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PTEN协同NHERF-1抑制肿瘤微环境中M2型巨噬细胞的转化及机制

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
第一章 前言第14-24页
    第一节 肿瘤微环境与肿瘤相关巨噬细胞第14-16页
        1.1.1 肿瘤微环境第14页
        1.1.2 巨噬细胞的分类及功能第14-16页
    第二节 肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的形成因素第16-18页
        1.2.1 细胞趋化因子2与TAMs的关系第16-17页
        1.2.2 血管内皮生长因子-A与TAMs的关系第17-18页
    第三节 抑癌基因pten,NHERF-1与相关PI3K/AKT信号通路第18-20页
        1.3.1 PTEN简介及与PI3K/AKT信号通路的关系第18-19页
        1.3.2 PTEN与NHERF-1的关系第19-20页
    第四节 我们的实验第20-24页
        1.4.1 主要实验方法第20-21页
        1.4.2 实验思路第21-24页
第二章 材料和方法第24-46页
    第一节 实验仪器、材料和试剂第24-27页
        2.1.1 主要实验仪器第24页
        2.1.2 实验细胞第24-25页
        2.1.3 主要试剂第25-27页
    第二节 实验主要溶液的配制第27-29页
        2.2.1 磷酸盐缓冲液(PBS)第27页
        2.2.2 5×TBE缓冲液第27页
        2.2.3 5×电泳缓冲液(5×rushing buffer)第27-28页
        2.2.4 10×TBST缓冲液第28页
        2.2.5 半干转膜液第28页
        2.2.6 10%SDS溶液第28页
        2.2.7 10%过硫酸铵溶液(10% AP)第28-29页
        2.2.8 柠檬酸抗原修复液第29页
        2.2.9 RPMI-1640完全培养基第29页
    第三节 实验方法第29-46页
        2.3.1 细胞培养第29-32页
        2.3.2 细胞刺激实验第32-33页
        2.3.3 细胞转染第33-34页
        2.3.4 RT-PCR第34-36页
        2.3.5 实时定量PCR(realtime PCR,qPCR)第36-38页
        2.3.6 ELISA检测第38页
        2.3.7 Western Blot第38-41页
        2.3.8 细胞迁移实验第41-42页
        2.3.9 免疫组化和免疫荧光第42-44页
        2.3.10 流式细胞术检测第44页
        2.3.11 统计学分析第44-46页
第三章 结果第46-60页
    第一节 PTEN在巨噬细胞中有表达第46-49页
    第二节 驯化后的RAW264.7细胞沉默PTEN后能够增加CCL2的产生并且该上清能够促进4T1细胞的转移第49-51页
    第三节 在驯化后的RAW264.7细胞和U937细胞中沉默PTEN的会增加VEGF-A的表达第51-53页
    第四节 NHERF-1招募PTEN到细胞膜上并与之发挥协同作用第53-57页
    第五节 NHERF-1协同PTEN抑制巨噬细胞向M2型转化,CCL2可以削减此抑制作用第57-60页
第四章 讨论第60-65页
第五章 结论第65-66页
参考文献第66-70页
致谢第70-71页
个人简历 在学期间发表的学术论文与科研成果第71-72页
附录A (研究论文)第72-95页

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