摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
第一章 引言 | 第9-19页 |
第一节 肝癌研究进展 | 第9-14页 |
1.1.1 肝癌概述 | 第9-12页 |
1.1.2 乙型肝炎病毒简介 | 第12-13页 |
1.1.3 HBV编码蛋白功能 | 第13-14页 |
第二节 长链非编码RNA研究进展 | 第14-17页 |
1.2.1 LncRNA概述 | 第14-15页 |
1.2.2 LncRNA功能简介 | 第15-17页 |
第三节 LNCRNA与肝癌 | 第17-19页 |
第二章 材料与方法 | 第19-34页 |
第一节 实验材料 | 第19-21页 |
2.1.1 菌种、细胞系及质粒 | 第19页 |
2.1.2 抗体及主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 仪器设备 | 第20-21页 |
第二节 研究方法 | 第21-34页 |
2.2.1 基因克隆 | 第21-25页 |
2.2.2 细胞传代、冻存与复苏 | 第25-26页 |
2.2.3 细胞转染 | 第26-27页 |
2.2.4 蛋白浓度的测定 | 第27页 |
2.2.5 SDS-PAGE蛋白质凝胶电泳 | 第27-30页 |
2.2.6 荧光素酶报告基因的检测 | 第30页 |
2.2.7 实时定量PCR (RT-PCR) | 第30-32页 |
2.2.8 CCK8检测细胞增殖的方法 | 第32-33页 |
2.2.9 Caspase3/7 assay | 第33-34页 |
第三章 实验结果 | 第34-43页 |
3.1 乙型肝炎病毒相关LNCRNA-DR4的筛选/鉴定 | 第34-35页 |
3.2 HBV对LNCRNA-DR4表达的调控 | 第35-39页 |
3.2.1 HBx对LncRNA-DR4表达的影响 | 第35-36页 |
3.2.2 LncRNA-DR4启动子的预测和鉴定 | 第36-37页 |
3.2.3 HBx对LncRNA-DR4启动子活性的影响 | 第37页 |
3.2.4 p53蛋白与LncRNA-DR4表达的负相关性 | 第37-38页 |
3.2.5 HBx蛋白通过p53蛋白调控LncRNA-DR4表达 | 第38-39页 |
3.3 LNCRNA-DR4的生物学功能 | 第39-43页 |
3.3.1 LncRNA-DR4核质分布情况 | 第39-40页 |
3.3.2 LncRNA-DR4稳定过表达细胞系构建 | 第40页 |
3.3.3 外源表达LncRNA-DR4对HepG2细胞增殖和凋亡的影响 | 第40-41页 |
3.3.4 外源表达表达LncRNA-DR4对HepG2细胞周期的影响 | 第41-43页 |
第四章 实验结论与讨论 | 第43-46页 |
4.1 实验结论 | 第43-44页 |
4.2 讨论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-52页 |
附表 | 第52-57页 |
1 常用试剂 | 第52-53页 |
2 细胞培养所需试剂 | 第53-54页 |
3 蛋白检测相关试剂 | 第54-57页 |
致谢 | 第57-59页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第59页 |