致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7页 |
缩略词表 | 第8-12页 |
1 引言 | 第12-16页 |
1.1 基因扩增与癌症发生 | 第12页 |
1.2 TBClD3蛋白的基本介绍 | 第12-14页 |
1.3 Hippo信号通路的发现及发展 | 第14-15页 |
1.4 GEF-H1与Rho家族介绍 | 第15-16页 |
2 材料和方法 | 第16-26页 |
2.1 胞系 | 第16页 |
2.2 实验方法 | 第16-19页 |
2.2.1 主要溶液及配方 | 第16-18页 |
2.2.2 主要试剂和抗体 | 第18-19页 |
2.2.3 载体及菌株 | 第19页 |
2.3 试验方法 | 第19-26页 |
2.3.1 细胞总RNA的制备 | 第19-20页 |
2.3.2 逆转录合成cDNA | 第20页 |
2.3.3 实时定量PCR | 第20-22页 |
2.3.4 胞转染 | 第22-23页 |
2.3.5 Western blot免疫印迹检测 | 第23页 |
2.3.6 双荧光报告实验 | 第23页 |
2.3.7 蛋白纯化 | 第23-24页 |
2.3.8 免疫沉淀 | 第24页 |
2.3.9 免疫荧光 | 第24-25页 |
2.3.10 RBD pull down | 第25页 |
2.3.11 全细胞裂解液活化的鸟苷酸交换因子分析 | 第25-26页 |
3 实验结果 | 第26-58页 |
3.1 TBC1D3诱导YAP/TAZ的去磷酸化及入核 | 第26-33页 |
3.2 TBC1D3激活YAP/TAZ的关键位点及关键区域的鉴定 | 第33-38页 |
3.3 TBC1D3依赖于RHOA来调控Hippo信号通路 | 第38-45页 |
3.4 TBC1D3与GEF-H1直接相互作用并介导其从微管解离激活 | 第45-58页 |
4 讨论 | 第58-61页 |
5 小结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
作者简历 | 第68页 |