摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
第一章 文献综述 | 第14-25页 |
前言 | 第14页 |
1.1 植物细胞程序性死亡 | 第14-17页 |
1.1.1 植物的营养生长与PCD | 第15-16页 |
1.1.2 植物的生殖生长与PCD | 第16页 |
1.1.3 植物的逆境胁迫与PCD | 第16-17页 |
1.2 液泡加工酶介导PCD发生 | 第17-22页 |
1.2.1 植物液泡的功能 | 第17-18页 |
1.2.2 液泡加工酶的分类和功能 | 第18-22页 |
1.3 气孔发育的分子机制 | 第22-25页 |
1.3.1 气孔发育模式 | 第22页 |
1.3.2 气孔发育的分子调控机制 | 第22-25页 |
第二章 材料与方法 | 第25-39页 |
2.1 实验材料 | 第25页 |
2.2 实验试剂与仪器 | 第25-26页 |
2.3 植物组织DNA提取 | 第26-27页 |
2.4 植物组织RNA提取 | 第27-28页 |
2.5 定量PCR | 第28-30页 |
2.5.1 逆转录反映 | 第28-29页 |
2.5.2 实时定量PCR | 第29-30页 |
2.6 水稻盐胁迫处理 | 第30-31页 |
2.6.1 盐胁迫下水稻幼苗根长测定 | 第30页 |
2.6.2 盐胁迫处理4周水稻苗 | 第30-31页 |
2.7 叶绿素提取 | 第31页 |
2.8 DNA laddering检测 | 第31-32页 |
2.9 原生质体制备及染色 | 第32-33页 |
2.9.1 无菌苗培养 | 第32页 |
2.9.2 原生质体的提取 | 第32-33页 |
2.9.3 BCECF和Trypan Blue染色及显微观察 | 第33页 |
2.10 CO-IP | 第33-35页 |
2.11 Western Blot | 第35-37页 |
2.11.1 SDS-PAGE电泳 | 第35-36页 |
2.11.2 转膜 | 第36页 |
2.11.3 封闭和杂交 | 第36-37页 |
2.11.4 显影 | 第37页 |
2.12 SDS-PAGE银染 | 第37-39页 |
第三章 实验结果 | 第39-60页 |
3.1 过表达和干涉的OsVPE3转基因株系鉴定及其种子表型观察 | 第39-42页 |
3.1.1 过表达和干涉的OsVPE3转基因株系鉴定 | 第39-40页 |
3.1.2 过表达和干涉的OsVPE3转基因株系种子表型 | 第40-41页 |
3.1.3 OsVPE3表达谱分析 | 第41-42页 |
3.2 盐胁迫下OsVPE3介导植物细胞程序性死亡 | 第42-52页 |
3.2.1 盐胁迫下OsVPE3干涉株系抗性提高 | 第42-45页 |
3.2.2 盐胁迫下OsVPE3介导水稻根尖细胞程序性死亡 | 第45-49页 |
3.2.3 盐胁迫下OsVPE3通过介导液泡破裂引起水稻原生质体死亡 | 第49-52页 |
3.3 OsVPE3对水稻叶宽及气孔发育的影响 | 第52-56页 |
3.3.1 过表达和干涉的OsVPE3转基因株系叶片表型比较 | 第52-53页 |
3.3.2 OsVPE3通过调控OsTMM和气孔发育相关转录因子改变气孔大小 | 第53-55页 |
3.3.3 过表达和干涉的OsVPE3转基因株系叶片失水速率比较 | 第55-56页 |
3.4 OsVPE3蛋白加工成熟及互作蛋白探索 | 第56-60页 |
3.4.1 OsVPE3加工成熟需进行C端切割 | 第56-57页 |
3.4.2 OsVPE3蛋白免疫共沉淀的Western和银染检测 | 第57-58页 |
3.4.3 免疫共沉淀复合物质谱分析 | 第58-60页 |
第四章 讨论与展望 | 第60-63页 |
4.1 OsVPE3通过介导液泡破裂引起程序性细胞死亡 | 第60-61页 |
4.2 OsVPE3影响叶片和气孔发育调控叶片蒸腾效率 | 第61-62页 |
4.3 OsVPE3蛋白的加工成熟和互作蛋白研究 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-70页 |
致谢 | 第70页 |