| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| TABLE OF CONTENTS | 第12-16页 |
| 图目录 | 第16-17页 |
| 表目录 | 第17-18页 |
| 1 柞蚕病害与小RNA病毒的研究进展 | 第18-37页 |
| 1.1 柞蚕 | 第18-25页 |
| 1.1.1 柞蚕概况 | 第18-20页 |
| 1.1.2 柞蚕的常见病害 | 第20-25页 |
| 1.2 小RNA病毒研究进展 | 第25-31页 |
| 1.2.1 小RNA病毒 | 第25-26页 |
| 1.2.2 小RNA病毒的结构 | 第26-27页 |
| 1.2.3 小RNA病毒基因组特征与分类 | 第27-29页 |
| 1.2.4 小RNA病毒的增殖 | 第29-31页 |
| 1.3 昆虫小RNA病毒 | 第31-35页 |
| 1.3.1 昆虫小RNA病毒的概况 | 第31页 |
| 1.3.2 蜜蜂残翅病病毒 | 第31-34页 |
| 1.3.3 家蚕传染性软化病病毒 | 第34-35页 |
| 1.4 本文主要研究目的与内容 | 第35-37页 |
| 2 柞蚕Iflavirus病毒的基因组测序与分离鉴定 | 第37-65页 |
| 2.1 引言 | 第37-38页 |
| 2.2 材料与设备 | 第38-39页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第38页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第38页 |
| 2.2.3 实验设备 | 第38-39页 |
| 2.3 实验方法 | 第39-58页 |
| 2.3.1 柞蚕Iflavirus病毒的基因组测序方法 | 第39页 |
| 2.3.2 病毒基因组RNA的提取及cDNA的合成 | 第39-41页 |
| 2.3.3 病毒基因组序列的扩增与克隆 | 第41-45页 |
| 2.3.4 病毒基因组末端序列的获得 | 第45-49页 |
| 2.3.5 柞蚕Iflavirus病毒的扩繁与分离纯化 | 第49页 |
| 2.3.6 柞蚕Iflavirus病毒粒子的电镜检查 | 第49-50页 |
| 2.3.7 柞蚕Iflavirus病毒衣壳蛋白的原核表达 | 第50-52页 |
| 2.3.8 病毒衣壳蛋白多克隆抗体的制备 | 第52-53页 |
| 2.3.9 柞蚕Iflavirus病毒的鉴定 | 第53-57页 |
| 2.3.10 柞蚕Iflavirus病毒的感染实验 | 第57-58页 |
| 2.4 结果 | 第58-63页 |
| 2.4.1 柞蚕Iflavirus病毒的全序列 | 第58-59页 |
| 2.4.2 对柞蚕Iflavirus病毒的进化分析 | 第59-60页 |
| 2.4.3 对纯化后柞蚕Iflavirus病毒的电镜观察 | 第60页 |
| 2.4.4 对纯化后柞蚕Iflavirus病毒的鉴定 | 第60-62页 |
| 2.4.5 柞蚕Iflavirus病毒对柞蚕幼虫的感染试验 | 第62-63页 |
| 2.5 讨论 | 第63-64页 |
| 2.6 小结 | 第64-65页 |
| 3 柞蚕Iflavirus病毒的基因组分析 | 第65-81页 |
| 3.1 引言 | 第65-66页 |
| 3.2 材料与设备 | 第66-67页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第66页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第66页 |
| 3.2.3 实验设备 | 第66-67页 |
| 3.3 实验方法 | 第67页 |
| 3.3.1 序列分析和同源模建 | 第67页 |
| 3.4 实验结果 | 第67-78页 |
| 3.4.1 柞蚕Iflavirus病毒5’非编码区的特征 | 第67-70页 |
| 3.4.2 柞蚕Iflavirus病毒3’非编码区的特征 | 第70页 |
| 3.4.3 柞蚕Iflavirus病毒功能蛋白的序列分析 | 第70-74页 |
| 3.4.4 柞蚕Iflavirus病毒的单核苷酸多态性 | 第74-76页 |
| 3.4.5 柞蚕Iflavirus病毒功能蛋白的三维结构 | 第76-78页 |
| 3.5 讨论 | 第78-80页 |
| 3.6 小结 | 第80-81页 |
| 4 柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白与5’非编码区的功能分析 | 第81-118页 |
| 4.1 引言 | 第81-82页 |
| 4.2 材料与设备 | 第82页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第82页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第82页 |
| 4.2.3 实验设备 | 第82页 |
| 4.3 实验方法 | 第82-98页 |
| 4.3.1 柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白的基因克隆 | 第82-84页 |
| 4.3.2 柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白重组杆粒的构建与鉴定 | 第84-87页 |
| 4.3.3 柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白的表达、分离纯化与鉴定 | 第87-92页 |
| 4.3.4 ATPase活性测定 | 第92-93页 |
| 4.3.5 解旋活性测定 | 第93页 |
| 4.3.6 柞蚕Iflavirus病毒5’非编码区功能验证策略 | 第93-94页 |
| 4.3.7 柞蚕Iflavirus病毒5’非编码区的克隆 | 第94-96页 |
| 4.3.8 柞蚕Iflavirus病毒5’非编码区表达载体的构建与鉴定 | 第96-97页 |
| 4.3.9 柞蚕Iflavirus病毒5’非编码区表达载体在Sf9细胞中的转化实验 | 第97-98页 |
| 4.4 结果 | 第98-114页 |
| 4.4.1 柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白的基因克隆 | 第98页 |
| 4.4.2 转移载体pFastBac-Dual-GFP-2C的构建 | 第98-99页 |
| 4.4.3 重组杆粒2C-pFastBac-Dual-GFP-Bacmid的构建 | 第99-100页 |
| 4.4.4 柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白的大量表达、纯化与鉴定 | 第100-102页 |
| 4.4.5 磷标准曲线的绘制 | 第102-103页 |
| 4.4.6 柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白的ATPase活性检测 | 第103-105页 |
| 4.4.7 不同因素对柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白ATPase活性的影响 | 第105-108页 |
| 4.4.8 二价离子对柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白ATPase活性的影响 | 第108页 |
| 4.4.9 柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白对不同NTP的活性 | 第108-109页 |
| 4.4.10 柞蚕Iflavirus病毒2C蛋白的解旋活性 | 第109-110页 |
| 4.4.11 柞蚕Iflavirus病毒5’非编码区的克隆与鉴定 | 第110-112页 |
| 4.4.12 重组质粒的鉴定 | 第112-113页 |
| 4.4.13 柞蚕Iflavirus病毒5’非编码区的功能验证 | 第113-114页 |
| 4.5 讨论 | 第114-117页 |
| 4.6 小结 | 第117-118页 |
| 5 柞蚕Iflavirus病毒的传播途径 | 第118-136页 |
| 5.1 引言 | 第118-119页 |
| 5.2 材料与设备 | 第119-120页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第119页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第119页 |
| 5.2.3 实验设备 | 第119-120页 |
| 5.3 实验方法 | 第120-126页 |
| 5.3.1 柞蚕Iflavirus病毒的获取 | 第120页 |
| 5.3.2 柞蚕Iflavirus病毒的定量 | 第120-121页 |
| 5.3.3 感染后柞蚕的RNA提取与反转录 | 第121页 |
| 5.3.4 柞蚕幼虫的经口感染实验 | 第121-122页 |
| 5.3.5 柞蚕的注射感染实验 | 第122页 |
| 5.3.6 病毒感染后的柞蚕交配与受精卵收集 | 第122页 |
| 5.3.7 柞蚕Iflavirus病毒在宿主组织中的分布和病理影响 | 第122-126页 |
| 5.4 结果 | 第126-133页 |
| 5.4.1 柞蚕Iflavirus病毒的分离纯化 | 第126页 |
| 5.4.2 柞蚕Iflavirus病毒水平传播的检测 | 第126-129页 |
| 5.4.3 柞蚕Iflavirus病毒垂直传播的检测 | 第129-130页 |
| 5.4.4 柞蚕Iflavirus病毒在被感染柞蚕体内的组织分布 | 第130-131页 |
| 5.4.5 柞蚕Iflavirus病毒的宿主范围 | 第131页 |
| 5.4.6 柞蚕感染柞蚕Iflavirus病毒后的病症 | 第131-133页 |
| 5.4.7 蚕场中柞蚕Iflavirus病毒与多角体病毒的复合感染 | 第133页 |
| 5.5 讨论 | 第133-135页 |
| 5.6 小结 | 第135-136页 |
| 6 结论与展望 | 第136-138页 |
| 6.1 结论 | 第136-137页 |
| 6.2 创新点摘要 | 第137页 |
| 6.3 展望 | 第137-138页 |
| 参考文献 | 第138-147页 |
| 附录A 柞蚕Iflavirus病毒基因组序列 | 第147-151页 |
| 附录B 柞蚕Iflavirus病毒多肽链氨基酸序列 | 第151-153页 |
| 附录C 内文电泳图 | 第153-156页 |
| 致谢 | 第156-157页 |
| 作者简介 | 第157-158页 |
| 攻读博士学位期间科研项目及科研成果 | 第158页 |
