| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| 1.1 苏云金杆菌简介 | 第12页 |
| 1.2 Bt的分布及生物学特征 | 第12-13页 |
| 1.3 Bt的研究历史 | 第13-14页 |
| 1.4 Bt的杀虫毒素的分类 | 第14-15页 |
| 1.5 Bt的cry基因 | 第15-19页 |
| 1.5.1 Bt的cry基因分类 | 第15-17页 |
| 1.5.2 Bt的cry基因型鉴定方法 | 第17-19页 |
| 1.6 Bt杀虫晶体蛋白 | 第19-21页 |
| 1.6.1 Bt杀虫晶体蛋白结构与功能 | 第19-21页 |
| 1.6.2 Bt杀虫蛋白的杀虫机制 | 第21页 |
| 1.7 Bt在防治害虫方面的应用 | 第21-23页 |
| 1.8 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-38页 |
| 2.1 材料与仪器 | 第24-27页 |
| 2.1.1 材料 | 第24-27页 |
| 2.1.2 仪器设备 | 第27页 |
| 2.2 研究方法 | 第27-38页 |
| 2.2.1 土样的采集 | 第27页 |
| 2.2.2 Bt菌株的分离 | 第27页 |
| 2.2.3 菌株的保存 | 第27-28页 |
| 2.2.4 PCR-RFLP鉴定 | 第28-31页 |
| 2.2.5 琼脂糖凝胶电泳 | 第31-32页 |
| 2.2.6 DNA回收 | 第32页 |
| 2.2.7 大肠杆菌菌株感受态细胞的制备 | 第32页 |
| 2.2.8 连接反应 | 第32-33页 |
| 2.2.9 转化反应 | 第33页 |
| 2.2.10 阳性重组子的检测 | 第33页 |
| 2.2.11 序列分析 | 第33-34页 |
| 2.2.12 质粒的提取 | 第34页 |
| 2.2.13 原核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| 2.2.14 蛋白样品的制备及目的基因的诱导表达 | 第35页 |
| 2.2.15 SDS-PAGE分析 | 第35-36页 |
| 2.2.16 Western blot检测 | 第36-37页 |
| 2.2.17 Bt杀虫活性检测 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-54页 |
| 3.1 Bt菌株的分离与伴孢晶体形态观察 | 第38页 |
| 3.2 Bt菌株的基因型鉴定及SDS-PAGE分析 | 第38-43页 |
| 3.2.1 Bt菌株的cry基因型鉴定 | 第38-39页 |
| 3.2.2 Bt菌株杀虫晶体蛋白SDS-PAGE分析 | 第39-43页 |
| 3.3 部分菌株对夜蛾科害虫的杀虫活性检测 | 第43-44页 |
| 3.4 HT2菌株cry全长基因的克隆 | 第44-51页 |
| 3.4.1 cry1Ab36基因的克隆及序列分析 | 第44-48页 |
| 3.4.2 cry2Ab35基因的克隆及序列分析 | 第48-51页 |
| 3.5 cry2Ab35基因的诱导表达 | 第51-54页 |
| 3.5.1 原核表达载体的构建 | 第51-52页 |
| 3.5.2 cry2Ab35基因的诱导表达及验证 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 4.1 苏云金杆菌分布的特点 | 第54页 |
| 4.2 对夜蛾科害虫有高毒力菌株的获得 | 第54-55页 |
| 4.3 基因型鉴定方法的探究 | 第55页 |
| 4.4 HT2菌株相关基因的克隆与表达分析 | 第55-56页 |
| 4.5 研究设想及存在的问题 | 第56-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 附录 | 第69-73页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第73页 |