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控制水稻花期OsEF1基因功能的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 引言第12-20页
   ·水稻在短日照条件下促进HD3A 的表达第13-15页
   ·长日照抑制HD3A 的表达第15-16页
   ·长日照下促进RFT1 的表达第16-18页
   ·研究的背景和意义第18-20页
第二章 材料与方法第20-37页
   ·材料第20-21页
     ·植物材料第20页
     ·菌株和质粒第20页
     ·主要试剂第20页
     ·主要实验仪器第20页
     ·生物软件第20-21页
     ·引物、测序第21页
   ·实验方法第21-37页
     ·田间农艺性状的调查第21-22页
     ·水稻总RNA 的提取第22页
     ·反转录总cDNA第22-23页
     ·目的片段的获得第23-25页
     ·以pTCK309 为骨架的2 个干涉载体的获得第25-26页
     ·利用Gateway 重组系统构建的7 个干涉载体第26-27页
     ·表达载体pP_(OsEF1)-GUS 及pGEX-6P-EF1 的构建第27页
     ·蛋白表达载体pET-32A-EF1 的构建第27页
     ·农杆菌的电击转化第27-28页
     ·农杆菌介导的水稻转化第28-30页
     ·转基因植株的检测第30-31页
     ·荧光定量PCR(quantitative Real-time PCR)反应第31页
     ·GUS 组织化学染色第31页
     ·石蜡切片第31-32页
     ·光周期实验第32-33页
     ·OsEF1 蛋白在原核细胞中的诱导表达第33-35页
     ·重力法亲和纯化OsEF1 蛋白第35-37页
第三章:结果与分析第37-59页
   ·OSEF1 突变体的表型观察与相关农艺性状的统计第37-38页
     ·Osef1 突变体的表型观察第37页
     ·Osef1 突变体农艺性状的统计第37-38页
   ·OSEF1 基因的组织表达情况第38-41页
     ·转pP_(OsEF1)-GUS 阳性株的PCR 检测第38-39页
     ·植株组织的GUS 活性分析第39-41页
     ·OsEF1 表达分析第41页
   ·OSEF1 基因的节律性表达分析第41-45页
     ·样品RNA 的电泳检测第41-42页
     ·标准曲线的分析第42-43页
     ·溶解曲线等分析第43-44页
     ·OsEF1 基因节律性分析第44-45页
   ·RNAI 载体的构建及农杆菌介导的水稻转化第45-54页
     ·利用生物信息学分析与OsEF1 互作候选蛋白的部分基因第45-46页
     ·水稻RNA 的提取结果第46-47页
     ·干涉载体的构建第47-52页
     ·农杆菌介导的遗传转化及田间表型观察第52-53页
     ·T_0 代转基因植株的PCR 鉴定第53-54页
   ·OSEF1 蛋白在原核细胞中的表达分析及亲和纯化第54-59页
     ·原核表达载体的构建:第54-55页
     ·OsEF1 蛋白在原核细胞中的诱导表达分析第55-56页
     ·OsEF 蛋白的亲和纯化第56-57页
     ·大量纯化第57-59页
第四章 结论与讨论第59-63页
参考文献第63-67页
附录第67-68页
致谢第68-69页
作者简历第69页

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