摘要 | 第5-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-32页 |
1.1 研究背景 | 第12-13页 |
1.2 循环肿瘤细胞 | 第13-17页 |
1.2.1 循环肿瘤细胞检测 | 第13-14页 |
1.2.2 CTCs富集方法 | 第14页 |
1.2.3 CTC物理检测方法 | 第14-15页 |
1.2.4 CTC生物学检测方法 | 第15页 |
1.2.5 CTC微流检测设备 | 第15-16页 |
1.2.6 磁性细胞分选技术 | 第16-17页 |
1.3 CTCs检测标志物的选择 | 第17-19页 |
1.3.1 癌细胞间质转化 | 第17-18页 |
1.3.2 核酸标志物检测 | 第18-19页 |
1.4 癌细胞内基因水平变化 | 第19-22页 |
1.4.1 DNA甲基化与癌症 | 第19页 |
1.4.2 DNA甲基化修饰 | 第19-20页 |
1.4.3 与癌症相关DNA甲基化标志物 | 第20-21页 |
1.4.4 DNA甲基化标志物的癌症检测 | 第21-22页 |
1.5 本课题的提出 | 第22-24页 |
参考文献 | 第24-32页 |
第二章 基于DNA甲基化特异性位点区分癌症种类、以及同种癌症分型 | 第32-48页 |
2.1 引言 | 第32-33页 |
2.1.1 研究背景 | 第32页 |
2.1.2 DNA甲基化检测方法 | 第32-33页 |
2.2 实验材料 | 第33-37页 |
2.2.1 材料及试剂 | 第33-37页 |
2.2.2 细胞 | 第37页 |
2.3 实验方法 | 第37-40页 |
2.3.1 细胞培养 | 第37页 |
2.3.2 各个癌细胞系、正常人全血样本全基因组DNA提取 | 第37-38页 |
2.3.3 亚硫酸氢钠处理全基因组DNA | 第38-39页 |
2.3.4 纯化DNA | 第39页 |
2.3.5 DNA脱磺化 | 第39页 |
2.3.6 甲基化特异性PCR(MSP) | 第39页 |
2.3.7 琼脂糖凝胶电泳 | 第39-40页 |
2.4 实验结果与讨论 | 第40-44页 |
2.4.1 实验中所检测标靶基因简介 | 第40-41页 |
2.4.2 不同种类癌细胞鉴定、分型 | 第41-44页 |
2.5 本章小结 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-48页 |
第三章 基于DNA甲基化特异性位点定量检测血液中的循环肿瘤细胞 | 第48-59页 |
3.1 研究背景 | 第48-49页 |
3.2 实验材料 | 第49页 |
3.2.1 材料 | 第49页 |
3.2.2 主要实验仪器和试剂 | 第49页 |
3.3 实验方法 | 第49-50页 |
3.3.1 模拟样本制作 | 第49页 |
3.3.2 PCR产物纯化 | 第49-50页 |
3.3.3 微阵列芯片检测PCR产物 | 第50页 |
3.4 实验结果 | 第50-54页 |
3.4.1 三种癌细胞模拟样本的检测 | 第50-51页 |
3.4.2 MCF-7 细胞系模拟样本检测 | 第51-52页 |
3.4.3 PC-3 细胞系模拟样本检测 | 第52-53页 |
3.4.4 Hela-S细胞系模拟样本检测 | 第53-54页 |
3.4.5 DNA提取效率考证 | 第54页 |
3.5 本章小结 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-59页 |
第四章 总结与展望 | 第59-61页 |
攻读硕士学位期间发表论文目录 | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |