致谢 | 第6-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-14页 |
缩略语表 | 第17-18页 |
第一章 文献综述 | 第18-34页 |
1.1 植物磷营养的意义 | 第18-20页 |
1.2 植物磷酸盐稳态的分子调控 | 第20-22页 |
1.3 植物缺磷条件下的生理生化反应 | 第22-24页 |
1.3.1 缺磷植物的形态适应 | 第22-23页 |
1.3.2 缺磷植物的生化适应 | 第23-24页 |
1.3.3 组织衰老过程磷的代谢与转运 | 第24页 |
1.4 植物紫色酸性磷酸酶 | 第24-28页 |
1.4.1 植物紫色酸性磷酸酶 | 第24-25页 |
1.4.2 拟南芥紫色酸性磷酸酶 | 第25-27页 |
1.4.3 水稻紫色酸性磷酸酶研究 | 第27-28页 |
1.5 转基因磷高效育种的研究现状 | 第28-32页 |
1.5.1 磷酸盐转运体 | 第28-29页 |
1.5.2 关键转录因子和其他磷调控蛋白 | 第29-30页 |
1.5.3 有机酸合成和转运 | 第30-31页 |
1.5.4 磷酸酶的分泌 | 第31-32页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第32-34页 |
第二章 水稻紫色酸性磷酸酶基因OsPAP26的功能研究 | 第34-54页 |
2.1 材料与方法 | 第35-39页 |
2.1.1 植物材料与生长条件 | 第35页 |
2.1.2 RNA提取与半定量PCR | 第35-36页 |
2.1.3 超表达和RNA干涉(RNAi)载体的构建 | 第36页 |
2.1.4 农杆菌介导的水稻转基因 | 第36-37页 |
2.1.5 组织中总磷和有效磷含量的测定 | 第37页 |
2.1.6 植物组织及溶液中蛋白的抽提 | 第37页 |
2.1.7 蛋白免疫沉淀检测(Western blot) | 第37-38页 |
2.1.8 BCIP染色及酸性磷酸酶活性分析 | 第38页 |
2.1.9 活性胶染色 | 第38-39页 |
2.1.10 Pro_(OsPAP26)::GUS组织染色 | 第39页 |
2.2 结果与分析 | 第39-52页 |
2.2.1 OsPAP26的表达调控 | 第39-42页 |
2.2.2 OsPAP26转基因植株的培育与鉴定 | 第42-43页 |
2.2.3 OsPAP26在活性胶染色中的特征条带 | 第43-44页 |
2.2.4 超表达或抑制表达OsPAP26显著地改变了体内和分泌型酸性磷酸酶活性 | 第44-48页 |
2.2.5 超表达OsPAP26增加体外有机磷释放和利用效率 | 第48-49页 |
2.2.6 OsPAP26影响水稻叶片衰老过程中磷的再利用 | 第49-50页 |
2.2.7 OsPAP26影响种子的萌发 | 第50-51页 |
2.2.8 超表达OsPAP26的转基因水稻农艺性状改善 | 第51-52页 |
2.3 讨论 | 第52-54页 |
第三章 玉米紫色酸性磷酸酶基因家族分析 | 第54-62页 |
3.1 材料与方法 | 第54-56页 |
3.1.1 玉米材料 | 第54页 |
3.1.2 玉米PAP生物信息学鉴定 | 第54-55页 |
3.1.3 进化分析 | 第55页 |
3.1.4 玉米培养条件 | 第55-56页 |
3.1.5 RNA的抽提,半定量和定量PCR分析 | 第56页 |
3.1.6 植物有效磷含量的测定 | 第56页 |
3.1.7 植物组织蛋白抽提和酸性磷酸酶活性分析 | 第56页 |
3.2 结果与分析 | 第56-60页 |
3.2.1 玉米PAP基因生物信息学分析 | 第56-58页 |
3.2.2 缺磷诱导表达的PAP基因受到ZmPHR1的调控 | 第58-59页 |
3.2.3 ZmPAPs基因对缺磷条件的响应 | 第59页 |
3.2.4 玉米植株缺磷时地上与根部酸性磷酸酶活性提高 | 第59-60页 |
3.3 讨论 | 第60-62页 |
第四章 超表达ZmPAP10a和ZmPAP26提高了玉米磷利用效率 | 第62-74页 |
4.1 材料与方法 | 第62-64页 |
4.1.1 玉米材料 | 第62页 |
4.1.2 玉米培养条件 | 第62-63页 |
4.1.3 RNA的抽提,纯化和定量PCR | 第63页 |
4.1.4 ZmPAPs超表达载体的构建 | 第63页 |
4.1.5 农杆菌介导的玉米转基因 | 第63页 |
4.1.6 植物总磷和有效磷含量的测定 | 第63页 |
4.1.7 农艺性状观察记载 | 第63-64页 |
4.2 结果与分析 | 第64-73页 |
4.2.1 ZmPAP10a和ZmPAP26超表达转基因株系的获得和鉴定 | 第64-65页 |
4.2.2 超表达ZmPAP10a,ZmPAP26提高特异的酸性磷酸酶含量及速效磷含量 | 第65-67页 |
4.2.3 ZmPAP10a,ZmPAP26超表达的生理表型 | 第67-69页 |
4.2.4 超表达ZmPAP10a,ZmPAP26改善玉米田间的农艺性状 | 第69-73页 |
4.3 讨论 | 第73-74页 |
第五章 结论与展望 | 第74-77页 |
5.1 结论 | 第74-76页 |
5.2 展望 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-86页 |