摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 前言 | 第14-24页 |
第一节 肿瘤微环境与肿瘤相关巨噬细胞 | 第14-16页 |
1.1.1 肿瘤微环境 | 第14页 |
1.1.2 巨噬细胞的分类及功能 | 第14-16页 |
第二节 肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)的形成因素 | 第16-18页 |
1.2.1 细胞趋化因子2与TAMs的关系 | 第16-17页 |
1.2.2 血管内皮生长因子-A与TAMs的关系 | 第17-18页 |
第三节 抑癌基因pten,NHERF-1与相关PI3K/AKT信号通路 | 第18-20页 |
1.3.1 PTEN简介及与PI3K/AKT信号通路的关系 | 第18-19页 |
1.3.2 PTEN与NHERF-1的关系 | 第19-20页 |
第四节 我们的实验 | 第20-24页 |
1.4.1 主要实验方法 | 第20-21页 |
1.4.2 实验思路 | 第21-24页 |
第二章 材料和方法 | 第24-46页 |
第一节 实验仪器、材料和试剂 | 第24-27页 |
2.1.1 主要实验仪器 | 第24页 |
2.1.2 实验细胞 | 第24-25页 |
2.1.3 主要试剂 | 第25-27页 |
第二节 实验主要溶液的配制 | 第27-29页 |
2.2.1 磷酸盐缓冲液(PBS) | 第27页 |
2.2.2 5×TBE缓冲液 | 第27页 |
2.2.3 5×电泳缓冲液(5×rushing buffer) | 第27-28页 |
2.2.4 10×TBST缓冲液 | 第28页 |
2.2.5 半干转膜液 | 第28页 |
2.2.6 10%SDS溶液 | 第28页 |
2.2.7 10%过硫酸铵溶液(10% AP) | 第28-29页 |
2.2.8 柠檬酸抗原修复液 | 第29页 |
2.2.9 RPMI-1640完全培养基 | 第29页 |
第三节 实验方法 | 第29-46页 |
2.3.1 细胞培养 | 第29-32页 |
2.3.2 细胞刺激实验 | 第32-33页 |
2.3.3 细胞转染 | 第33-34页 |
2.3.4 RT-PCR | 第34-36页 |
2.3.5 实时定量PCR(realtime PCR,qPCR) | 第36-38页 |
2.3.6 ELISA检测 | 第38页 |
2.3.7 Western Blot | 第38-41页 |
2.3.8 细胞迁移实验 | 第41-42页 |
2.3.9 免疫组化和免疫荧光 | 第42-44页 |
2.3.10 流式细胞术检测 | 第44页 |
2.3.11 统计学分析 | 第44-46页 |
第三章 结果 | 第46-60页 |
第一节 PTEN在巨噬细胞中有表达 | 第46-49页 |
第二节 驯化后的RAW264.7细胞沉默PTEN后能够增加CCL2的产生并且该上清能够促进4T1细胞的转移 | 第49-51页 |
第三节 在驯化后的RAW264.7细胞和U937细胞中沉默PTEN的会增加VEGF-A的表达 | 第51-53页 |
第四节 NHERF-1招募PTEN到细胞膜上并与之发挥协同作用 | 第53-57页 |
第五节 NHERF-1协同PTEN抑制巨噬细胞向M2型转化,CCL2可以削减此抑制作用 | 第57-60页 |
第四章 讨论 | 第60-65页 |
第五章 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-70页 |
致谢 | 第70-71页 |
个人简历 在学期间发表的学术论文与科研成果 | 第71-72页 |
附录A (研究论文) | 第72-95页 |