| 前言 | 第7-16页 |
| 一、 实验材料和方法 | 第16-44页 |
| (一)实验材料 | 第16-22页 |
| (二) 实验方法 | 第22-44页 |
| 1 目的基因的克隆和测序 | 第22-27页 |
| 2 PCR法定点突变gpl20以提高在痘苗病毒中的表达 | 第27-28页 |
| 3 转移载体的构建 | 第28-29页 |
| 4 重组病毒的构建 | 第29-30页 |
| 5 重组病毒的鉴定 | 第30-35页 |
| 6 小鼠DNA免疫和加强免疫 | 第35-38页 |
| (1) 实验动物 | 第35页 |
| (2) 免疫原的制备 | 第35-36页 |
| 1 )DNA疫苗的制备 | 第35页 |
| 2 )聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA | 第35-36页 |
| 3 )重组痘苗病毒的制备 | 第36页 |
| (3) 最佳免疫程序的选择 | 第36-38页 |
| 1 )MMT和DNA疫苗最佳浓度的选择 | 第37-38页 |
| 2 )DNA和/或MMT单一免疫 | 第38页 |
| 3 )DNA和/或MMT初始免疫重组痘苗病毒加强免疫 | 第38页 |
| 7 免疫检测 | 第38-44页 |
| 二、 实验结果 | 第44-60页 |
| 1 目的基因的克隆和改造 | 第44-47页 |
| 2 转移载体的构建 | 第47-50页 |
| 3 重组病毒的构建 | 第50页 |
| 4 重组病毒的鉴定 | 第50-51页 |
| 5 DNA疫苗质粒在哺乳动物细胞中的瞬时表连和检测 | 第51-54页 |
| 6 动物免疫实验结果 | 第54-56页 |
| 7 prime-boost策略对DNA疫苗所诱导的免疫反应的影响 | 第56-60页 |
| 三、 讨论 | 第60-69页 |
| 四、 结论 | 第69-70页 |
| 五、 参考文献 | 第70-78页 |
| 六、 攻读博士期间发表的论文 | 第78-79页 |
| 七、 附录 | 第79-92页 |
| 八、 中英文摘要 | 第92-104页 |
| 九、 论文原创声明 | 第104-106页 |
| 十一、 致谢 | 第106-107页 |
