缩略语表 | 第6-8页 |
中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
前言 | 第13-15页 |
文献回顾 | 第15-24页 |
第一部分 CD147通过非依赖p53途径促进卵巢癌细胞有氧糖酵解的作用研究 | 第24-43页 |
1 材料 | 第24-27页 |
1.1 主要仪器设备 | 第24-25页 |
1.2 主要试剂和耗材 | 第25页 |
1.3 细胞系 | 第25-26页 |
1.4 实验动物 | 第26页 |
1.5 主要缓冲液 | 第26-27页 |
2 方法 | 第27-37页 |
2.1 细胞培养 | 第27页 |
2.2 构建稳定干涉CD147的卵巢癌细胞系A2780和SKOV3 | 第27-28页 |
2.3 Real Time PCR | 第28-30页 |
2.4 蛋白免疫印迹 | 第30-32页 |
2.5 荷瘤小鼠模型的构建 | 第32页 |
2.6 细胞葡萄糖摄取检测 | 第32页 |
2.7 细胞糖酵解速率检测 | 第32-33页 |
2.8 细胞乳酸排出检测 | 第33-34页 |
2.9 细胞氧消耗速率检测 | 第34页 |
2.10 荷瘤小鼠~(18)F-FDG摄取率检测 | 第34页 |
2.11 免疫组织化学染色及评分 | 第34-37页 |
2.12 统计学分析 | 第37页 |
3 结果 | 第37-41页 |
3.1 下调CD147能显著抑制卵巢癌细胞糖酵解 | 第37-39页 |
3.2 下调CD147能抑制裸鼠移植瘤的增殖 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
第二部分 CD147在卵巢癌细胞中调控FOXM1的机制研究 | 第43-57页 |
1 材料 | 第43-46页 |
1.1 细胞系 | 第43页 |
1.2 仪器设备 | 第43-44页 |
1.3 试剂和耗材 | 第44-45页 |
1.4 缓冲液 | 第45-46页 |
2 方法 | 第46-49页 |
2.1 Real Time PCR | 第46页 |
2.2 蛋白免疫印迹 | 第46-47页 |
2.3 免疫荧光染色 | 第47-48页 |
2.4 免疫组织化学染色及评分 | 第48-49页 |
2.5 统计学分析 | 第49页 |
3 结果 | 第49-54页 |
3.1 CD147能通过非依赖p53途径调控FOXM1、HK2和GLUT1的表达 | 第49-51页 |
3.2 CD147和CD44在卵巢癌细胞中发生共定位 | 第51-52页 |
3.3 CD147、pAKT、p STAT3和FOXM1在卵巢癌组织中表达正相关 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
第三部分 转录因子FOXM1促进卵巢癌细胞糖代谢重编程的机制研究 | 第57-79页 |
1 材料 | 第57-60页 |
1.1 细胞系 | 第57页 |
1.2 仪器设备 | 第57-58页 |
1.3 试剂和耗材 | 第58-59页 |
1.4 缓冲液 | 第59-60页 |
2 方法 | 第60-69页 |
2.1 构建稳定干涉FOXM1的卵巢癌细胞系 | 第60页 |
2.2 Real Time PCR | 第60-61页 |
2.3 蛋白免疫印迹 | 第61-62页 |
2.4 荷瘤小鼠模型的构建 | 第62页 |
2.5 细胞葡萄糖摄取检测 | 第62-63页 |
2.6 细胞糖酵解速率检测 | 第63页 |
2.7 细胞乳酸排出检测 | 第63-64页 |
2.8 细胞氧消耗检测 | 第64页 |
2.9 荷瘤小鼠~(18)F-FDG摄取率检测 | 第64-65页 |
2.10 染色质免疫沉淀Ch IP | 第65-67页 |
2.11 双荧光素酶报告基因检测 | 第67-68页 |
2.12 免疫组织化学染色及评分 | 第68页 |
2.13 统计学分析 | 第68-69页 |
3 结果 | 第69-77页 |
3.1 下调FOXM1能显著抑制卵巢癌细胞糖酵解 | 第69-70页 |
3.2 GLUT1和HK2是FOXM1直接调控的糖酵解关键酶 | 第70-74页 |
3.3 下调FOXM1能抑制裸鼠移植瘤的增殖 | 第74-75页 |
3.4 FOXM1在卵巢癌组织中的表达分别与GLUT1和HK2的表达正相关 | 第75-77页 |
4 讨论 | 第77-79页 |
小结 | 第79-80页 |
参考文献 | 第80-87页 |
个人简历及研究成果 | 第87-88页 |
致谢 | 第88-89页 |