| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 中英文对照 | 第12-15页 |
| 引言 | 第15-16页 |
| 第一部分 文献综述 | 第16-30页 |
| 综述1 绵羊FecB基因的研究进展 | 第16-21页 |
| 1.1 绵羊FecB基因的发现和定位 | 第16页 |
| 1.2 绵羊BMPR-IB基因结构和FecB突变的作用机理 | 第16-17页 |
| 1.3 绵羊BMPR-IB基因的组织表达 | 第17页 |
| 1.4 FecB基因的分布和对绵羊繁殖率的作用 | 第17-19页 |
| 1.5 FecB的检测 | 第19页 |
| 1.6 其它多胎基因简介 | 第19-20页 |
| 1.7 FecB和其它多胎基因间的互作 | 第20页 |
| 1.8 绵羊FecB基因的展望 | 第20-21页 |
| 综述2 TALENs技术及其在动物生产中的应用 | 第21-25页 |
| 2.1 TALE的发现和TALEN酶 | 第21页 |
| 2.2 TALENs的结构和原理 | 第21-22页 |
| 2.3 TALENs的设计和构建 | 第22-23页 |
| 2.4 TALENs技术在动物生产中的应用 | 第23-24页 |
| 2.5 TALENs技术前景展望 | 第24-25页 |
| 综述3 COLD-PCR及其衍生技术的研究进展 | 第25-30页 |
| 3.1 COLD-PCR原理和应用 | 第25-26页 |
| 3.2 COLD-PCR技术的衍生发展 | 第26-28页 |
| 3.3 COLD-PCR HRM技术 | 第28-29页 |
| 3.4 COLD-PCR前景展望 | 第29-30页 |
| 第二部分 实验研究 | 第30-80页 |
| 实验一 绵羊低丰度FecB基因检测方法的的建立 | 第30-40页 |
| 1 材料和方法 | 第31-34页 |
| 1.1 材料 | 第31页 |
| 1.2 方法 | 第31-34页 |
| 2 结果 | 第34-38页 |
| 2.1 FecB检测 | 第34页 |
| 2.2 qPCR HRM分型结果 | 第34-35页 |
| 2.3 COLD-PCR条件的优化 | 第35页 |
| 2.4 COLD-PCR HRM检测结果 | 第35-36页 |
| 2.5 湖羊FecB基因的q PCR HRM分型 | 第36-38页 |
| 3 讨论 | 第38-39页 |
| 4 小结 | 第39-40页 |
| 实验二 利用TALENs和SSO共同介导阿勒泰羊胎儿成纤维细胞FecB点突变 | 第40-55页 |
| 1 材料与方法 | 第40-47页 |
| 1.1 材料 | 第40-41页 |
| 1.2 方法 | 第41-47页 |
| 2 结果 | 第47-53页 |
| 2.1 绵羊胎儿成纤维细胞的分离培养 | 第47-48页 |
| 2.2 绵羊胎儿成纤维细胞检测结果 | 第48-49页 |
| 2.3 TALENs活性检测结果 | 第49-50页 |
| 2.4 绵羊胎儿成纤维细胞的转染 | 第50-52页 |
| 2.5 转染细胞FecB突变阳性率的检测 | 第52页 |
| 2.6 单克隆的制备和测序检测 | 第52-53页 |
| 3 讨论 | 第53页 |
| 4 小结 | 第53-55页 |
| 实验三 利用TALENs和打靶载体共同介导绵羊胎儿成纤维细胞FecB点突变 | 第55-74页 |
| 1 材料与方法 | 第55-66页 |
| 1.1 材料 | 第55页 |
| 1.2 方法 | 第55-66页 |
| 2 结果 | 第66-73页 |
| 2.1 打靶载体的构建 | 第66-68页 |
| 2.2 绵羊胎儿成纤维细胞G418毒性试验 | 第68页 |
| 2.3 绵羊胎儿成纤维细胞的核转染和单克隆的制备 | 第68-69页 |
| 2.4 打靶单克隆细胞FecB阳性检测 | 第69-73页 |
| 3 讨论 | 第73页 |
| 4 小结 | 第73-74页 |
| 实验四 绵羊FecB点突变胚胎和绵羊的构建 | 第74-80页 |
| 1 材料和方法 | 第74-77页 |
| 1.1 材料 | 第74页 |
| 1.2 方法 | 第74-77页 |
| 2 结果 | 第77-78页 |
| 2.1 体细胞核移植法构建胚胎和绵羊的结果 | 第77-78页 |
| 2.2 显微注射法构建胚胎和绵羊的结果 | 第78页 |
| 3 讨论 | 第78-79页 |
| 4 小结 | 第79-80页 |
| 全文结论 | 第80-81页 |
| 创新点 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 作者简介 | 第88-89页 |
| 石河子大学博士研究生学位论文导师评阅表 | 第89页 |
