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皮质酮通过Mfn2介导线粒体损伤对鸡胚心脏发育的影响

摘要第2-5页
Abstract第5-7页
英文缩略词第8-12页
第一章 前言第12-21页
    1 产前应激第12-14页
        1.1 产前应激对子代的影响第12-13页
        1.2 产前应激影响胎儿发育的危害机制第13-14页
    2 糖皮质激素与心脏代谢疾病第14-15页
    3 线粒体功能异常在心脏疾病中的研究进展第15-18页
        3.1 线粒体与心力衰竭第15-16页
        3.2 线粒体与心肌缺血/再灌注损伤第16-17页
        3.3 线粒体与心肌老化第17页
        3.4 线粒体与心肌肥大第17-18页
    4 Mfn2与心肌线粒体动力学第18-19页
    5 立题依据第19-21页
第二章 皮质酮负荷对鸡胚心脏发育的影响第21-48页
    1 实验材料与方法第21-32页
        1.1 主要材料第21-22页
        1.2 主要仪器第22-23页
        1.3 试剂的配制第23页
        1.4 实验方案第23-24页
        1.5 胚胎发育结果的统计第24页
        1.6 血浆CORT含量的测定第24-25页
        1.7 鸡胚心脏的形态学观察第25-27页
        1.8 Echocardiography第27页
        1.9 WGA染色第27页
        1.10 PH3免疫荧光检测心脏细胞的增殖第27-28页
        1.11 TUNEL染色检测心肌细胞的凋亡第28页
        1.12 Western Blot第28-29页
        1.13 MF20免疫荧光第29-30页
        1.14 心脏肌动蛋白ACTC1基因的测定第30-32页
        1.15 统计学分析第32页
    2 实验结果第32-46页
        2.1 CORT负荷对鸡胚死亡率的影响第32-33页
        2.2 CORT负荷对鸡胚心脏重量的影响第33-34页
        2.3 CORT负荷后对于鸡胚血浆中皮质酮含量变化的影响第34-35页
        2.4 CORT负荷对胚胎心脏形态学的影响第35-38页
        2.5 CORT负荷对鸡胚心脏功能的影响第38-39页
        2.6 CORT负荷对胚胎心脏心肌细胞增殖的影响第39-41页
        2.7 CORT对胚胎心肌细胞凋亡的影响第41-43页
        2.8 CORT负荷对鸡胚心肌细胞体积的影响第43-44页
        2.9 CORT负荷对鸡胚心脏组织肌球蛋白水平的影响第44-45页
        2.10 CORT负荷对鸡胚心脏肌动蛋白ACTC-1 mRNA水平的影响第45-46页
    3 讨论与小结第46-48页
第三章 皮质酮对鸡胚心脏Mfn2介导的线粒体功能的影响第48-60页
    1 实验材料与方法第48-52页
        1.1 主要试剂第48-49页
        1.2 主要仪器第49页
        1.3 试剂的配制第49页
        1.4 实验方案第49-50页
        1.5 鸡胚心肌组织线粒体膜电位 ΔΨm的测定第50页
        1.6 鸡胚心肌组织线粒体内ROS的含量测定[133]第50页
        1.7 鸡胚心脏脂质过氧化水平测定第50页
        1.8 鸡胚心脏抗氧化活性的测定第50-51页
        1.9 鸡胚心脏组织线粒体呼吸链复合物活性的测定第51页
        1.10 鸡胚心脏ATP含量的测定第51页
        1.11 电镜观察心肌组织线粒体形态第51-52页
        1.12 Western Blot检测心肌组织线粒体Mfn2蛋白表达第52页
        1.13 统计学分析第52页
    2 实验结果第52-58页
        2.1 CORT对鸡胚心脏线粒体膜电位的影响第52-53页
        2.2 CORT对胚胎心脏氧化应激水平的影响第53页
        2.3 CORT对鸡胚心脏组织心中抗氧化酶及小分子的影响第53-54页
        2.4 CORT对鸡胚心脏组织线粒体呼吸链复合物活性的影响第54-55页
        2.5 CORT对鸡胚心脏组织中ATP含量的影响第55-57页
        2.6 CORT对胚胎心脏线粒体形态的影响第57-58页
        2.7 CORT对胚胎心脏线粒体Mfn2蛋白表达的影响第58页
    3 小结与讨论第58-60页
第四章 Mfn2介导的线粒体功能在CORT负荷引起H9C2细胞肥大中的作用研究第60-74页
    1 实验材料与方法第60-65页
        1.1 主要材料第60-61页
        1.2 主要仪器第61页
        1.3 试剂的配制第61-62页
        1.4 细胞实验方案第62页
        1.5 鬼笔环肽染色观察H9C2细胞细胞形态第62页
        1.6 Western Blot检测蛋白表达第62-63页
        1.7 H9C2细胞线粒体膜电位检测第63页
        1.8 Annexin V-FITC/PI流式检测H9C2细胞凋亡第63页
        1.9 过表达Mfn2转染实验第63-65页
        1.10 统计学分析第65页
    2 实验结果第65-72页
        2.1 CORT对H9C2细胞形态的影响第65-66页
        2.2 CORT对H9C2细胞中线粒体Mfn2蛋白表达的影响第66-67页
        2.3 CORT对H9C2细胞凋亡的影响第67-69页
        2.4 CORT对H9C2细胞线粒体膜电位的影响第69-70页
        2.5 过表达Mfn2对H9C2细胞肥大及凋亡的影响第70-72页
    3 小结与讨论第72-74页
第五章 结论与展望第74-77页
    1 结论第74-76页
    2 创新点第76页
    3 展望第76-77页
参考文献第77-88页
附录 论文涉及的基因序列第88-93页
致谢第93页

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