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钩虫病患者血清对美洲钩虫抗原反应性分析及美洲钩虫成虫cDNA文库的构建

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
前言第11-15页
技术路线第15-16页
材料与方法第16-28页
    1. 材料第16页
    2. 试剂及其配置第16-18页
    3. 仪器第18-20页
    4. 方法第20-28页
        4.1 钩虫病患者血清对美洲钩虫成虫抗原反应性分析第20-21页
            4.1.1 钩虫成虫可溶性抗原的制备第20页
            4.1.2 制备的钩虫成虫可溶性抗原诊断效能的评价第20-21页
            4.1.3 钩虫病人血清对制备的钩虫成虫抗原的反应性分析第21页
        4.2 美洲钩虫成虫cDNA文库的构建第21-25页
            4.2.1 总RNA的抽提与mRNA的纯化第21页
            4.2.2 cDNA入门文库的构建第21-24页
                4.2.2.1 cDNA第一链的合成第22页
                4.2.2.2 cDNA第二链的合成第22页
                4.2.2.3 cDNA连接attB1接头第22-23页
                4.2.2.4 合成cDNA纯化第23页
                4.2.2.5 BP重组反应第23页
                4.2.2.6 重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞第23-24页
                4.2.2.7 cDNA入门文库滴度测定第24页
            4.2.3 cDNA表达文库的构建第24-25页
        4.3 美洲钩虫cDNA表达文库的免疫筛选第25-27页
            4.3.1 大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)菌株裂解液的制备第25页
            4.3.2 筛库血清的处理第25-26页
            4.3.3 构建的cDNA表达文库的免疫筛选第26页
            4.3.4 阳性克隆的测序和序列分析第26-27页
        4.4 重组蛋白的表达及评价第27-28页
            4.4.1 重组蛋白的表达第27页
            4.4.2 重组蛋白的纯化第27页
            4.4.3 重组蛋白诊断价值评价第27-28页
结果第28-39页
    1. 钩虫病患者血清对钩虫抗原的反应性分析第28-31页
    2. 美洲钩虫成虫cDNA文库的构建第31-36页
    3. 重组蛋白诊断价值评价第36-39页
讨论第39-42页
参考文献第42-46页
附图:表达重组蛋白的生物信息学分析第46-61页
致谢第61-62页
附件第62-69页

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