摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略词表 | 第15-16页 |
前言 | 第16-18页 |
第1章 文献综述 | 第18-26页 |
1.1 MIRNA的基本生物学特点 | 第19-21页 |
1.1.1 miRNA的生物合成与作用方式 | 第19页 |
1.1.2 miRNA的生物学特征 | 第19-20页 |
1.1.3 miRNA常用的预测及靶基因的检测方法 | 第20-21页 |
1.2 MIRNAS与胃癌的研究进展 | 第21-26页 |
1.2.1 miR-155 与胃癌的研究进展 | 第21-23页 |
1.2.2 miRLet-7 与胃癌的研究进展 | 第23-24页 |
1.2.3 miR-224 与胃癌的研究进展 | 第24-26页 |
第2章 miR-224在胃癌组织及胃癌细胞系中的表达及临床意义 | 第26-40页 |
2.1 实验材料 | 第26-27页 |
2.1.1 主要实验材料和设备 | 第26-27页 |
2.1.2 入组标本处理 | 第27页 |
2.1.3 细胞来源 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-31页 |
2.2.1 细胞培养及传代 | 第27-28页 |
2.2.2 Trizol法提取组织和细胞中RNA | 第28-30页 |
2.2.3 反转率及RT-PCR检测miRNA和mRNA表达 | 第30-31页 |
2.2.4 统计学分析 | 第31页 |
2.3 实验结果 | 第31-37页 |
2.3.1 胃癌患者的一般临床资料 | 第31-33页 |
2.3.2 miR-224 在胃癌组织中高表达 | 第33-35页 |
2.3.3 miR-224 在胃癌细胞系中高表达 | 第35-36页 |
2.3.4 miR-224 与胃癌的生存期具有相关性 | 第36-37页 |
2.4 实验讨论 | 第37-40页 |
第3章 MIR-224 促进胃癌细胞的增殖抑制胃癌细胞凋亡 | 第40-60页 |
3.1 实验材料 | 第40-42页 |
3.1.1 细胞来源 | 第40页 |
3.1.2 主要实验器材 | 第40-41页 |
3.1.3 主要实验试剂 | 第41-42页 |
3.2 主要实验步骤 | 第42-51页 |
3.2.1 Trizol法提取细胞中RNA | 第42-44页 |
3.2.2 反转率及RT-PCR检测miRNA和mRNA表达 | 第44-45页 |
3.2.3 细胞转染实验 | 第45-46页 |
3.2.4 流式细胞术检测细胞凋亡能力 | 第46-47页 |
3.2.5 CCK8检测细胞增殖能力 | 第47-48页 |
3.2.6 Western Blot检测蛋白表达 | 第48-50页 |
3.2.7 细胞免疫荧光染色实验 | 第50-51页 |
3.2.8 裸鼠成瘤实验 | 第51页 |
3.2.9 统计学分析 | 第51页 |
3.3 实验结果 | 第51-58页 |
3.3.1 miR-224 对胃癌细胞增殖能力的影响 | 第51-53页 |
3.3.2 miR-224 对胃癌细胞周期的影响 | 第53-55页 |
3.3.3 miR-224 增强胃癌细胞抗凋亡能力 | 第55-56页 |
3.3.4 miR-224 促进裸鼠皮下胃癌生长 | 第56-58页 |
3.4 实验讨论 | 第58-60页 |
第4章 MIR-224 通过靶向MTOR促进胃癌的增殖转移能力以及抗凋亡能力 | 第60-84页 |
4.1 实验材料 | 第60-62页 |
4.1.1 细胞来源 | 第60页 |
4.1.2 主要实验器材 | 第60-61页 |
4.1.3 主要实验试剂 | 第61-62页 |
4.2 主要实验步骤 | 第62-74页 |
4.2.1 荧光素酶报告基因分析 | 第62-63页 |
4.2.2 细胞转染实验 | 第63-64页 |
4.2.3 Trizol法提取组织和细胞中RNA | 第64-66页 |
4.2.4 反转率及RT-PCR检测miRNA和mRNA表达 | 第66-67页 |
4.2.5 Western Blot检测蛋白表达 | 第67-70页 |
4.2.6 Transwell实验 | 第70-71页 |
4.2.7 细胞免疫荧光染色实验 | 第71页 |
4.2.8 TUNEL法检测细胞凋亡 | 第71-72页 |
4.2.9 免疫组织化学实验(Ki67和mTOR) | 第72-73页 |
4.2.10 统计学分析 | 第73-74页 |
4.3 实验结果 | 第74-81页 |
4.3.1 mTOR是miR-224 作用靶点 | 第74-76页 |
4.3.2 miR-224 通过mTOR促进胃癌细胞的增殖和转移 | 第76-78页 |
4.3.3 miR-224 通过mTOR抑制胃癌细胞凋亡 | 第78-79页 |
4.3.4 miR-224 通过mTOR促进裸鼠皮下胃癌细胞的生长 | 第79-81页 |
4.4 实验讨论 | 第81-84页 |
第5章 实验结论 | 第84-86页 |
创新点 | 第86-88页 |
参考文献 | 第88-94页 |
作者简介及在学期间科研成果 | 第94-96页 |
致谢 | 第96页 |