| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 综述部分 | 第11-26页 |
| 1 胰岛素 | 第11-16页 |
| 1.1 胰岛素的结构 | 第11-13页 |
| 1.2 胰岛素的合成、释放、生理功能和降解 | 第13-16页 |
| 2 胰岛素产品的发展 | 第16-23页 |
| 2.1 动物胰岛素 | 第16-17页 |
| 2.2 人胰岛素 | 第17-18页 |
| 2.3 胰岛素类似物 | 第18-22页 |
| 2.4 我国胰岛素产品发展现状 | 第22-23页 |
| 3 SUMO-T7克隆表达系统 | 第23-24页 |
| 4 本实验的创新点 | 第24-26页 |
| 实验部分 | 第26-57页 |
| 1 材料与仪器 | 第26-29页 |
| 1.1 质粒构建所用材料及试剂 | 第26页 |
| 1.2 培养基成分 | 第26-27页 |
| 1.3 蛋白纯化所用材料及试剂 | 第27页 |
| 1.4 实验所用仪器 | 第27-28页 |
| 1.5 实验所用试剂及缓冲体系 | 第28-29页 |
| 2 实验方法 | 第29-38页 |
| 2.1 质粒ppSUMO-MIP的构建及鉴定 | 第29-32页 |
| 2.2 SUMO-MIP融合蛋白的诱导表达 | 第32-34页 |
| 2.3 细胞收集及破菌 | 第34页 |
| 2.4 MIP融合蛋白的亲和纯化 | 第34-35页 |
| 2.5 蛋白缓冲液置换及浓缩 | 第35页 |
| 2.6 离子交换纯化MIP融合蛋白 | 第35-36页 |
| 2.7 分子筛纯化MIP融合蛋白 | 第36页 |
| 2.8 SUMO蛋白酶（ULP1酶）的制备 | 第36-37页 |
| 2.9 ULP1蛋白酶酶切SUMO-MIP融合蛋白 | 第37页 |
| 2.10 Bradford法测定蛋白质浓度 | 第37页 |
| 2.11 Western blot | 第37-38页 |
| 3 实验结果与讨论 | 第38-55页 |
| 3.1 质粒ppSUMO-MIP的构建 | 第38-40页 |
| 3.2 SUMO-MIP融合蛋白的诱导表达 | 第40-46页 |
| 3.3 SUMO-MIP融合蛋白的纯化 | 第46页 |
| 3.4 SUMO-MIP融合蛋白亲和条件的优化 | 第46-47页 |
| 3.5 缓冲液替换及融合蛋白的浓缩 | 第47-48页 |
| 3.6 离子交换纯化SUMO-MIP融合蛋白 | 第48-52页 |
| 3.7 分子筛纯化MIP融合蛋白 | 第52-53页 |
| 3.8 ULP1蛋白酶酶切SUMO-MIP融合蛋白 | 第53-54页 |
| 3.9 融合蛋白蛋白浓度以及得率计算 | 第54-55页 |
| 4 结论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-62页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |