| 中文摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 缩略语/符号说明 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 研究现状、成果 | 第11-12页 |
| 研究目的、方法 | 第12-13页 |
| 一、构建串联荧光报告基因pLamp2C-mRFP-EGFP、pLamp2C-EGFP-mRFP、pmRFP-EGFP-Lamp2C、pEGFP-mRFP-Lamp2C | 第13-39页 |
| 1.1 对象和方法 | 第13-26页 |
| 1.1.1 实验所需质粒 | 第13页 |
| 1.1.2 实验所需主要仪器 | 第13-14页 |
| 1.1.3 实验所需主要试剂 | 第14页 |
| 1.1.4 主要溶液配制 | 第14-15页 |
| 1.1.5 构建串联荧光报告基因pLamp2C-mRFP-EGFP | 第15-21页 |
| 1.1.6 构建串联荧光报告基因pLamp2C-EGFP-mRFP | 第21-23页 |
| 1.1.7 构建串联荧光报告基因pmRFP-EGFP-Lamp2C | 第23-24页 |
| 1.1.8 构建串联荧光报告基因pEGFP-mRFP-Lamp2C | 第24-26页 |
| 1.2 结果 | 第26-37页 |
| 1.2.1 pLamp2C-mRFP-EGFP | 第26-29页 |
| 1.2.2 pLamp2C-EGFP-mRFP | 第29-32页 |
| 1.2.3 pmRFP-EGFP-Lamp2C | 第32-34页 |
| 1.2.4 pEGFP-mRFP-Lamp2C | 第34-37页 |
| 1.3 讨论 | 第37-38页 |
| 1.4 小结 | 第38-39页 |
| 二、鞘氨醇对PC3细胞凋亡和坏死的影响 | 第39-48页 |
| 2.1 实验材料 | 第39-41页 |
| 2.1.1 研究对象 | 第39页 |
| 2.1.2 主要的实验试剂 | 第39页 |
| 2.1.3 主要的仪器及实验设备 | 第39-40页 |
| 2.1.4 试剂的配制方法 | 第40-41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-44页 |
| 2.2.1 细胞复苏、培养、传代、冻存 | 第41-42页 |
| 2.2.2 细胞计数 | 第42页 |
| 2.2.3 流式细胞术检测凋亡 | 第42-43页 |
| 2.2.4 MTT法检测细胞坏死 | 第43-44页 |
| 2.3 结果 | 第44-45页 |
| 2.4 讨论 | 第45-46页 |
| 2.5 小结 | 第46-48页 |
| 三、溶酶体膜通透化对荧光报告基因红、绿荧光蛋白的影响 | 第48-65页 |
| 3.1 实验对象和材料 | 第48-50页 |
| 3.1.1 细胞 | 第48页 |
| 3.1.2 主要的实验试剂 | 第48页 |
| 3.1.3 实验主要仪器设备 | 第48-49页 |
| 3.1.4 所需主要试剂及溶液配制 | 第49-50页 |
| 3.2 实验方法 | 第50-56页 |
| 3.2.1 PC3细胞复苏、培养、传代、冻存 | 第50-51页 |
| 3.2.2 提取质粒pLamp2C-mRFP-EGFP、pLamp2C-EGFP-mRFP、pmRFP-EGFP-Lamp2C、pEGFP-mRFP-LAMP2C | 第51-54页 |
| 3.2.3 PC3细胞转染 | 第54-55页 |
| 3.2.4 LysoTracker Blue标记溶酶体 | 第55页 |
| 3.2.5 利用鞘氨醇诱导溶酶体膜通透化 | 第55-56页 |
| 3.2.6 统计学处理 | 第56页 |
| 3.3 结果 | 第56-61页 |
| 3.3.1 转染PC3细胞 | 第56页 |
| 3.3.2 pLamp2C-mRFP-EGFP与溶酶体共定位 | 第56-58页 |
| 3.3.3 鞘氨醇处理前后pLamp2C-mRFP-EGFP的红绿荧光变化 | 第58-61页 |
| 3.4 讨论 | 第61-64页 |
| 3.5 小结 | 第64-65页 |
| 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-70页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第70-71页 |
| 综述 溶酶体膜通透化与细胞死亡的研究进展 | 第71-80页 |
| 综述参考文献 | 第76-80页 |
| 致谢 | 第80-81页 |
| 个人简历 | 第81页 |
