摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章文献综述 | 第11-18页 |
1.1 油菜素内酯的发现 | 第11页 |
1.2 BRs调控植物生长发育 | 第11-12页 |
1.2.1 BRs调控植物营养生长 | 第11-12页 |
1.2.2 BRs调控植物生殖生长 | 第12页 |
1.3 BRs信号转导路径和信号交联 | 第12-14页 |
1.3.1 BRs信号转导路径 | 第12-13页 |
1.3.2 BRs信号和其它信号的交联 | 第13-14页 |
1.4 BRs受体BRI1研究进展 | 第14-15页 |
1.4.1 类受体激酶BRI1是BRs的受体 | 第14页 |
1.4.2 BRI1的结构组成和功能特点 | 第14-15页 |
1.4.3 作物中BRI1研究进展 | 第15页 |
1.5 马铃薯块茎生长发育与植物激素 | 第15-16页 |
1.6 马铃薯块茎特异表达启动子的应用 | 第16-17页 |
1.7 本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
第二章马铃薯StBRI1蛋白特性分析 | 第18-28页 |
2.1 材料与方法 | 第18-24页 |
2.1.1 材料,菌株和质粒 | 第18页 |
2.1.2 试剂与仪器 | 第18页 |
2.1.3 生物信息学分析方法 | 第18页 |
2.1.4 马铃薯各组织RNA提取和反转录 | 第18-19页 |
2.1.5 载体构建 | 第19-22页 |
2.1.6 StBRI1体外磷酸化活性检测 | 第22页 |
2.1.7 StBRI1亚细胞定位 | 第22-23页 |
2.1.8 半定量分析StBRI1组织表达特点 | 第23-24页 |
2.2 结果与分析 | 第24-28页 |
2.2.1 基因克隆及载体构建 | 第24-25页 |
2.2.2 生物信息学分析 | 第25页 |
2.2.3 体外磷酸化活性检测 | 第25-26页 |
2.2.4 亚细胞定位 | 第26-27页 |
2.2.5 组织表达特点 | 第27-28页 |
第三章马铃薯StBRI1的活体功能验证 | 第28-33页 |
3.1 材料与方法 | 第28-30页 |
3.1.1 材料,菌株和质粒 | 第28页 |
3.1.2 试剂,培养基和仪器 | 第28页 |
3.1.3 拟南芥遗传转化 | 第28-29页 |
3.1.4 植物蛋白提取 | 第29页 |
3.1.5 蛋白胶考马斯染色 | 第29页 |
3.1.6 Western blot检测StBRI1表达量 | 第29页 |
3.1.7 根长下胚轴敏感性检测 | 第29-30页 |
3.1.8 荧光定量PCR | 第30页 |
3.2 结果与分析 | 第30-33页 |
3.2.1 马铃薯StBRI1恢复bri1-5 表型 | 第30-31页 |
3.2.2 马铃薯StBRI1恢复bri1-5 中BR信号通路 | 第31-33页 |
第四章马铃薯StBRI1全株沉默和块茎特异性沉默载体构建 | 第33-40页 |
4.1 材料与方法 | 第33-38页 |
4.1.1 材料,质粒和菌株 | 第33页 |
4.1.2 酶,生化试剂和仪器 | 第33页 |
4.1.3 PCR引物设计 | 第33-34页 |
4.1.4 马铃薯叶片DNA提取 | 第34页 |
4.1.5 马铃薯块茎特异启动子B33的扩增和中间载体构建 | 第34页 |
4.1.6 马铃薯StBRI1 RNAi片段扩增和中间载体构建 | 第34-36页 |
4.1.7 全株沉默载体构建 | 第36-37页 |
4.1.8 块茎特异性沉默载体构建 | 第37-38页 |
4.2 结果与分析 | 第38-40页 |
4.2.1 B33启动子和RNAi片段的扩增 | 第38页 |
4.2.2 中间载体酶切鉴定 | 第38-39页 |
4.2.3 全株沉默和块茎特异性沉默载体酶切鉴定 | 第39-40页 |
第五章农杆菌介导的StBRI1 RNAi载体转化马铃薯 | 第40-45页 |
5.1 材料与方法 | 第40-42页 |
5.1.1 植物材料,菌株和质粒 | 第40页 |
5.1.2 试剂,培养基与仪器 | 第40页 |
5.1.3 电击转化GV3101 | 第40-41页 |
5.1.4 马铃薯RNAi沉默系的获得 | 第41页 |
5.1.5 DNA水平检测马铃薯RNAi沉默系 | 第41-42页 |
5.1.6 RNA水平检测马铃薯RNAi沉默系 | 第42页 |
5.2 结果与分析 | 第42-45页 |
5.2.1 马铃薯RNAi沉默系的获得 | 第42-43页 |
5.2.2 马铃薯RNAi沉默系的外源片段插入检测 | 第43-44页 |
5.2.3 马铃薯RNAi沉默系的StBRI1表达量检测 | 第44-45页 |
第六章马铃薯StBRI1沉默植株表型分析 | 第45-51页 |
6.1 材料与方法 | 第45-46页 |
6.1.1 植物材料 | 第45页 |
6.1.2 试剂与仪器 | 第45页 |
6.1.3 地上部分生长指标测定 | 第45页 |
6.1.4 马铃薯块茎产量测定 | 第45页 |
6.1.5 马铃薯块茎淀粉和可溶性糖含量测定 | 第45页 |
6.1.6 数据处理和分析 | 第45-46页 |
6.2 结果与分析 | 第46-51页 |
6.2.1 马铃薯StBRI1沉默植株地上部分表型 | 第46-49页 |
6.2.2 马铃薯StBRI1沉默植株块茎产量 | 第49-50页 |
6.2.3 马铃薯StBRI1沉默植株块茎淀粉和可溶性糖含量 | 第50-51页 |
第七章讨论与结论 | 第51-54页 |
7.1 讨论 | 第51-52页 |
7.2 结论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
作者简介 | 第61页 |