| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第13-20页 |
| 1.1 寻找新的抗多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)药物是临床亟待解决的重要课题 | 第13页 |
| 1.2 组蛋白去乙酰化酶抑制剂具有抗肿瘤作用 | 第13-14页 |
| 1.3 自噬与肿瘤发生发展及其治疗密切相关 | 第14-18页 |
| 1.4 调节细胞自噬的主要信号通路 | 第18页 |
| 1.5 论文研究目的与总体设计 | 第18-20页 |
| 第二章 大自噬对HDACIs抗MM作用的影响及其机理研究 | 第20-39页 |
| 1 实验材料 | 第20-25页 |
| 1.1 细胞与动物 | 第20页 |
| 1.2 主要仪器 | 第20-21页 |
| 1.3 主要试剂 | 第21-25页 |
| 1.3.1 细胞培养用试剂 | 第21-22页 |
| 1.3.2 Western Blot试剂 | 第22-24页 |
| 1.3.3 激光共聚焦检测RFP-LC3相关试剂 | 第24-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-30页 |
| 2.1 细胞培养 | 第25页 |
| 2.2 Western Blot检测相关蛋白的表达变化 | 第25-28页 |
| 2.3 RFP-LC3Ⅱ质粒转染 | 第28-29页 |
| 2.4 细胞毒性测试(MTS) | 第29页 |
| 2.5 数据处理 | 第29-30页 |
| 3 实验结果 | 第30-36页 |
| 3.1 SAHA对自噬指标LC3Ⅱ及其底物p62表达的影响 | 第30-31页 |
| 3.2 SAHA对自噬指标RFP-LC3Ⅱ形成的影响 | 第31-32页 |
| 3.3 SAHA不同浓度对AKT/mTORC1信号通路的影响 | 第32-33页 |
| 3.4 SAHA不同浓度对MM细胞增殖能力的影响 | 第33-34页 |
| 3.5 SAHA不同浓度对MM细胞凋亡的影响 | 第34-35页 |
| 3.6 抑制大自噬对SAHA抗MM作用的影响 | 第35页 |
| 3.7 抑制大自噬对SAHA促进MM细胞凋亡的影响 | 第35-36页 |
| 4 讨论与总结 | 第36-39页 |
| 第三章 分子伴侣自噬对HDACIs抗MM作用的影响及其机理研究 | 第39-46页 |
| 1 实验材料 | 第39-40页 |
| 1.1 药物与试剂 | 第39-40页 |
| 1.2 细胞株及培养液、试剂耗材和仪器等 | 第40页 |
| 1.3 LAMP2A小发夹RNA(small hairpin RNA,shRNA)慢病毒载体 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-41页 |
| 2.1 LAMP2A RNAi的MM.1S多发性骨髓瘤细胞株的构建 | 第40页 |
| 2.2 LAMP2A的表达的检测 | 第40页 |
| 2.3 MTT法检测敲除LAMP2A对MM.1S细胞增殖的影响 | 第40-41页 |
| 2.4 MTT法检测敲除LAMP2A对SAHA抗MM作用的影响 | 第41页 |
| 2.5 乳酸检测 | 第41页 |
| 2.6 统计学分析 | 第41页 |
| 3 实验结果 | 第41-44页 |
| 3.1 LAMP2A-shRNA慢病毒转染效果 | 第41-42页 |
| 3.2 不同shRNA对LAMP2A表达的抑制作用 | 第42页 |
| 3.3 敲除LAMP2A对MM.1S细胞增殖的影响 | 第42-43页 |
| 3.4 敲除LAMP2A对SAHA抗MM作用的影响 | 第43页 |
| 3.5 敲除LAMP2A对MM.1S细胞乳酸生成的影响 | 第43-44页 |
| 4 讨论与总结 | 第44-46页 |
| 第四章 抗多发性骨髓瘤药物的筛选及评估 | 第46-55页 |
| 1 实验材料 | 第46-47页 |
| 1.1 试剂 | 第46-47页 |
| 1.2 实验耗材 | 第47页 |
| 1.3 仪器 | 第47页 |
| 1.4 细胞株及其培养条件 | 第47页 |
| 2 实验方法 | 第47-48页 |
| 2.1 细胞毒性测试(MTS) | 第47-48页 |
| 2.2 组织匀浆及蛋白浓度测定 | 第48页 |
| 2.3 Western blot实验 | 第48页 |
| 2.4 数据处理 | 第48页 |
| 3 实验结果 | 第48-52页 |
| 3.1 MTS细胞水平筛选活性化合物 | 第48-49页 |
| 3.2 候选化合物分子对α微管蛋白(α-tubulin)和组蛋白H3(histone H3)乙酰化水平的影响 | 第49-50页 |
| 3.3 CFH367-C对SCID小鼠人多发性骨髓瘤MM.1S瘤组织乙酰化的作用评价 | 第50-52页 |
| 4 讨论与总结 | 第52-55页 |
| 全文总结 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-60页 |
| 附录 | 第60-61页 |
| 缩略语检索表 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62页 |
