致谢 | 第4-5页 |
中文摘要 | 第5-9页 |
英文摘要 | 第9-13页 |
中英文缩写对照表 | 第14-18页 |
前言 | 第18-20页 |
第一部分 四重荧光定量RT-PCR检测人感染新型甲型禽流感病毒H7N9方法学的建立 | 第20-39页 |
1 材料 | 第20-23页 |
1.1 病毒株及细胞株 | 第20页 |
1.2 引物与探针的设计与合成 | 第20-21页 |
1.3 主要仪器 | 第21页 |
1.4 主要试剂和耗材 | 第21-22页 |
1.5 要溶液配制 | 第22-23页 |
2 方法 | 第23-29页 |
2.1 MDCK细胞复苏 | 第23页 |
2.2 MDCK细胞培养、传代 | 第23页 |
2.3 MDCK细胞冻存 | 第23页 |
2.4 病毒接种及收获 | 第23-24页 |
2.5 病毒鉴定 | 第24页 |
2.6 核酸提取 | 第24-25页 |
2.7 各基因片段标准品的构建 | 第25-26页 |
2.8 重荧光定量RT-PCR反应体系和扩增条件 | 第26-27页 |
2.9 反应条件优化 | 第27页 |
2.10 产物电泳验证 | 第27页 |
2.11 四重荧光RT-PCR检测H7N9病毒的方法学评价 | 第27-28页 |
2.12 统计学处理方法 | 第28-29页 |
3 结果 | 第29-37页 |
3.1 各种引物及探针的设计 | 第29-30页 |
3.2 引物和探针优化结果 | 第30-32页 |
3.3 重荧光定量RT-PCR方法学评价 | 第32-37页 |
4 讨论 | 第37-39页 |
第二部分 四重荧光定量RT-PCR法检测甲型禽流感病毒H7N9方法的临床应用 | 第39-47页 |
1 材料 | 第39-41页 |
1.1 研究对象 | 第39页 |
1.2 主要仪器 | 第39-40页 |
1.3 主要试剂和耗材 | 第40-41页 |
2 方法 | 第41-43页 |
2.1 标本的采集和运送 | 第41页 |
2.2 核酸的提取 | 第41页 |
2.3 荧光定量RT-PCR反应体系和扩增条件 | 第41-42页 |
2.4 荧光定量结果报告 | 第42页 |
2.5 标本验证 | 第42页 |
2.6 统计分析 | 第42-43页 |
3 结果 | 第43-45页 |
3.1 临床标本的检测结果 | 第43页 |
3.2 标本类型对方法的影响 | 第43-45页 |
4 讨论 | 第45-47页 |
全文结论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-52页 |
综述 | 第52-70页 |
参考文献 | 第65-70页 |
作者简介及在研期间发表的论文 | 第70页 |