摘要 | 第2-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
英文缩略词 | 第8-12页 |
第一章 前言 | 第12-21页 |
1 产前应激 | 第12-14页 |
1.1 产前应激对子代的影响 | 第12-13页 |
1.2 产前应激影响胎儿发育的危害机制 | 第13-14页 |
2 糖皮质激素与心脏代谢疾病 | 第14-15页 |
3 线粒体功能异常在心脏疾病中的研究进展 | 第15-18页 |
3.1 线粒体与心力衰竭 | 第15-16页 |
3.2 线粒体与心肌缺血/再灌注损伤 | 第16-17页 |
3.3 线粒体与心肌老化 | 第17页 |
3.4 线粒体与心肌肥大 | 第17-18页 |
4 Mfn2与心肌线粒体动力学 | 第18-19页 |
5 立题依据 | 第19-21页 |
第二章 皮质酮负荷对鸡胚心脏发育的影响 | 第21-48页 |
1 实验材料与方法 | 第21-32页 |
1.1 主要材料 | 第21-22页 |
1.2 主要仪器 | 第22-23页 |
1.3 试剂的配制 | 第23页 |
1.4 实验方案 | 第23-24页 |
1.5 胚胎发育结果的统计 | 第24页 |
1.6 血浆CORT含量的测定 | 第24-25页 |
1.7 鸡胚心脏的形态学观察 | 第25-27页 |
1.8 Echocardiography | 第27页 |
1.9 WGA染色 | 第27页 |
1.10 PH3免疫荧光检测心脏细胞的增殖 | 第27-28页 |
1.11 TUNEL染色检测心肌细胞的凋亡 | 第28页 |
1.12 Western Blot | 第28-29页 |
1.13 MF20免疫荧光 | 第29-30页 |
1.14 心脏肌动蛋白ACTC1基因的测定 | 第30-32页 |
1.15 统计学分析 | 第32页 |
2 实验结果 | 第32-46页 |
2.1 CORT负荷对鸡胚死亡率的影响 | 第32-33页 |
2.2 CORT负荷对鸡胚心脏重量的影响 | 第33-34页 |
2.3 CORT负荷后对于鸡胚血浆中皮质酮含量变化的影响 | 第34-35页 |
2.4 CORT负荷对胚胎心脏形态学的影响 | 第35-38页 |
2.5 CORT负荷对鸡胚心脏功能的影响 | 第38-39页 |
2.6 CORT负荷对胚胎心脏心肌细胞增殖的影响 | 第39-41页 |
2.7 CORT对胚胎心肌细胞凋亡的影响 | 第41-43页 |
2.8 CORT负荷对鸡胚心肌细胞体积的影响 | 第43-44页 |
2.9 CORT负荷对鸡胚心脏组织肌球蛋白水平的影响 | 第44-45页 |
2.10 CORT负荷对鸡胚心脏肌动蛋白ACTC-1 mRNA水平的影响 | 第45-46页 |
3 讨论与小结 | 第46-48页 |
第三章 皮质酮对鸡胚心脏Mfn2介导的线粒体功能的影响 | 第48-60页 |
1 实验材料与方法 | 第48-52页 |
1.1 主要试剂 | 第48-49页 |
1.2 主要仪器 | 第49页 |
1.3 试剂的配制 | 第49页 |
1.4 实验方案 | 第49-50页 |
1.5 鸡胚心肌组织线粒体膜电位 ΔΨm的测定 | 第50页 |
1.6 鸡胚心肌组织线粒体内ROS的含量测定[133] | 第50页 |
1.7 鸡胚心脏脂质过氧化水平测定 | 第50页 |
1.8 鸡胚心脏抗氧化活性的测定 | 第50-51页 |
1.9 鸡胚心脏组织线粒体呼吸链复合物活性的测定 | 第51页 |
1.10 鸡胚心脏ATP含量的测定 | 第51页 |
1.11 电镜观察心肌组织线粒体形态 | 第51-52页 |
1.12 Western Blot检测心肌组织线粒体Mfn2蛋白表达 | 第52页 |
1.13 统计学分析 | 第52页 |
2 实验结果 | 第52-58页 |
2.1 CORT对鸡胚心脏线粒体膜电位的影响 | 第52-53页 |
2.2 CORT对胚胎心脏氧化应激水平的影响 | 第53页 |
2.3 CORT对鸡胚心脏组织心中抗氧化酶及小分子的影响 | 第53-54页 |
2.4 CORT对鸡胚心脏组织线粒体呼吸链复合物活性的影响 | 第54-55页 |
2.5 CORT对鸡胚心脏组织中ATP含量的影响 | 第55-57页 |
2.6 CORT对胚胎心脏线粒体形态的影响 | 第57-58页 |
2.7 CORT对胚胎心脏线粒体Mfn2蛋白表达的影响 | 第58页 |
3 小结与讨论 | 第58-60页 |
第四章 Mfn2介导的线粒体功能在CORT负荷引起H9C2细胞肥大中的作用研究 | 第60-74页 |
1 实验材料与方法 | 第60-65页 |
1.1 主要材料 | 第60-61页 |
1.2 主要仪器 | 第61页 |
1.3 试剂的配制 | 第61-62页 |
1.4 细胞实验方案 | 第62页 |
1.5 鬼笔环肽染色观察H9C2细胞细胞形态 | 第62页 |
1.6 Western Blot检测蛋白表达 | 第62-63页 |
1.7 H9C2细胞线粒体膜电位检测 | 第63页 |
1.8 Annexin V-FITC/PI流式检测H9C2细胞凋亡 | 第63页 |
1.9 过表达Mfn2转染实验 | 第63-65页 |
1.10 统计学分析 | 第65页 |
2 实验结果 | 第65-72页 |
2.1 CORT对H9C2细胞形态的影响 | 第65-66页 |
2.2 CORT对H9C2细胞中线粒体Mfn2蛋白表达的影响 | 第66-67页 |
2.3 CORT对H9C2细胞凋亡的影响 | 第67-69页 |
2.4 CORT对H9C2细胞线粒体膜电位的影响 | 第69-70页 |
2.5 过表达Mfn2对H9C2细胞肥大及凋亡的影响 | 第70-72页 |
3 小结与讨论 | 第72-74页 |
第五章 结论与展望 | 第74-77页 |
1 结论 | 第74-76页 |
2 创新点 | 第76页 |
3 展望 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-88页 |
附录 论文涉及的基因序列 | 第88-93页 |
致谢 | 第93页 |