| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 综述 | 第12-29页 |
| ·小麦基因克隆的概况 | 第12-14页 |
| ·小麦基因克隆的方法 | 第12-13页 |
| ·小麦重要基因的克隆 | 第13-14页 |
| ·小麦产量性状的遗传研究 | 第14-17页 |
| ·小麦产量性状的构成因素 | 第14-15页 |
| ·小麦粒型与粒重的 QTL 分析 | 第15-17页 |
| ·作物产量性状相关 QTL 的分离 | 第17-21页 |
| ·分子标记概述 | 第21-23页 |
| ·等位基因特异性 PCR（AS-PCR） | 第23-27页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第27-28页 |
| ·本研究的技术路线图 | 第28-29页 |
| 第二章 小麦粒重基因 TaGW2 的克隆与原核表达 | 第29-50页 |
| 引言 | 第29页 |
| ·实验材料与仪器 | 第29-30页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·菌株、试剂 | 第29页 |
| ·仪器设备 | 第29页 |
| ·引物设计与合成 | 第29-30页 |
| ·小麦粒重基因 TaGW2 的克隆 | 第30-35页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·CTAB 提取液的配制 | 第31页 |
| ·DNA 的提取 | 第31页 |
| ·小麦总 RNA 提取 | 第31-32页 |
| ·实验前准备 | 第31页 |
| ·RNA 抽提步骤（Trizol 法）： | 第31-32页 |
| ·操作中应该注意的事项 | 第32页 |
| ·RT-PCR 扩增小麦全长 cDNA | 第32-33页 |
| ·cDNA 第一链合成 | 第32-33页 |
| ·全长 cDNA 扩增 | 第33页 |
| ·全长 cDNA 的克隆 | 第33-35页 |
| ·目的片段的回收纯化 | 第33-34页 |
| ·目的片段与 T 载体连接 | 第34页 |
| ·大肠杆菌 DH5a 感受态的制备（CaCl2 法） | 第34页 |
| ·连接产物的转化 | 第34-35页 |
| ·阳性克隆的筛选与测序 | 第35页 |
| ·序列分析 | 第35页 |
| ·小麦粒重基因 TaGW2 的原核表达 | 第35-38页 |
| ·PCR 扩增 | 第35页 |
| ·连接 T 载体，转化大肠杆菌感受态，涂板，蓝白斑筛选阳性克隆 | 第35页 |
| ·抽提重组 T 质粒（碱裂解法） | 第35-36页 |
| ·双酶切回收 | 第36页 |
| ·PET 载体连接 | 第36-37页 |
| ·连接产物转化 DH5a | 第37页 |
| ·挑取阳性菌落，抽提表达重组质粒，转化 DE3 表达菌株 | 第37页 |
| ·TPTG 诱导重组菌的表达 | 第37-38页 |
| ·聚丙烯酰胺凝胶电泳检测 | 第38页 |
| ·小麦粒重基因 TaGW2 内含子的克隆 | 第38页 |
| ·结果与分析 | 第38-48页 |
| ·小麦总 RNA 的提取 | 第38-39页 |
| ·目的片段的 PCR 扩增 | 第39-40页 |
| ·目的基因测序结果 | 第40-43页 |
| ·TaGW2 基因的结构和功能预测 | 第43-44页 |
| ·TaGW2 基因突变位点的发现 | 第44-46页 |
| ·突变 TaGW2 等位基因原核表达载体的构建及重组子鉴定 | 第46页 |
| ·目的基因表达产物的 SDS-PAGE 分析 | 第46-47页 |
| ·目的基因内含子的克隆 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第三章 小麦粒重基因 TaGW2 分子标记的开发与应用 | 第50-64页 |
| 引言 | 第50页 |
| ·实验材料 | 第50页 |
| ·小麦粒重基因 TaGW2 的 AS-PCR 引物设计 | 第50-52页 |
| ·小麦粒重基因 TaGW2 的 AS-PCR 标记应用 | 第52-53页 |
| ·基因组 DNA 的提取 | 第52页 |
| ·AS-PCR 标记的筛选 | 第52页 |
| ·突变位点染色体定位 | 第52页 |
| ·F2 群体基因型检测 | 第52页 |
| ·关联分析 | 第52页 |
| ·TaGW2 基因染色体上的初定位 | 第52页 |
| ·AS-PCR 标记在其它品种中的应用 | 第52-53页 |
| ·对 AS-PCR 标记的验证 | 第53页 |
| ·结果与分析 | 第53-62页 |
| ·AS-PCR 标记的筛选 | 第53页 |
| ·突变位点染色体定位 | 第53-54页 |
| ·F2 群体基因型检测 | 第54页 |
| ·关联分析 | 第54-58页 |
| ·TaGW2 突变等位基因在染色体上的初步定位 | 第58页 |
| ·AS-PCR 标记在其它品种中的应用 | 第58-60页 |
| ·对 AS-PCR 标记的验证 | 第60-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 第四章 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
