| 致谢 | 第4-5页 |
| 中文摘要 | 第5-9页 |
| 英文摘要 | 第9-13页 |
| 缩略语 | 第14-18页 |
| 前言 | 第18-20页 |
| 1 柯萨奇病毒病原体特征 | 第18页 |
| 2 感染柯萨奇病毒A组临床特征 | 第18-19页 |
| 3 柯萨奇病毒流行学 | 第19-20页 |
| 第一部分 双重荧光定量RT-PCR法检测柯萨奇病毒A2/A5型或柯萨奇病毒A6/A10型方法的建立 | 第20-42页 |
| 1 材料 | 第20-23页 |
| 1.1 病毒株 | 第20页 |
| 1.2 引物与探针的设计与合成 | 第20页 |
| 1.3 主要仪器 | 第20-21页 |
| 1.4 主要试剂 | 第21-22页 |
| 1.5 主要溶液配制 | 第22-23页 |
| 2 方法 | 第23-30页 |
| 2.1 RD细胞复苏 | 第23页 |
| 2.2 RD细胞培养、传代 | 第23页 |
| 2.3 RD细胞冻存 | 第23页 |
| 2.4 病毒接种及收获 | 第23-24页 |
| 2.5 病毒鉴定 | 第24页 |
| 2.6 核酸的提取方法 | 第24-25页 |
| 2.7 各基因片段标准品的构建 | 第25-26页 |
| 2.8 建立标准曲线 | 第26-27页 |
| 2.9 荧光定量RT-PCR反应体系条件优化 | 第27页 |
| 2.10 产物电泳验证 | 第27页 |
| 2.11 荧光定量RT-PCR反应体系优化与扩增反应条件 | 第27-28页 |
| 2.12 特异性试验 | 第28-29页 |
| 2.13 灵敏度试验 | 第29页 |
| 2.14 重复性试验 | 第29页 |
| 2.15 数据处理与统计分析 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-40页 |
| 3.1 引物与探针合成 | 第30-31页 |
| 3.2 引物和探针优化结果 | 第31-34页 |
| 3.3 标准曲线的建立 | 第34-35页 |
| 3.4 特异性试验 | 第35-36页 |
| 3.5 灵敏度试验 | 第36-38页 |
| 3.6 重复性试验 | 第38-40页 |
| 4 讨论 | 第40-42页 |
| 第二部分 双重荧光定量RT-PCR法检测柯萨奇病毒A2/A5型或柯萨奇病毒A6/A10型方法的临床应用 | 第42-55页 |
| 1 材料 | 第42-44页 |
| 1.1 研究对象 | 第42页 |
| 1.2 主要仪器 | 第42-43页 |
| 1.3 主要试剂和耗材 | 第43-44页 |
| 2 方法 | 第44-46页 |
| 2.1 标本的采集与运送 | 第44页 |
| 2.2 核酸的提取 | 第44页 |
| 2.3 荧光定量RT-PCR反应体系和扩增条件 | 第44-45页 |
| 2.4 荧光定量RT-PCR反应结果判断 | 第45页 |
| 2.5 基因测序 | 第45页 |
| 2.6 序列及进化分析 | 第45-46页 |
| 3 结果 | 第46-52页 |
| 3.1 临床标本检测结果 | 第46-47页 |
| 3.2 基因测序验证 | 第47-48页 |
| 3.3 CVA2、CVA5的病毒VP1区核苷酸序列同源性和进化分析 | 第48-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 全文结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-61页 |
| 综述 | 第61-74页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 作者简历及在学期间所取得的科研成果 | 第74页 |
