| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-27页 |
| 1.1 糖生物学发展现状 | 第10-13页 |
| 1.2 寡糖的合成 | 第13-17页 |
| 1.3 酶促寡糖合成 | 第17-19页 |
| 1.4 寡糖合成现状及发展方向 | 第19-20页 |
| 1.5 糖基磷酸脂的功能与合成 | 第20-25页 |
| 1.6 课题研究依据及设计方案 | 第25页 |
| 1.7 论文的研究目的和意义 | 第25-27页 |
| 第二章 产氨基葡萄糖激酶的微生物筛选与发酵条件优化 | 第27-43页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第27-28页 |
| 2.1.1 土样 | 第28页 |
| 2.1.2 培养基 | 第28页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第28页 |
| 2.2 试验方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 土壤细菌的初筛 | 第28-29页 |
| 2.2.2 产酶菌复筛 | 第29页 |
| 2.2.3 种子生长曲线测定 | 第29页 |
| 2.2.4 种子培养 | 第29页 |
| 2.2.5 发酵培养 | 第29-31页 |
| 2.2.6 HPLC测定氨基葡萄糖激酶活性 | 第31-32页 |
| 2.3 结果与分析 | 第32-42页 |
| 2.3.1 初筛复筛结果 | 第32-33页 |
| 2.3.2 种子生长曲线 | 第33-34页 |
| 2.3.3 酶反应体系HPLC色谱图 | 第34-35页 |
| 2.3.4 氨基葡萄糖标准曲线 | 第35页 |
| 2.3.5 发酵培养基组成对发酵液中氨基葡萄糖激酶酶活力的影响 | 第35-37页 |
| 2.3.6 培养基优化的正交试验结果 | 第37-38页 |
| 2.3.7 发酵温度对细菌生长及酶活力的影响 | 第38-40页 |
| 2.3.8 发酵pH对细菌产酶的影响 | 第40页 |
| 2.3.9 发酵接种量对细菌产酶的影响 | 第40-41页 |
| 2.3.10 5L发酵罐正交实验结果 | 第41-42页 |
| 2.4 本章小结 | 第42-43页 |
| 第三章 氨基葡萄糖激酶提取与分离纯化 | 第43-54页 |
| 3.1 实验材料与方法 | 第44-48页 |
| 3.1.1 仪器药品 | 第45-46页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第46-48页 |
| 3.2 结果与分析 | 第48-53页 |
| 3.2.1 蛋白质测定——考马斯亮兰染色法(Bradford法)标准曲线 | 第48-49页 |
| 3.2.2 三种提取方法比较 | 第49页 |
| 3.2.3 SDS提取正交实验结果 | 第49-51页 |
| 3.2.4 硫酸铵分级沉淀 | 第51页 |
| 3.2.5 提取分离纯化各步酶的SDS电泳结果 | 第51-52页 |
| 3.2.6 SDS提取法回收率表 | 第52-53页 |
| 3.3 本章小结 | 第53-54页 |
| 第四章 酶的固定化及性质测定 | 第54-69页 |
| 4.1 材料与仪器 | 第55-56页 |
| 4.1.1 试验原料及试剂 | 第55-56页 |
| 4.1.2 主要仪器设备 | 第56页 |
| 4.2 实验方法 | 第56-58页 |
| 4.2.1 测定方法与计算 | 第56页 |
| 4.2.2 聚丙烯酰胺固定化方法 | 第56-57页 |
| 4.2.3 明胶固定化方法 | 第57页 |
| 4.2.4 卡拉胶固定化方法 | 第57页 |
| 4.2.5 固定化酶的酶学特性的研究 | 第57-58页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第58-68页 |
| 4.3.1 聚丙烯酰胺固定化条件优化 | 第58-60页 |
| 4.3.2 明胶固定化条件优化 | 第60-62页 |
| 4.3.3 卡拉胶固定化条件优化 | 第62-64页 |
| 4.3.4 酶学特性 | 第64-68页 |
| 4.4 本章小结 | 第68-69页 |
| 第五章 氨基葡萄糖-6-磷酸的合成与鉴定 | 第69-78页 |
| 5.1 实验材料与设备 | 第70-71页 |
| 5.1.1 主要仪器及设备 | 第70-71页 |
| 5.1.2 主要试剂与药品 | 第71页 |
| 5.2 实验方法 | 第71-72页 |
| 5.2.1 酶促反应 | 第71页 |
| 5.2.2 酶促反应条件优化 | 第71-72页 |
| 5.2.3 产物分离纯化 | 第72页 |
| 5.2.4 产物HPLC分析 | 第72页 |
| 5.2.5 红外光谱分析 | 第72页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第72-76页 |
| 5.3.1 氯化镁加量对酶促反应的影响 | 第72-73页 |
| 5.3.2 反应温度对酶促反应的影响 | 第73-74页 |
| 5.3.3 氨基葡萄糖加量对酶促反应的影响 | 第74页 |
| 5.3.4 产物液相色谱标准曲线 | 第74-75页 |
| 5.3.5 产品液相谱测定结果 | 第75-76页 |
| 5.3.6 产品红外光谱图 | 第76页 |
| 5.4 本章小结 | 第76-78页 |
| 第六章 结论与展望 | 第78-80页 |
| 6.1 结论 | 第78-79页 |
| 6.2 展望 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-83页 |
| 致谢 | 第83页 |
