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Annexin A1在急性髓系白血病细胞中的功能研究

中文摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
缩略词表第8-13页
第一章 绪论第13-20页
    1 白血病的危害第13页
    2 白血病的分类第13页
    3 白血病治疗和诊断方法研究进展第13-15页
        3.1 细胞依赖性治疗方法第14页
        3.2 骨髓移植治疗方法第14页
        3.3 靶向治疗方法第14-15页
        3.4 抗体微阵列诊断法第15页
    4 Annexin A1蛋白简介第15-16页
    5 Annexin A1结构第16-17页
    6 Annexin A1与细胞凋亡和分化的关系第17-18页
        6.1 Annexin A1与细胞凋亡第17-18页
        6.2 Annexin A1与细胞分化第18页
    7 Annexin A1与肿瘤的发生发展和转移的研究进展第18-19页
    8 研究目的及意义第19-20页
第二章 Annexin A1在急性髓系白血病患者及细胞系中的表达研究第20-29页
    1 实验材料、仪器和试剂第20-23页
        1.1 主要材料第20页
        1.2 主要仪器第20-21页
        1.3 主要试剂第21页
        1.4 主要溶液配制第21-23页
    2 实验方法第23-25页
        2.1 细胞复苏、培养及冻存第23页
        2.2 髓系白血病细胞蛋白样品的制备第23页
        2.3 急性髓系白血病患者和健康志愿者外周血的收集与处理第23-24页
        2.4 Western blot第24-25页
        2.5 数据分析第25页
    3 实验结果第25-29页
        3.1 急性髓系白血病患者外周血白细胞中Annexin A1表达情况第25-28页
        3.2 髓系白血病细胞系中Annexin A1的表达情况第28-29页
第三章 Annexin A1在急性髓系白血病细胞中的功能研究第29-47页
    1 实验材料、仪器和试剂第29-30页
        1.1 主要材料第29页
        1.2 主要仪器第29页
        1.3 实验试剂第29-30页
        1.4 主要试剂及其配制第30页
    2 实验方法第30-38页
        2.1 Annexin A1-shRNA反转录慢病毒载体的构建第30-32页
        2.2 大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备(CaCl_2法)第32页
        2.3 Annexin A1-shRNA反转录慢病毒载体转化DH5α感受态细胞第32-33页
        2.4 Annexin A1-shRNA反转录慢病毒载体的抽提第33-34页
        2.5 Annexin A1-shRNA反转录慢病毒载体的双酶切第34页
        2.6 包装慢病毒颗粒并转染急性髓系白血病细胞KG-1a和HL60细胞第34-35页
        2.7 细胞计数法绘制生长曲线第35-36页
        2.8 流式细胞术检测细胞周期第36页
        2.9 流式细胞术检测细胞凋亡第36-37页
        2.10 免疫细胞化学第37-38页
    3 实验结果第38-47页
        3.1 重组质粒Annexin A1-shRNA的双酶切鉴定第38-39页
        3.2 Western blot检验Annexin A1在构建的细胞模型中表达情况第39-40页
        3.3 免疫细胞化学检测Annexin A1在KG-1a细胞中的敲降表达效果第40页
        3.4 细胞生长曲线实验结果第40-43页
        3.5 Annexin A1的敲降表达对急性髓系白血病细胞周期的影响第43-44页
        3.6 Annexin A1的敲降表达对急性髓系白血病细胞凋亡的影响第44-47页
第四章 Annexin A1蛋白促进急性髓系白血病细胞增殖的机制研究第47-56页
    1 实验材料、仪器和试剂第47-48页
        1.1 主要材料第47页
        1.2 主要仪器第47页
        1.3 主要试剂第47-48页
        1.4 主要溶液配制第48页
    2 实验方法第48-50页
        2.1 免疫细胞化学实验第48页
        2.2 免疫蛋白共沉淀第48-49页
        2.3 MTT实验第49-50页
    3 实验结果第50-56页
        3.1 Western blot检测细胞增殖相关蛋白第50-51页
        3.2 免疫细胞化学检测Annexin A1与Notch1共定位情况第51-52页
        3.3 免疫共沉淀研究Annexin A1和Notch1的相互作用第52-53页
        3.4 Annexin A1促进了Notch1在急性髓系白血病细胞内的降解第53-56页
第五章 Annexin A1在荷瘤裸鼠体内的功能研究第56-61页
    1 实验材料、仪器和试剂第56页
        1.1 主要材料第56页
        1.2 主要仪器第56页
        1.3 主要试剂第56页
        1.4 主要溶液配制第56页
    2 实验方法第56-57页
        2.1 KG-1a和KG-1a-sh Annexin A1细胞成瘤实验第56-57页
    3 实验结果第57-61页
        3.1 KG-1a和KG-1a-shAnnexin A1在小鼠中成瘤情况比较第57-59页
        3.2 Annexin A1对裸鼠脏器指数的影响第59-61页
第六章 讨论和结论第61-65页
参考文献第65-72页
攻读学位期间的研究成果第72-73页
致谢第73页

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