| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 前言 | 第11-15页 |
| 技术路线 | 第15-16页 |
| 材料与方法 | 第16-28页 |
| 1. 材料 | 第16页 |
| 2. 试剂及其配置 | 第16-18页 |
| 3. 仪器 | 第18-20页 |
| 4. 方法 | 第20-28页 |
| 4.1 钩虫病患者血清对美洲钩虫成虫抗原反应性分析 | 第20-21页 |
| 4.1.1 钩虫成虫可溶性抗原的制备 | 第20页 |
| 4.1.2 制备的钩虫成虫可溶性抗原诊断效能的评价 | 第20-21页 |
| 4.1.3 钩虫病人血清对制备的钩虫成虫抗原的反应性分析 | 第21页 |
| 4.2 美洲钩虫成虫cDNA文库的构建 | 第21-25页 |
| 4.2.1 总RNA的抽提与mRNA的纯化 | 第21页 |
| 4.2.2 cDNA入门文库的构建 | 第21-24页 |
| 4.2.2.1 cDNA第一链的合成 | 第22页 |
| 4.2.2.2 cDNA第二链的合成 | 第22页 |
| 4.2.2.3 cDNA连接attB1接头 | 第22-23页 |
| 4.2.2.4 合成cDNA纯化 | 第23页 |
| 4.2.2.5 BP重组反应 | 第23页 |
| 4.2.2.6 重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第23-24页 |
| 4.2.2.7 cDNA入门文库滴度测定 | 第24页 |
| 4.2.3 cDNA表达文库的构建 | 第24-25页 |
| 4.3 美洲钩虫cDNA表达文库的免疫筛选 | 第25-27页 |
| 4.3.1 大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)菌株裂解液的制备 | 第25页 |
| 4.3.2 筛库血清的处理 | 第25-26页 |
| 4.3.3 构建的cDNA表达文库的免疫筛选 | 第26页 |
| 4.3.4 阳性克隆的测序和序列分析 | 第26-27页 |
| 4.4 重组蛋白的表达及评价 | 第27-28页 |
| 4.4.1 重组蛋白的表达 | 第27页 |
| 4.4.2 重组蛋白的纯化 | 第27页 |
| 4.4.3 重组蛋白诊断价值评价 | 第27-28页 |
| 结果 | 第28-39页 |
| 1. 钩虫病患者血清对钩虫抗原的反应性分析 | 第28-31页 |
| 2. 美洲钩虫成虫cDNA文库的构建 | 第31-36页 |
| 3. 重组蛋白诊断价值评价 | 第36-39页 |
| 讨论 | 第39-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 附图：表达重组蛋白的生物信息学分析 | 第46-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 附件 | 第62-69页 |
