| 摘要 | 第3-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 第一章 前言 | 第13-37页 |
| 1 南方水稻黑条矮缩病毒的研究概况 | 第13-18页 |
| 1.1 病害发生概况 | 第13页 |
| 1.2 病害症状 | 第13-14页 |
| 1.3 寄主范围及传播介体 | 第14-15页 |
| 1.3.1 寄主范围 | 第14页 |
| 1.3.2 传播介体及其传毒特性 | 第14-15页 |
| 1.4 病原特征 | 第15-18页 |
| 1.4.1 病毒粒体 | 第15页 |
| 1.4.2 基因组结构 | 第15-16页 |
| 1.4.3 蛋白功能 | 第16-18页 |
| 2 水稻齿叶矮缩病毒研究概况 | 第18-22页 |
| 2.1 病害发生概况 | 第18页 |
| 2.2 病害症状 | 第18-19页 |
| 2.3 寄主范围及传播介体 | 第19-20页 |
| 2.3.1 寄主范围 | 第19页 |
| 2.3.2 传播介体及其传毒特性 | 第19-20页 |
| 2.4 病原特征 | 第20-22页 |
| 2.4.1 病毒粒体 | 第20-21页 |
| 2.4.2 基因组结构 | 第21页 |
| 2.4.3 蛋白功能 | 第21-22页 |
| 3 病毒的复合侵染 | 第22-26页 |
| 3.1 干扰作用 | 第23页 |
| 3.2 协生作用 | 第23-26页 |
| 3.2.1 协生作用现象的发生及表型 | 第23-24页 |
| 3.2.2 协生作用的分子机理 | 第24-25页 |
| 3.2.3 协生作用介导的病毒与介体的互作 | 第25-26页 |
| 4 RNA沉默介导的植物抗病机制 | 第26-31页 |
| 5 植物RNA沉默途径关键蛋白 | 第31-35页 |
| 5.1 AGO蛋白 | 第31-32页 |
| 5.2 DCL蛋白 | 第32-34页 |
| 5.3 RDR蛋白 | 第34-35页 |
| 6 病毒编码的沉默抑制子 | 第35页 |
| 7 与协生相关的病毒编码的沉默抑制子 | 第35-36页 |
| 8 本研究的目的和意义 | 第36-37页 |
| 第二章 SRBSDV和RRSV互作关系及其对介体获毒率的影响 | 第37-58页 |
| 2.1 引言 | 第37页 |
| 2.2 实验材料 | 第37-39页 |
| 2.2.1 主要仪器与试剂 | 第37-38页 |
| 2.2.2 主要试剂及配方 | 第38-39页 |
| 2.2.3 供试水稻 | 第39页 |
| 2.2.4 供试病毒 | 第39页 |
| 2.2.5 供试飞虱 | 第39页 |
| 2.3 实验方法 | 第39-45页 |
| 2.3.1 供试水稻及病毒侵染 | 第39-40页 |
| 2.3.2 症状观察 | 第40页 |
| 2.3.3 水稻叶片总RNA的提取 | 第40-41页 |
| 2.3.4 水稻总RNA的DNaseⅠ处理 | 第41页 |
| 2.3.5 水稻总RNA质量检测 | 第41页 |
| 2.3.6 SYBR Green II实时荧光定量RT-PCR检测病毒基因表达的动态变化 | 第41-44页 |
| 2.3.7 介体昆虫获毒率测定 | 第44-45页 |
| 2.3.8 数据处理与分析 | 第45页 |
| 2.4 结果 | 第45-54页 |
| 2.4.1 复合侵染加剧病害症状 | 第45-47页 |
| 2.4.2 复合侵染改变两病毒基因表达相对水平 | 第47-52页 |
| 2.4.3 复合侵染提高介体获毒效率 | 第52-53页 |
| 2.4.4 病毒累积量与介体获毒率呈正相关 | 第53-54页 |
| 2.5 讨论 | 第54-58页 |
| 第三章 SRBSDV和RRSV单独侵染及复合侵染的细胞病理学 | 第58-77页 |
| 3.1 引言 | 第58-60页 |
| 3.2 实验材料 | 第60-61页 |
| 3.2.1 供试水稻 | 第60页 |
| 3.2.2 供试病毒 | 第60页 |
| 3.2.3 供试飞虱 | 第60-61页 |
| 3.3 实验方法 | 第61-63页 |
| 3.3.1 供试水稻及病毒侵染 | 第61-62页 |
| 3.3.2 透射电镜样品制备 | 第62-63页 |
| 3.4 结果 | 第63-74页 |
| 3.4.1 病毒侵染叶肉细胞病理学变化 | 第63-64页 |
| 3.4.2 病毒侵染维管素组织细胞病理学变化 | 第64-74页 |
| 3.5 讨论 | 第74-77页 |
| 第四章 水稻RNA沉默途径核心基因在SRBSDV和RRSV单独侵染及复合侵染时表达动态 | 第77-94页 |
| 4.1 引言 | 第77页 |
| 4.2 实验材料 | 第77-79页 |
| 4.2.1 主要仪器及用品 | 第77-78页 |
| 4.2.2 主要试剂及配方 | 第78-79页 |
| 4.2.3 供试水稻 | 第79页 |
| 4.2.4 供试病毒 | 第79页 |
| 4.2.5 供试飞虱 | 第79页 |
| 4.3 实验方法 | 第79-83页 |
| 4.3.1 供试水稻及病毒侵染 | 第79页 |
| 4.3.2 水稻叶片总RNA的提取 | 第79页 |
| 4.3.3 水稻总RNA的DNaseⅠ处理 | 第79页 |
| 4.3.4 水稻总RNA质量检测 | 第79-80页 |
| 4.3.5 RT-q PCR检测水稻RNA沉默关键基因应对病毒侵染的表达动态 | 第80-83页 |
| 4.3.6 数据处理与分析 | 第83页 |
| 4.4 结果 | 第83-91页 |
| 4.4.1 水稻19个AGO基因的病程表达特征 | 第83-86页 |
| 4.4.2 水稻8个Os DCLs基因的病程表达特征 | 第86-89页 |
| 4.4.3 水稻5个Os RDRs基因的病程表达特征 | 第89-91页 |
| 4.5 讨论 | 第91-94页 |
| 第五章 SRBSDV和RRSV的沉默抑制子介导两种病毒的协生 | 第94-113页 |
| 5.1 引言 | 第94页 |
| 5.2 实验材料 | 第94-96页 |
| 5.2.1 主要仪器及用品 | 第94-95页 |
| 5.2.2 供试质粒及菌株 | 第95页 |
| 5.2.3 供试病毒 | 第95-96页 |
| 5.2.4 植物材料 | 第96页 |
| 5.3 实验方法 | 第96-104页 |
| 5.3.1 植物表达载体的构建 | 第96-97页 |
| 5.3.2 SRBSDV S6和RRSV S6克隆载体的构建 | 第97-102页 |
| 5.3.3 重组植物表达载体转化农杆菌EHA105菌株 | 第102-104页 |
| 5.4 结果 | 第104-111页 |
| 5.4.1 植物表达载体多克隆位点的改造 | 第104页 |
| 5.4.2 SRBSDV S6和RRSV S6编码基因的克隆 | 第104页 |
| 5.4.3 SRBSDV和RRSV沉默抑制子SP6和RP6植物表达载体的构建 | 第104-106页 |
| 5.4.4 SRBSDV SP6和RRSV SP6单独及复合作用对转基因烟草 16c中GFP的RNA沉默抑制效果 | 第106-110页 |
| 5.4.5 病毒沉默抑制子浸润区域GFP m RNA表达水平RT-q PCR检测 | 第110-111页 |
| 5.5 结论与讨论 | 第111-113页 |
| 第六章 全文结论及进一步研究建议 | 第113-115页 |
| 6.1 主要结论 | 第113页 |
| 6.2 进一步研究的建议 | 第113-115页 |
| 致谢 | 第115-116页 |
| 参考 文献 | 第116-126页 |
| 附录A | 第126-143页 |
| 附录B | 第143页 |
