| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-22页 |
| 1.1 国内外研究现状 | 第12-20页 |
| 1.1.1 cfr基因的发现、功能和作用机制 | 第12-14页 |
| 1.1.2 cfr基因的流行情况 | 第14-17页 |
| 1.1.3 cfr基因的分子传播机制 | 第17-19页 |
| 1.1.4 cfr基因的危害、监测cfr基因阳性菌的意义及目前常用的监测方法 | 第19-20页 |
| 1.1.5 目前耐药菌快速检测技术发展情况及免疫学技术在耐药菌检测中的应用 | 第20页 |
| 1.2 研究目的和意义 | 第20-22页 |
| 第二章 重组蛋白Cfr的单克隆抗体制备 | 第22-42页 |
| 2.1 材料 | 第22-26页 |
| 2.2 方法 | 第26-33页 |
| 2.2.1 小鼠的免疫及采血 | 第26页 |
| 2.2.2 间接ELISA筛选方法的建立 | 第26-27页 |
| 2.2.3 杂交瘤细胞株的建立 | 第27-29页 |
| 2.2.4 细胞冻存与复苏 | 第29-30页 |
| 2.2.5 单克隆抗体的大量制备 | 第30页 |
| 2.2.6 单克隆抗体的鉴定 | 第30-33页 |
| 2.2.7 单克隆抗体的纯化 | 第33页 |
| 2.2.8 单克隆抗体浓度的测定 | 第33页 |
| 2.2.9 杂交瘤细胞分泌单克隆抗体的稳定性 | 第33页 |
| 2.3 结果与分析 | 第33-37页 |
| 2.3.1 小鼠免疫后血清效价测定 | 第33-35页 |
| 2.3.2 融合后阳性孔筛选 | 第35页 |
| 2.3.3 单抗效价的测定 | 第35-36页 |
| 2.3.4 单抗亚类鉴定 | 第36页 |
| 2.3.5 单克隆抗体的特异性鉴定 | 第36页 |
| 2.3.6 单克隆抗体纯化后蛋白浓度的测定 | 第36-37页 |
| 2.3.7 杂交瘤细胞的稳定性测定 | 第37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-40页 |
| 2.4.1 免疫方案 | 第37页 |
| 2.4.2 细胞融合 | 第37-38页 |
| 2.4.3 杂交瘤细胞株的筛选及克隆 | 第38-39页 |
| 2.4.4 杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第39页 |
| 2.4.5 单克隆抗体的制备和纯化 | 第39-40页 |
| 2.4.6 单克隆抗体的效价和特异性 | 第40页 |
| 2.5 小结 | 第40-42页 |
| 第三章 抗重组Cfr蛋白单克隆抗体的初步应用 | 第42-51页 |
| 3.1 材料 | 第42-44页 |
| 3.2 方法 | 第44-46页 |
| 3.2.1 引物的设计与合成、cfr基因的扩增体系与扩增条件 | 第44-45页 |
| 3.2.2 临床菌株的蛋白提取 | 第45页 |
| 3.2.3 Western blot分析 | 第45-46页 |
| 3.3 结果与分析 | 第46-49页 |
| 3.3.1 PCR扩增结果 | 第46页 |
| 3.3.2 蛋白浓度测定结果 | 第46-47页 |
| 3.3.3 Western blot结果 | 第47-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49页 |
| 3.5 小结 | 第49-51页 |
| 结论 | 第51页 |
| 创新点 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简介 | 第59页 |
