| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-27页 |
| ·植物类黄酮物质及其合成途径研究进展 | 第15-19页 |
| ·植物色素物质及类黄酮类物质分类 | 第15页 |
| ·类黄酮合成途径 | 第15-17页 |
| ·类黄酮合成途径结构基因及转录因子 | 第17-19页 |
| ·天然彩色棉研究进展及应用前景 | 第19-21页 |
| ·天然彩色棉色素物质生化研究 | 第19-20页 |
| ·天然彩色棉色素合成相关基因研究 | 第20-21页 |
| ·天然彩色棉存在问题及应用前景 | 第21页 |
| ·RNA 干涉的原理及应用 | 第21-23页 |
| ·RNA 干涉技术的作用机制 | 第21-22页 |
| ·转录水平基因沉默（TGS） | 第22页 |
| ·转录后水平基因沉默（PTGS） | 第22页 |
| ·翻译水平基因沉默 | 第22页 |
| ·RNA 干涉技术的特点 | 第22-23页 |
| ·RNA 干涉技术在植物中的应用现状 | 第23页 |
| ·Aritificial microRNA 技术的原理及应用 | 第23-26页 |
| ·AmiRNA 技术的作用机制 | 第24页 |
| ·AmiRNA 技术的特点 | 第24-25页 |
| ·AmiRNA 技术在植物中的应用现状 | 第25-26页 |
| ·AmiRNA 技术在模式植物中的应用 | 第25页 |
| ·AmiRNA 技术在其他植物中的研究 | 第25-26页 |
| ·本研究的目的意义 | 第26-27页 |
| 第二章 棕色棉不同发育时期色素物质分析 | 第27-35页 |
| ·实验材料及设备 | 第27-28页 |
| ·实验材料 | 第27页 |
| ·主要试剂 | 第27页 |
| ·试验主要仪器 | 第27-28页 |
| ·试验方法 | 第28页 |
| ·棕色棉显色反应 | 第28页 |
| ·NaOH 反应 | 第28页 |
| ·盐酸-镁粉反应 | 第28页 |
| ·棕色棉纤维色素甲醇提取液光谱分析 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-32页 |
| ·棕色棉纤维色素提取液显色反应分析 | 第28-30页 |
| ·棕色棉纤维色素甲醇提取液光谱分析 | 第30-32页 |
| ·小结与讨论 | 第32-35页 |
| ·小结 | 第32-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| 第三章 棕色棉CHS、F3'5'H 基因的克隆及其RNAi 载体构建 | 第35-54页 |
| ·试验材料 | 第35-36页 |
| ·试验材料 | 第35页 |
| ·菌株、载体及质粒 | 第35页 |
| ·试验主要试剂 | 第35页 |
| ·试验主要仪器 | 第35-36页 |
| ·试验方法 | 第36-44页 |
| ·试验材料的准备 | 第36页 |
| ·改良CTAB 法提取总 RNA | 第36-38页 |
| ·RNA 提取步骤 | 第36-37页 |
| ·RNA 提取试剂的配制 | 第37-38页 |
| ·RT-PCR 得到第一链cDNA | 第38页 |
| ·CHS、F3'5'H 基因的克隆 | 第38-41页 |
| ·CHS 基因全长序列的获得 | 第38-39页 |
| ·F3'5'H 的基因全长的获得 | 第39页 |
| ·DNA 片段的凝胶回收 | 第39页 |
| ·PCR 产物的TA 克隆 | 第39-40页 |
| ·热激法转化大肠杆菌及阳性克隆的筛选 | 第40页 |
| ·转化子的筛选及鉴定 | 第40-41页 |
| ·PCR 产物的测序及序列比对 | 第41页 |
| ·CHS、F3'5'H 基因的RNAi 载体构建 | 第41-43页 |
| ·RNA 干扰载体构建流程 | 第41-42页 |
| ·正反义片段的扩增 | 第42页 |
| ·正反义片段的凝胶回收 | 第42页 |
| ·双酶切体系及方法 | 第42-43页 |
| ·连接反应体系及方法 | 第43页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌 | 第43页 |
| ·RNA 干扰载体的验证 | 第43页 |
| ·RNA 干扰质粒的遗传转化 | 第43-44页 |
| ·质粒DNA 的大量提取 | 第43-44页 |
| ·花粉管通道法导入目的基因 | 第44页 |
| ·结果与分析 | 第44-52页 |
| ·目的基因序列的克隆及PCR 检测 | 第44-45页 |
| ·目的基因序列的同源性分析 | 第45-50页 |
| ·RNA 干扰载体的验证分析 | 第50-52页 |
| ·小结与讨论 | 第52-54页 |
| ·小结 | 第52页 |
| ·讨论 | 第52-54页 |
| 第四章 棕色棉CHS、F3'5'H 基因的AmiRNA 载体构建 | 第54-62页 |
| ·试验材料 | 第54页 |
| ·试验方法 | 第54-58页 |
| ·CHS 基因及F3'5'H 基因的AmiRNA 载体的构建 | 第54-58页 |
| ·靶向CHS 及F3'5'H 的AmiRNA 序列的设计 | 第54-57页 |
| ·CHS 及F3'5'H 的AmiRNA DNA 序列合成及亚克隆 | 第57页 |
| ·AmiCHS 及AmiF3'5'H 测序质粒的提取 | 第57页 |
| ·CHS 及F3'5'H AmiRNA 表达载体的构建 | 第57页 |
| ·CHS 及F3'5'H AmiRNA 表达载体的检测 | 第57-58页 |
| ·CHS 及F3'5'H AmiRNA 表达载体的遗传转化 | 第58页 |
| ·结果与分析 | 第58-61页 |
| ·AmiRNACHS 及AmiRNAF3'5'H 二级结构预测 | 第58页 |
| ·CHS 及F3'5'H 的AmiRNA 相应的DNA 序列合成及亚克隆 | 第58页 |
| ·pBI-AmiCHS 及pBI-AmiF3'5'H 载体的结果验证 | 第58-61页 |
| ·小结与讨论 | 第61-62页 |
| ·小结 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| 第五章 棕色棉纤维类黄酮合成途径转录因子基因的表达分析 | 第62-70页 |
| ·试验材料 | 第62页 |
| ·试验方法 | 第62-65页 |
| ·棉花纤维RNA 提取与检测 | 第62-63页 |
| ·第一链cDNA 合成 | 第63页 |
| ·基因的选择与引物合成 | 第63页 |
| ·实时荧光定量PCR 程序 | 第63-64页 |
| ·实时荧光定量PCR 数据的处理 | 第64-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-68页 |
| ·RNA 提取质量检测 | 第65-66页 |
| ·内参基因的筛选 | 第66页 |
| ·棕色棉类黄酮合成途径转录因子基因的表达分析 | 第66-68页 |
| ·小结与讨论 | 第68-70页 |
| ·小结 | 第68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 第六章 全文结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 作者简介 | 第77页 |
