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马铃薯油菜素内酯受体StBRI1的基因沉默和功能研究

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第一章文献综述第11-18页
    1.1 油菜素内酯的发现第11页
    1.2 BRs调控植物生长发育第11-12页
        1.2.1 BRs调控植物营养生长第11-12页
        1.2.2 BRs调控植物生殖生长第12页
    1.3 BRs信号转导路径和信号交联第12-14页
        1.3.1 BRs信号转导路径第12-13页
        1.3.2 BRs信号和其它信号的交联第13-14页
    1.4 BRs受体BRI1研究进展第14-15页
        1.4.1 类受体激酶BRI1是BRs的受体第14页
        1.4.2 BRI1的结构组成和功能特点第14-15页
        1.4.3 作物中BRI1研究进展第15页
    1.5 马铃薯块茎生长发育与植物激素第15-16页
    1.6 马铃薯块茎特异表达启动子的应用第16-17页
    1.7 本研究的目的和意义第17-18页
第二章马铃薯StBRI1蛋白特性分析第18-28页
    2.1 材料与方法第18-24页
        2.1.1 材料,菌株和质粒第18页
        2.1.2 试剂与仪器第18页
        2.1.3 生物信息学分析方法第18页
        2.1.4 马铃薯各组织RNA提取和反转录第18-19页
        2.1.5 载体构建第19-22页
        2.1.6 StBRI1体外磷酸化活性检测第22页
        2.1.7 StBRI1亚细胞定位第22-23页
        2.1.8 半定量分析StBRI1组织表达特点第23-24页
    2.2 结果与分析第24-28页
        2.2.1 基因克隆及载体构建第24-25页
        2.2.2 生物信息学分析第25页
        2.2.3 体外磷酸化活性检测第25-26页
        2.2.4 亚细胞定位第26-27页
        2.2.5 组织表达特点第27-28页
第三章马铃薯StBRI1的活体功能验证第28-33页
    3.1 材料与方法第28-30页
        3.1.1 材料,菌株和质粒第28页
        3.1.2 试剂,培养基和仪器第28页
        3.1.3 拟南芥遗传转化第28-29页
        3.1.4 植物蛋白提取第29页
        3.1.5 蛋白胶考马斯染色第29页
        3.1.6 Western blot检测StBRI1表达量第29页
        3.1.7 根长下胚轴敏感性检测第29-30页
        3.1.8 荧光定量PCR第30页
    3.2 结果与分析第30-33页
        3.2.1 马铃薯StBRI1恢复bri1-5 表型第30-31页
        3.2.2 马铃薯StBRI1恢复bri1-5 中BR信号通路第31-33页
第四章马铃薯StBRI1全株沉默和块茎特异性沉默载体构建第33-40页
    4.1 材料与方法第33-38页
        4.1.1 材料,质粒和菌株第33页
        4.1.2 酶,生化试剂和仪器第33页
        4.1.3 PCR引物设计第33-34页
        4.1.4 马铃薯叶片DNA提取第34页
        4.1.5 马铃薯块茎特异启动子B33的扩增和中间载体构建第34页
        4.1.6 马铃薯StBRI1 RNAi片段扩增和中间载体构建第34-36页
        4.1.7 全株沉默载体构建第36-37页
        4.1.8 块茎特异性沉默载体构建第37-38页
    4.2 结果与分析第38-40页
        4.2.1 B33启动子和RNAi片段的扩增第38页
        4.2.2 中间载体酶切鉴定第38-39页
        4.2.3 全株沉默和块茎特异性沉默载体酶切鉴定第39-40页
第五章农杆菌介导的StBRI1 RNAi载体转化马铃薯第40-45页
    5.1 材料与方法第40-42页
        5.1.1 植物材料,菌株和质粒第40页
        5.1.2 试剂,培养基与仪器第40页
        5.1.3 电击转化GV3101第40-41页
        5.1.4 马铃薯RNAi沉默系的获得第41页
        5.1.5 DNA水平检测马铃薯RNAi沉默系第41-42页
        5.1.6 RNA水平检测马铃薯RNAi沉默系第42页
    5.2 结果与分析第42-45页
        5.2.1 马铃薯RNAi沉默系的获得第42-43页
        5.2.2 马铃薯RNAi沉默系的外源片段插入检测第43-44页
        5.2.3 马铃薯RNAi沉默系的StBRI1表达量检测第44-45页
第六章马铃薯StBRI1沉默植株表型分析第45-51页
    6.1 材料与方法第45-46页
        6.1.1 植物材料第45页
        6.1.2 试剂与仪器第45页
        6.1.3 地上部分生长指标测定第45页
        6.1.4 马铃薯块茎产量测定第45页
        6.1.5 马铃薯块茎淀粉和可溶性糖含量测定第45页
        6.1.6 数据处理和分析第45-46页
    6.2 结果与分析第46-51页
        6.2.1 马铃薯StBRI1沉默植株地上部分表型第46-49页
        6.2.2 马铃薯StBRI1沉默植株块茎产量第49-50页
        6.2.3 马铃薯StBRI1沉默植株块茎淀粉和可溶性糖含量第50-51页
第七章讨论与结论第51-54页
    7.1 讨论第51-52页
    7.2 结论第52-54页
参考文献第54-60页
致谢第60-61页
作者简介第61页

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