| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 1 文献综述 | 第13-22页 |
| 1.1 减数分裂 | 第13-15页 |
| 1.1.1 减数分裂的特殊性及重要性 | 第13页 |
| 1.1.2 减数分裂的过程 | 第13-14页 |
| 1.1.3 减数分裂同源重组的分子机制 | 第14-15页 |
| 1.2 多倍体植物研究概况 | 第15-17页 |
| 1.2.1 多倍体植物的起源与进化 | 第15-16页 |
| 1.2.2 同源多倍体植物的减数分裂 | 第16页 |
| 1.2.3 异源多倍体植物的减数分裂 | 第16-17页 |
| 1.3 RNA干扰 | 第17-19页 |
| 1.3.1 RNAi的起源 | 第17页 |
| 1.3.2 RNAi的作用机制 | 第17-18页 |
| 1.3.3 RNAi的应用 | 第18-19页 |
| 1.4 拟南芥研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4.1 拟南芥在遗传学研究中的应用 | 第19页 |
| 1.4.2 拟南芥遗传转化的研究进展 | 第19-20页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第20-22页 |
| 2 RNA干扰载体的构建 | 第22-33页 |
| 2.1 实验所用仪器设备 | 第22页 |
| 2.2 菌种与质粒 | 第22-23页 |
| 2.3 实验主要试剂的配制 | 第23页 |
| 2.4 实验方法 | 第23-29页 |
| 2.4.1 目标片段的选取及引物设计 | 第23页 |
| 2.4.2 目的片段的克隆及载体构建 | 第23-29页 |
| 2.4.3 工程菌的制备和储存 | 第29页 |
| 2.5 结果与分析 | 第29-32页 |
| 2.5.1 干扰片段的测序比对 | 第29-30页 |
| 2.5.2 RNA干扰载体的构建 | 第30-31页 |
| 2.5.3 质粒转化农杆菌的鉴定 | 第31-32页 |
| 2.6 讨论 | 第32-33页 |
| 3 农杆菌介导的floral dip法转化拟南芥 | 第33-40页 |
| 3.1 实验所用仪器设备 | 第33页 |
| 3.2 实验主要试剂的配制 | 第33-34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-37页 |
| 3.3.1 拟南芥的种植 | 第34-35页 |
| 3.3.2 农杆菌的培养及渗透培养基的制备 | 第35-36页 |
| 3.3.3 floral dip法转化处理拟南芥 | 第36页 |
| 3.3.4 确定卡那霉素筛选四倍体拟南芥的最佳浓度 | 第36-37页 |
| 3.4 实验结果 | 第37-38页 |
| 3.4.1 确定筛选四倍体拟南芥的卡那霉素最佳浓度 | 第37-38页 |
| 3.5 讨论 | 第38-40页 |
| 3.5.1 转化拟南芥花蕾的最佳状态 | 第38页 |
| 3.5.2 渗透培养基的成分对转化率的影响 | 第38-39页 |
| 3.5.3 浸染时间对花序状态的影响 | 第39-40页 |
| 4 转基因拟南芥的鉴定 | 第40-48页 |
| 4.1 实验所用主要仪器 | 第40页 |
| 4.2 实验主要试剂的配制 | 第40-41页 |
| 4.3 实验方法 | 第41-44页 |
| 4.3.1 转基因拟南芥的初步鉴定 | 第41页 |
| 4.3.2 PCR鉴定转基因拟南芥 | 第41-42页 |
| 4.3.3 荧光定量PCR检测目的基因表达量 | 第42-44页 |
| 4.4 结果与分析 | 第44-46页 |
| 4.4.1 卡那霉素初步筛选转基因拟南芥 | 第44页 |
| 4.4.2 PCR鉴定转基因拟南芥 | 第44-45页 |
| 4.4.3 荧光定量PCR检测基因表达量 | 第45-46页 |
| 4.4.4 实验条件的优化 | 第46页 |
| 4.5 讨论 | 第46-48页 |
| 5 转基因拟南芥形态学分析 | 第48-57页 |
| 5.1 实验材料 | 第48页 |
| 5.2 实验所需主要试剂的配制 | 第48页 |
| 5.3 实验方法 | 第48-49页 |
| 5.3.1 形态学观察 | 第48-49页 |
| 5.3.2 花粉育性观察 | 第49页 |
| 5.4 结果与分析 | 第49-55页 |
| 5.4.1 转基因植株的形态学特征 | 第49-51页 |
| 5.4.2 转基因植株结实率下降 | 第51-53页 |
| 5.4.3 转基因植株的花粉含量减少 | 第53-54页 |
| 5.4.4 转基因植株花粉形态异常 | 第54-55页 |
| 5.4.5 实验条件优化 | 第55页 |
| 5.5 讨论 | 第55-57页 |
| 6 转基因植株减数分裂过程 | 第57-68页 |
| 6.1 实验所用主要仪器 | 第57页 |
| 6.2 实验方法 | 第57-58页 |
| 6.2.1 减数分裂时期花蕾大小的确定 | 第57-58页 |
| 6.2.2 减数分裂时期染色体制片 | 第58页 |
| 6.3 实验结果 | 第58-66页 |
| 6.3.1 减数分裂时期花蕾大小的确定 | 第58-59页 |
| 6.3.2 优化制片方法 | 第59页 |
| 6.3.3 二倍体转基因植株减数分裂过程观察 | 第59-63页 |
| 6.3.4 同源四倍体转基因植株减数分裂过程观察 | 第63-66页 |
| 6.4 讨论 | 第66-68页 |
| 6.4.1 两种类型的突变体 | 第66-67页 |
| 6.4.2 至少有6个蛋白参与拟南芥DSB的形成 | 第67-68页 |
| 7 结论与展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 个人简介与科研成果 | 第81-82页 |
| 致谢 | 第82页 |