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钙调神经磷酸酶对小鼠卵泡卵母细胞发育的影响及调控机制的研究

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略词(Abbreviation)第11-13页
1 文献综述第13-21页
    1.1 卵母细胞发育的研究进展第13-18页
        1.1.1 磷酸二酯酶(PDE)超家族第13-14页
        1.1.2 G蛋白偶联受体GPR3和GPR12第14-15页
        1.1.3 NPPC/NPR2信号途径第15-16页
        1.1.4 MPF第16-17页
        1.1.5 MAPK第17-18页
        1.1.6 钙离子和PKC第18页
    1.2 Calcineurin概述第18-21页
        1.2.1 Calcineurin的结构和功能第18-19页
        1.2.2 Calcineurin与卵母细胞发育第19-21页
2 目的意义第21-22页
3 材料与方法第22-37页
    3.1 材料第22-26页
        3.1.1 实验材料第22页
        3.1.2 主要生化试剂和抗体第22-23页
        3.1.3 实验所需溶液和配方第23-25页
        3.1.4 实验仪器设备第25-26页
    3.2 方法第26-37页
        3.2.1 卵母细胞、卵丘卵母细胞复合体及有腔卵泡的收集培养和抑制剂处理第26-27页
        3.2.2 颗粒细胞和黄体细胞的分离培养第27-28页
        3.2.3 RT-PCR检测卵母细胞和颗粒细胞中Calcineurin各亚基的表达第28-31页
        3.2.4 颗粒细胞的细胞免疫荧光化学第31页
        3.2.5 激光共聚焦检测卵母细胞中蛋白定位第31-32页
        3.2.6 灌胃处理第32页
        3.2.7 免疫组织化学第32-34页
        3.2.8 ELISA检测卵母细胞MPF活性第34页
        3.2.9 Western blot检测蛋白水平的表达情况第34-36页
        3.2.10 ELISA检测黄体细胞孕酮水平第36页
        3.2.11 颗粒细胞的细胞凋亡水平检测第36页
        3.2.12 数据分析第36-37页
4 结果与分析第37-51页
    4.1 Calcineurin在小鼠生殖系统的定位表达第37-39页
    4.2 Calcineurin在各时期小鼠卵母细胞和颗粒细胞中mRNA表达水平第39-40页
    4.3 Calcineurin A亚基在各时期卵母细胞和颗粒细胞中的定位和表达第40-42页
    4.4 抑制calcineurin对小鼠卵母细胞生发泡破裂发育的影响第42-44页
    4.5 抑制calcineurin对小鼠颗粒细胞凋亡的影响第44页
    4.6 抑制calcineurin对小鼠颗粒细胞增殖的影响第44-45页
    4.7 抑制calcineurin对小鼠颗粒细胞ERK1/2 磷酸化的影响第45-46页
    4.8 抑制calcineurin对小鼠卵母细胞中MPF活性的影响第46-47页
    4.9 抑制calcineurin对小鼠黄体细胞孕酮分泌的影响第47-48页
    4.10 抑制Calcineurin对小鼠卵巢卵泡发育的影响第48-50页
    4.11 抑制calcineurin对猪COCs中卵母细胞发育的影响第50-51页
5 讨论第51-60页
    5.1 Calcineurin在雌雄鼠生殖系统的表达定位第51-54页
        5.1.1 Calcineurin在雌鼠生殖系统的表达定位第51-53页
        5.1.2 Calcineurin在雄鼠生殖系统的表达定位第53-54页
    5.2 Calcineurin抑制剂FK506处理小鼠后对雌鼠卵巢的影响第54-55页
    5.3 小鼠卵母细胞和颗粒细胞中calcineurin各亚基亚型的表达及定位第55-56页
    5.4 抑制calcineurin对小鼠卵母细胞发育的影响和可能参与的调控通路第56-58页
    5.5 抑制calcineurin对颗粒细胞和黄体细胞的影响第58-60页
6 结论第60-61页
7 创新点与不足第61-62页
参考文献第62-75页
附录第75-77页
致谢第77-78页

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