| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| ·杂交小麦研究概况 | 第13-15页 |
| ·生理型雄性不育小麦的研究及其应用 | 第13-14页 |
| ·遗传型雄性不育小麦的研究分析 | 第14-15页 |
| ·植物雄性不育的机理研究进展 | 第15-18页 |
| ·雄性不育的细胞水平研究 | 第16页 |
| ·花药的形成及双受精过程与植物雄性不育 | 第16-17页 |
| ·雄性不育相关基因的研究 | 第17-18页 |
| ·雄性不育与能量代谢的关系 | 第18页 |
| ·丙酮酸脱氢酶激酶(pyruvate dehydrogenase kinase PDK)研究进展 | 第18-22页 |
| ·丙酮酸脱氢酶复合体(PDC)构成及作用的研究 | 第18-20页 |
| ·丙酮酸脱氢酶激酶（PDK）的研究 | 第20-22页 |
| ·研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 小麦花药中丙酮酸含量的测定 | 第23-29页 |
| ·材料和方法 | 第23-26页 |
| ·实验材料与处理 | 第23-24页 |
| ·仪器与试剂 | 第24-25页 |
| ·实验原理 | 第25页 |
| ·丙酮酸含量测定的方法 | 第25-26页 |
| ·结果和分析 | 第26-27页 |
| 2．3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 小麦 TaPDK 的基因克隆和序列分析 | 第29-45页 |
| ·材料和方法 | 第29-30页 |
| ·实验材料 | 第29页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第29-30页 |
| ·试验方法 | 第30-35页 |
| ·小麦花药总 RNA 提取 | 第30页 |
| ·RNA 的纯化 | 第30-31页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第31-32页 |
| ·TaPDK 基因的克隆 | 第32-33页 |
| ·回收目的片段 | 第33页 |
| ·pMD-19T 载体与目的片段的连接 | 第33页 |
| ·热击转化大肠杆菌 Trans 5α | 第33-34页 |
| ·筛选阳性单克隆 | 第34页 |
| ·利用 NCBI 的 conserved domains 进行保守区域分析 | 第34-35页 |
| ·结果与分析 | 第35-43页 |
| ·小麦花药总 RNA 分析 | 第35页 |
| ·TaPDK 基因的克隆 | 第35-36页 |
| ·Ta_PDK 基因序列的性质分析 | 第36-43页 |
| ·讨论 | 第43-45页 |
| 第四章 小麦 TaPDK 原核表达的研究 | 第45-55页 |
| ·材料和方法 | 第45-46页 |
| ·试剂 | 第45页 |
| ·仪器 | 第45页 |
| ·引物 | 第45页 |
| ·配制所需试剂 | 第45-46页 |
| ·方法 | 第46-49页 |
| ·克隆载体的构建 | 第46-47页 |
| ·原核表达载体的构建与鉴定 | 第47-48页 |
| ·融合蛋白的诱导表达及表达条件的优化 | 第48-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-53页 |
| ·表达载体的构建及鉴定 | 第49-50页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第50-51页 |
| ·融合蛋白诱导表达及表达条件的优化 | 第51-52页 |
| ·目的蛋白的可溶性分析 | 第52-53页 |
| ·表达产物的 Western Blotting 分析 | 第53页 |
| ·讨论 | 第53-55页 |
| 第五章 目的蛋白的纯化 | 第55-59页 |
| ·试验材料 | 第55页 |
| ·仪器与试剂 | 第55页 |
| ·方法 | 第55-56页 |
| ·测定目的蛋白浓度 | 第55页 |
| ·目的蛋白的初步纯化 | 第55-56页 |
| ·目的蛋白的二级纯化 | 第56页 |
| ·目的蛋白的浓缩 | 第56页 |
| ·结果 | 第56-58页 |
| ·目的蛋白浓度的测定 | 第56页 |
| ·经镍亲和层析柱初步纯化 | 第56-57页 |
| ·目的蛋白的二次纯化及 Western Bloting 验证 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 第六章 全文总结 | 第59-61页 |
| ·小麦花药中丙酮酸含量与育性的关系 | 第59页 |
| ·TaPDK 基因的克隆与序列分析 | 第59页 |
| ·TaPDK 基因的原核表达和鉴定 | 第59-60页 |
| ·目的蛋白的纯化 | 第60页 |
| ·结论 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 作者简介 | 第67页 |
