摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
缩略词(Abbreviation) | 第11-13页 |
1 文献综述 | 第13-21页 |
1.1 卵母细胞发育的研究进展 | 第13-18页 |
1.1.1 磷酸二酯酶(PDE)超家族 | 第13-14页 |
1.1.2 G蛋白偶联受体GPR3和GPR12 | 第14-15页 |
1.1.3 NPPC/NPR2信号途径 | 第15-16页 |
1.1.4 MPF | 第16-17页 |
1.1.5 MAPK | 第17-18页 |
1.1.6 钙离子和PKC | 第18页 |
1.2 Calcineurin概述 | 第18-21页 |
1.2.1 Calcineurin的结构和功能 | 第18-19页 |
1.2.2 Calcineurin与卵母细胞发育 | 第19-21页 |
2 目的意义 | 第21-22页 |
3 材料与方法 | 第22-37页 |
3.1 材料 | 第22-26页 |
3.1.1 实验材料 | 第22页 |
3.1.2 主要生化试剂和抗体 | 第22-23页 |
3.1.3 实验所需溶液和配方 | 第23-25页 |
3.1.4 实验仪器设备 | 第25-26页 |
3.2 方法 | 第26-37页 |
3.2.1 卵母细胞、卵丘卵母细胞复合体及有腔卵泡的收集培养和抑制剂处理 | 第26-27页 |
3.2.2 颗粒细胞和黄体细胞的分离培养 | 第27-28页 |
3.2.3 RT-PCR检测卵母细胞和颗粒细胞中Calcineurin各亚基的表达 | 第28-31页 |
3.2.4 颗粒细胞的细胞免疫荧光化学 | 第31页 |
3.2.5 激光共聚焦检测卵母细胞中蛋白定位 | 第31-32页 |
3.2.6 灌胃处理 | 第32页 |
3.2.7 免疫组织化学 | 第32-34页 |
3.2.8 ELISA检测卵母细胞MPF活性 | 第34页 |
3.2.9 Western blot检测蛋白水平的表达情况 | 第34-36页 |
3.2.10 ELISA检测黄体细胞孕酮水平 | 第36页 |
3.2.11 颗粒细胞的细胞凋亡水平检测 | 第36页 |
3.2.12 数据分析 | 第36-37页 |
4 结果与分析 | 第37-51页 |
4.1 Calcineurin在小鼠生殖系统的定位表达 | 第37-39页 |
4.2 Calcineurin在各时期小鼠卵母细胞和颗粒细胞中mRNA表达水平 | 第39-40页 |
4.3 Calcineurin A亚基在各时期卵母细胞和颗粒细胞中的定位和表达 | 第40-42页 |
4.4 抑制calcineurin对小鼠卵母细胞生发泡破裂发育的影响 | 第42-44页 |
4.5 抑制calcineurin对小鼠颗粒细胞凋亡的影响 | 第44页 |
4.6 抑制calcineurin对小鼠颗粒细胞增殖的影响 | 第44-45页 |
4.7 抑制calcineurin对小鼠颗粒细胞ERK1/2 磷酸化的影响 | 第45-46页 |
4.8 抑制calcineurin对小鼠卵母细胞中MPF活性的影响 | 第46-47页 |
4.9 抑制calcineurin对小鼠黄体细胞孕酮分泌的影响 | 第47-48页 |
4.10 抑制Calcineurin对小鼠卵巢卵泡发育的影响 | 第48-50页 |
4.11 抑制calcineurin对猪COCs中卵母细胞发育的影响 | 第50-51页 |
5 讨论 | 第51-60页 |
5.1 Calcineurin在雌雄鼠生殖系统的表达定位 | 第51-54页 |
5.1.1 Calcineurin在雌鼠生殖系统的表达定位 | 第51-53页 |
5.1.2 Calcineurin在雄鼠生殖系统的表达定位 | 第53-54页 |
5.2 Calcineurin抑制剂FK506处理小鼠后对雌鼠卵巢的影响 | 第54-55页 |
5.3 小鼠卵母细胞和颗粒细胞中calcineurin各亚基亚型的表达及定位 | 第55-56页 |
5.4 抑制calcineurin对小鼠卵母细胞发育的影响和可能参与的调控通路 | 第56-58页 |
5.5 抑制calcineurin对颗粒细胞和黄体细胞的影响 | 第58-60页 |
6 结论 | 第60-61页 |
7 创新点与不足 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-75页 |
附录 | 第75-77页 |
致谢 | 第77-78页 |