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三角帆蚌3个免疫相关基因的分子特征及表达分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
引言第11-12页
第一章 贝类免疫系统研究现状第12-17页
    1.1 贝类免疫系统第12-13页
    1.2 贝类部分免疫相关基因第13-17页
        1.2.1 热休克蛋白 90(Heat Shock Protein 90, HSP90)家族第13-14页
        1.2.2 活化的蛋白激酶C受体 1(receptor for activated protein C kinase 1,RACK1)基因第14-15页
        1.2.3 富含亮氨酸重复序列(LRR)基因第15-17页
第二章 三角帆蚌热休克蛋白 90(HSP90)分子特征及表达分析第17-35页
    2.1 材料与方法第17-26页
        2.1.1 实验材料第17-20页
        2.1.2 实验方法第20-21页
            2.1.2.1 总RNA提取第20页
            2.1.2.2 RNA质量的检测第20-21页
        2.1.3 HSP90基因cDNA的克隆第21-25页
            2.1.3.1 3′RACE的扩增第21-22页
            2.1.3.2 5′ RACE的扩增第22-23页
            2.1.3.3 PCR产物的纯化第23-24页
            2.1.3.4 连接反应第24页
            2.1.3.5 转化反应第24-25页
            2.1.3.6 菌液PCR检测及测序第25页
        2.1.4 生物信息学分析第25-26页
        2.1.5 实时荧光定量PCR第26页
    2.2 结果与分析第26-33页
        2.2.1 HcHSP90 cDNA全长及推导的氨基酸序列特征分析第26-28页
        2.2.3 序列同源性第28页
        2.2.4 HSP90系统进化树第28-29页
        2.2.5 HcHSP90组织表达第29-30页
        2.2.6 冷热应激后的HcHSP90 mRNA表达量变化第30-31页
        2.2.7 重金属镉暴露后HcHSP90 mRNA表达量变化第31-33页
    2.3 讨论第33-35页
第三章 三角帆蚌RACK1基因cDNA的克隆和诱导表达第35-44页
    3.1 材料和方法第35-36页
        3.1.1 实验材料第35页
        3.1.2 实验方法第35-36页
            3.1.2.1 总RNA提取与检测第35页
            3.1.2.2 cDNA全序列克隆第35页
            3.1.2.3 PCR产物的纯化第35-36页
    3.2 结果第36-42页
        3.2.1 HcRACK1基因cDNA全长与序列分析第36-37页
        3.2.2 HcRACK1与其他物种RACK1的多重比对及系统进化树分析第37-39页
        3.2.3 HcRACK1 mRNA的组织分布及嗜水气单胞菌刺激下HcRACK1表达量变化第39页
        3.2.4 重金属镉暴露下HcRACK1表达量变化第39-42页
    3.3 讨论第42-44页
第四章 三角帆蚌LRR基因cDNA的克隆和表达分析第44-50页
    4.1 材料和方法第44-45页
        4.1.1 实验材料第44页
        4.1.2 实验方法第44-45页
            4.1.2.1 总RNA提取与检测第44页
            4.1.2.2 cDNA全序列克隆第44页
            4.1.2.3 PCR产物的纯化第44-45页
            4.1.2.4 连接反应第45页
            4.1.2.5 转化反应第45页
            4.1.2.6 菌液PCR检测及测序第45页
            4.1.2.7 核苷酸序列及氨基酸序列分析第45页
            4.1.2.8 荧光定量分析第45页
    4.2 结果第45-49页
        4.2.1 LRR基因cDNA全长与序列分析第45-47页
        4.2.2 LRR mRNA表达分析第47-49页
    4.3 讨论第49-50页
第五章 结论与展望第50-53页
    5.1 结论第50-51页
    5.2 展望第51-53页
参考文献第53-62页
硕士在读期间发表论文第62-63页
致谢第63页

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