附件 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6页 |
英文缩略表 | 第10-11页 |
第一章 引言 | 第11-22页 |
1.1 IBDV | 第11-12页 |
1.1.1 IBDV病原学 | 第11-12页 |
1.1.2 IBDV基因组 | 第12页 |
1.2 IBDV基因组编码的蛋白 | 第12-15页 |
1.3 IBDV与宿主细胞相互作用的研究进展 | 第15页 |
1.4 亲环蛋白A(CYPA)的生物学特性 | 第15-19页 |
1.4.1 CypA的结构 | 第16页 |
1.4.2 CypA的功能 | 第16-19页 |
1.5 蛋白质相互作用研究方法 | 第19-20页 |
1.5.1 酵母双杂交 | 第19-20页 |
1.5.2 免疫共沉淀(Co-IP) | 第20页 |
1.5.3 GST pull down | 第20页 |
1.5.4 激光共聚焦 | 第20页 |
1.6 本研究的目的和意义 | 第20-22页 |
第二章 与IBDV VP4互作的宿主蛋白的筛选 | 第22-30页 |
2.1 材料和方法 | 第22-25页 |
2.1.1 质粒、菌株和文库 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂、耗材和仪器 | 第22页 |
2.1.3 引物 | 第22-23页 |
2.1.4 IBDV VP4诱饵载体的构建 | 第23页 |
2.1.5 诱饵载体毒性和自激活的检测 | 第23-24页 |
2.1.6 酵母双杂交筛选 | 第24-25页 |
2.1.7 回转验证 | 第25页 |
2.2 实验结果 | 第25-28页 |
2.2.1 IBDV VP4诱饵载体的构建 | 第25-26页 |
2.2.2 诱饵载体毒性和自激活活性的检测 | 第26-27页 |
2.2.3 酵母双杂交筛选结果 | 第27-28页 |
2.2.4 回转验证结果 | 第28页 |
2.3 讨论 | 第28-30页 |
第三章 CYPA与IBDV VP4相互作用的鉴定 | 第30-40页 |
3.1 材料和方法 | 第30-35页 |
3.1.1 毒株、质粒和细胞 | 第30页 |
3.1.2 主要试剂、耗材和仪器 | 第30-31页 |
3.1.3 引物 | 第31页 |
3.1.4 鸡源CypA的扩增和克隆 | 第31-32页 |
3.1.5 不同物种CypA的同源性比较 | 第32-33页 |
3.1.6 免疫共沉淀(Co-IP)试验 | 第33-34页 |
3.1.7 GST pul down试验 | 第34-35页 |
3.1.8 激光共聚焦试验 | 第35页 |
3.2 实验结果 | 第35-38页 |
3.2.1 鸡源CypA基因的扩增、克隆及序列分析 | 第35-36页 |
3.2.2 免疫共沉淀试验结果 | 第36页 |
3.2.3 GST pul down试验结果 | 第36-37页 |
3.2.4 激光共聚焦试验结果 | 第37-38页 |
3.3 讨论 | 第38-40页 |
第四章 CYPA对IBDV复制影响的研究 | 第40-50页 |
4.1 材料和方法 | 第40-45页 |
4.1.1 毒株、细胞 | 第40页 |
4.1.2 主要试剂、耗材和仪器 | 第40页 |
4.1.3 CypA上调表达对IBDV复制的影响 | 第40-42页 |
4.1.4 CypA下调表达对IBDV复制的影响 | 第42-43页 |
4.1.5 CypA影响IBDV复制的机制研究 | 第43-44页 |
4.1.6 数据分析 | 第44-45页 |
4.2 实验结果 | 第45-48页 |
4.2.1 CypA上调表达抑制IBDV复制 | 第45-46页 |
4.2.2 CypA下调表达促进IBDV复制 | 第46页 |
4.2.3 环孢素A(CsA)不能阻断CypA与VP4相互作用 | 第46-47页 |
4.2.4 CsA促进IBDV蛋白表达 | 第47-48页 |
4.3 讨论 | 第48-50页 |
第五章 全文结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-60页 |
附录 | 第60-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
作者简历 | 第62页 |