摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
引言 | 第11-12页 |
第一章 贝类免疫系统研究现状 | 第12-17页 |
1.1 贝类免疫系统 | 第12-13页 |
1.2 贝类部分免疫相关基因 | 第13-17页 |
1.2.1 热休克蛋白 90(Heat Shock Protein 90, HSP90)家族 | 第13-14页 |
1.2.2 活化的蛋白激酶C受体 1(receptor for activated protein C kinase 1,RACK1)基因 | 第14-15页 |
1.2.3 富含亮氨酸重复序列(LRR)基因 | 第15-17页 |
第二章 三角帆蚌热休克蛋白 90(HSP90)分子特征及表达分析 | 第17-35页 |
2.1 材料与方法 | 第17-26页 |
2.1.1 实验材料 | 第17-20页 |
2.1.2 实验方法 | 第20-21页 |
2.1.2.1 总RNA提取 | 第20页 |
2.1.2.2 RNA质量的检测 | 第20-21页 |
2.1.3 HSP90基因cDNA的克隆 | 第21-25页 |
2.1.3.1 3′RACE的扩增 | 第21-22页 |
2.1.3.2 5′ RACE的扩增 | 第22-23页 |
2.1.3.3 PCR产物的纯化 | 第23-24页 |
2.1.3.4 连接反应 | 第24页 |
2.1.3.5 转化反应 | 第24-25页 |
2.1.3.6 菌液PCR检测及测序 | 第25页 |
2.1.4 生物信息学分析 | 第25-26页 |
2.1.5 实时荧光定量PCR | 第26页 |
2.2 结果与分析 | 第26-33页 |
2.2.1 HcHSP90 cDNA全长及推导的氨基酸序列特征分析 | 第26-28页 |
2.2.3 序列同源性 | 第28页 |
2.2.4 HSP90系统进化树 | 第28-29页 |
2.2.5 HcHSP90组织表达 | 第29-30页 |
2.2.6 冷热应激后的HcHSP90 mRNA表达量变化 | 第30-31页 |
2.2.7 重金属镉暴露后HcHSP90 mRNA表达量变化 | 第31-33页 |
2.3 讨论 | 第33-35页 |
第三章 三角帆蚌RACK1基因cDNA的克隆和诱导表达 | 第35-44页 |
3.1 材料和方法 | 第35-36页 |
3.1.1 实验材料 | 第35页 |
3.1.2 实验方法 | 第35-36页 |
3.1.2.1 总RNA提取与检测 | 第35页 |
3.1.2.2 cDNA全序列克隆 | 第35页 |
3.1.2.3 PCR产物的纯化 | 第35-36页 |
3.2 结果 | 第36-42页 |
3.2.1 HcRACK1基因cDNA全长与序列分析 | 第36-37页 |
3.2.2 HcRACK1与其他物种RACK1的多重比对及系统进化树分析 | 第37-39页 |
3.2.3 HcRACK1 mRNA的组织分布及嗜水气单胞菌刺激下HcRACK1表达量变化 | 第39页 |
3.2.4 重金属镉暴露下HcRACK1表达量变化 | 第39-42页 |
3.3 讨论 | 第42-44页 |
第四章 三角帆蚌LRR基因cDNA的克隆和表达分析 | 第44-50页 |
4.1 材料和方法 | 第44-45页 |
4.1.1 实验材料 | 第44页 |
4.1.2 实验方法 | 第44-45页 |
4.1.2.1 总RNA提取与检测 | 第44页 |
4.1.2.2 cDNA全序列克隆 | 第44页 |
4.1.2.3 PCR产物的纯化 | 第44-45页 |
4.1.2.4 连接反应 | 第45页 |
4.1.2.5 转化反应 | 第45页 |
4.1.2.6 菌液PCR检测及测序 | 第45页 |
4.1.2.7 核苷酸序列及氨基酸序列分析 | 第45页 |
4.1.2.8 荧光定量分析 | 第45页 |
4.2 结果 | 第45-49页 |
4.2.1 LRR基因cDNA全长与序列分析 | 第45-47页 |
4.2.2 LRR mRNA表达分析 | 第47-49页 |
4.3 讨论 | 第49-50页 |
第五章 结论与展望 | 第50-53页 |
5.1 结论 | 第50-51页 |
5.2 展望 | 第51-53页 |
参考文献 | 第53-62页 |
硕士在读期间发表论文 | 第62-63页 |
致谢 | 第63页 |