米抗冷相关基因JMJ15克隆及对玉米的遗传转化

中文摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第1章 文献综述第14-30页
    1.1 冷害第14-17页
        1.1.1 冷害的类型第14-15页
        1.1.2 冷害的作用机理第15-16页
            1.1.2.1 膜上脂类相变引起的与膜结合酶的失活第15页
            1.1.2.2 改变了膜的通透性第15-16页
            1.1.2.3 对光合与呼吸的影响第16页
        1.1.3 冷害对玉米生产的影响第16-17页
    1.2 组蛋白甲基化的研究进展第17-20页
        1.2.1 组蛋白修饰第17页
        1.2.2 组蛋白甲基化第17-18页
        1.2.3 组蛋白去甲基化酶 JMJ 类蛋白第18-20页
    1.3 JMJ15 基因的研究进展第20-23页
    1.4 玉米遗传转化的研究进展第23-26页
        1.4.1 玉米遗传转化的方法第23-25页
        1.4.2 玉米遗传转化常用受体第25-26页
    1.5 转化植株的鉴定第26-28页
        1.5.1 标记基因的使用第26-27页
        1.5.2 分子检测第27-28页
        1.5.3 免疫技术第28页
    1.6 本实验研究内容及意义第28-30页
第2章 JMJ15 基因及启动子的克隆第30-65页
    2.1 JMJ15 基因的克隆第30-38页
        2.1.1 实验材料第30-32页
        2.1.2 实验方法第32-38页
    2.2 JMJ15 生物信息学分析第38页
    2.3 植物表达载体的构建第38-41页
        2.3.1 实验材料第38-40页
        2.3.2 实验方法第40-41页
    2.4 JMJ15 植物干扰载体的构建第41-47页
        2.4.1 实验材料第41-42页
        2.4.2 实验方法第42-47页
    2.5 JMJ15 基因启动子的克隆第47-48页
        2.5.1 实验材料第47页
        2.5.2 实验方法第47-48页
    2.6 结果与分析第48-62页
        2.6.1 RNA 的提取第48-49页
        2.6.2 JMJ15 基因的克隆第49-50页
        2.6.3 JMJ15 的保守域分析第50-51页
        2.6.4 JMJ15 基因理化性质分析第51页
        2.6.5 蛋白的疏水性预测以及跨膜区预测第51-52页
        2.6.6 JMJ15 的亚细胞位置预测第52页
        2.6.7 三级同源建模第52-53页
        2.6.8 蛋白同源性比对第53页
        2.6.9 亲缘关系分析第53-54页
        2.6.10 PBI 121-JMJ 中间载体的构建第54页
        2.6.11 植物表达载体 35S::JMJ15 的构建第54-55页
        2.6.12 JMJ15 基因正反义片段的克隆第55-56页
        2.6.13 正义片段与反义片断的酶切、回收第56页
        2.6.14 PTCK303-JMJ(+)(-)中间载体的构建第56-57页
        2.6.15 酶切、回收第57-58页
        2.6.16 大片段与 pCAMB3301 载体的连接及鉴定第58-59页
        2.6.17 启动子 JMJP 的克隆第59-60页
        2.6.18 JMJ15 基因启动子的生物信息学分析第60-62页
    2.7 小结与讨论第62-65页
        2.7.1 小结第62-63页
        2.7.2 讨论第63-65页
第3章 JMJ15 基因的功能验证第65-84页
    3.1 玉米不同时间冷处理 JMJ15 基因表达量分析第65-68页
        3.1.1 实验材料第65-66页
        3.1.2 实验方法第66-68页
    3.2 JMJ15 基因转化拟南芥的研究第68-72页
        3.2.1 实验材料第68页
        3.2.2 实验试剂第68-69页
        3.2.3 实验方法第69-72页
    3.3 JMJ15 基因拟南芥 T-DNA 插入突变体的研究第72-75页
        3.3.1 实验材料第72页
        3.3.2 实验试剂第72-73页
        3.3.3 实验方法第73-75页
    3.4 结果与分析第75-81页
        3.4.1 冷胁迫下 JMJ15 基因表达量分析第75-76页
        3.4.2 JMJ15 基因转化拟南芥进行功能验证第76-78页
        3.4.3 JMJ15 基因拟南芥 T-DNA 插入突变体的研究及功能验证第78-81页
    3.5 小结与讨论第81-84页
        3.5.1 小结第81页
        3.5.2 讨论第81-84页
第4章 JMJ15 基因玉米遗传转化的研究第84-96页
    4.1 试验材料第84页
        4.1.1 菌株与表达载体第84页
        4.1.2 受体材料第84页
    4.2 试验仪器及药品第84-86页
        4.2.1 仪器设备第84页
        4.2.2 药品第84-85页
        4.2.3 培养基配方第85-86页
    4.3 以幼胚为受体的遗传转化第86-87页
        4.3.1 侵染幼胚前的准备工作第86页
        4.3.2 农杆菌侵染幼胚第86页
        4.3.3 再生植株分子检测第86-87页
    4.4 以胚性愈伤为受体的遗传转化第87-88页
        4.4.1 胚性愈伤的诱导第87页
        4.4.2 农杆菌侵染胚性愈伤第87-88页
        4.4.3 PCR 检测第88页
    4.5 花粉管通道法第88-89页
        4.5.1 质粒 DNA 的准备第88页
        4.5.2 质粒 DNA 的注入第88-89页
        4.5.3 抗性植株的筛选第89页
        4.5.4 植株的分子检测第89页
    4.6 结果与分析第89-94页
        4.6.1 农杆菌介导的遗传转化第89-92页
        4.6.2 花粉管通道法转化 JMJ15 基因第92-94页
    4.7 小结与讨论第94-96页
        4.7.1 小结第94页
        4.7.2 讨论第94-96页
第5章 全文结论第96-97页
参考文献第97-109页
作者简介第109-110页
致谢第110页

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