摘要 | 第3-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-18页 |
1.1 奶牛子宫内膜损伤和修复 | 第11-13页 |
1.1.1 子宫的结构与功能 | 第12页 |
1.1.2 子宫内膜炎病理 | 第12-13页 |
1.2 前列腺素类化合物及其生理作用 | 第13-16页 |
1.2.1 前列腺素类化合物的生物合成与代谢 | 第13-14页 |
1.2.2 前列腺素类化合物的合成酶 | 第14-15页 |
1.2.3 前列腺素类化合物受体 | 第15页 |
1.2.4 前列腺素F_(2α)(PGF_(2α))和前列腺素E_2(PGE_2)与生殖的关系 | 第15-16页 |
1.3 生长因子 | 第16-17页 |
1.3.1 β转化生长因子与生殖功能调节 | 第16页 |
1.3.2 血管内皮生长因子与生殖功能调节 | 第16-17页 |
1.4 研究目的与意义 | 第17-18页 |
2 实验部分 | 第18-25页 |
2.1 实验材料 | 第18页 |
2.1.1 奶牛子宫角 | 第18页 |
2.1.2 实验试剂 | 第18页 |
2.1.3 实验仪器 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-24页 |
2.2.1 奶牛子宫内膜上皮细胞原代培养 | 第18-19页 |
2.2.2 奶牛子宫内膜上皮细胞传代培养 | 第19页 |
2.2.3 免疫荧光染色法鉴定奶牛子宫内膜上皮细胞 | 第19页 |
2.2.4 奶牛子宫内膜上皮细胞增殖曲线测定 | 第19-20页 |
2.2.5 总RNA的提取 | 第20-22页 |
2.2.6 实时荧光定量RT-PCR检测TGFβ_1mRNA表达水平 | 第22页 |
2.2.7 实时荧光定量RT-PCR检测VEGF mRNA表达水平 | 第22页 |
2.2.8 cDNA的制备及Real-Time PCR的制备 | 第22-23页 |
2.2.9 奶牛子宫内膜上皮细胞中TGFβ_1和VEGF含量的测定 | 第23-24页 |
2.3 数据处理分析 | 第24-25页 |
3 实验结果部分 | 第25-40页 |
3.1 原代培养的子宫内膜上皮细胞形态学观察 | 第25页 |
3.2 原代培养的子宫内膜上皮细胞的免疫荧光检测 | 第25-26页 |
3.3 子宫内膜上皮细胞增殖曲线的MTT检测 | 第26页 |
3.4 子宫内膜上皮细胞目的基因的扩增曲线及溶解曲线检测 | 第26-28页 |
3.5 吲哚美辛、EP_2及FP受体激动剂对奶牛子宫内膜上皮细胞中TGFβ_1mRNA表达的影响 | 第28-30页 |
3.5.1 吲哚美辛对子宫内膜上皮细胞中TGFβ_1mRNA表达的影响 | 第28页 |
3.5.2 EP_2和FP受体激动剂对子宫内膜上皮细胞中TGFβ_1mRNA表达的影响 | 第28-29页 |
3.5.3 不同浓度的EP_2和FP受体激动剂对子宫内膜上皮细胞TGFβ_1mRNA表达的影响 | 第29-30页 |
3.6 奶牛子宫内膜上皮细胞中TGFβ_1含量的测定 | 第30-33页 |
3.6.1 蛋白浓度标准曲线及TGFβ_1蛋白含量的测定 | 第30-32页 |
3.6.2 EP_2和FP受体激动剂对奶牛子宫内膜上皮细胞中TGFβ_1蛋白含量的WesternBlot检测 | 第32-33页 |
3.7 吲哚美辛、EP_2及FP受体激动剂对子宫内膜上皮细胞中VEGFmRNA表达的影响 | 第33-36页 |
3.7.1 吲哚美辛对子宫内膜上皮细胞中VEGF mRNA表达的影响 | 第33-34页 |
3.7.2 EP_2和FP受体激动剂对奶牛子宫内膜上皮细胞中VEGF mRNA表达的影响 | 第34-35页 |
3.7.3 不同浓度的Butaprost和Fluprostenol对奶牛子宫内膜上皮细胞VEGFmRNA表达的影响 | 第35-36页 |
3.8 奶牛子宫内膜上皮细胞中VEGF含量的测定 | 第36-40页 |
3.8.1 蛋白浓度标准曲线及VEGF蛋白含量的测定 | 第36-37页 |
3.8.2 EP_2和FP受体激动剂对奶牛子宫内膜上皮细胞中VEGF蛋白含量的Western Blot检测 | 第37-40页 |
4. 讨论 | 第40-45页 |
5. 结论 | 第45-46页 |
致谢 | 第46-47页 |
参考文献 | 第47-52页 |
作者简介 | 第52页 |