摘要 | 第3-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
第一章 引言 | 第10-17页 |
1.1 传染性法氏囊病概述 | 第10页 |
1.2 IBDV的基本特征 | 第10-14页 |
1.2.1 IBDV的分类和形态 | 第10-11页 |
1.2.2 IBDV的基因组结构 | 第11-12页 |
1.2.3 IBDV的蛋白及其功能 | 第12-13页 |
1.2.4 IBDV的血清型 | 第13页 |
1.2.5 IBDV的理化特征 | 第13-14页 |
1.3 IBDV的致病机制及在感染鸡体内的分布 | 第14-15页 |
1.3.1 IBDV的致病机制 | 第14页 |
1.3.2 IBDV在感染鸡体内的分布 | 第14-15页 |
1.4 荧光定量PCR技术的原理与研究应用 | 第15-16页 |
1.4.1 荧光定量PCR技术的原理与优点 | 第15-16页 |
1.4.2 荧光定量PCR技术的研究与应用 | 第16页 |
1.5 研究的目的与意义 | 第16-17页 |
第二章 IBDV荧光定量RT-PCR检测方法的建立 | 第17-34页 |
2.1 实验材料 | 第17-18页 |
2.1.1 标准种毒 | 第17页 |
2.1.2 实验动物 | 第17页 |
2.1.3 主要试剂与材料 | 第17-18页 |
2.1.4 所用溶液及配制方法(见附录 1) | 第18页 |
2.1.5 主要仪器设备 | 第18页 |
2.2 实验方法 | 第18-26页 |
2.2.1 引物设计 | 第18-19页 |
2.2.2 模板制备 | 第19-20页 |
2.2.3 荧光定量RT-PCR引物的鉴定 | 第20-21页 |
2.2.4 探针PN荧光定量RT- PCR反应标准品的制备 | 第21-24页 |
2.2.5 探针灵敏度和特异性的验证 | 第24-26页 |
2.3 结果 | 第26-32页 |
2.3.1 荧光定量RT-PCR引物的鉴定结果 | 第26-27页 |
2.3.2 灵敏度检测结果 | 第27-29页 |
2.3.3 特异性检测的结果 | 第29-30页 |
2.3.4 探针P_N标准曲线的建立 | 第30-32页 |
2.4 小结与讨论 | 第32-34页 |
第三章 IBDV强、弱毒株感染SPF鸡后其病毒基因拷贝数在不同组织内的动态分析研究 | 第34-45页 |
3.1 实验材料与方法 | 第34-36页 |
3.1.1 实验种毒 | 第34页 |
3.1.2 实验动物 | 第34页 |
3.1.3 主要试剂与仪器 | 第34页 |
3.1.4 SPF鸡的分组及接种处理 | 第34-35页 |
3.1.5 组织样品的处理 | 第35页 |
3.1.6 核酸的提取 | 第35-36页 |
3.2 实验结果的数据分析方法 | 第36页 |
3.3 结果 | 第36-43页 |
3.3.1 探针PN检测实验组 1~3 不同组织间IBDV基因拷贝量的动态分布 | 第38-40页 |
3.3.2 实验组 1~3 不同时间同一组织内IBDV基因拷贝量的动态分布 | 第40-43页 |
3.4 小结与讨论 | 第43-45页 |
第四章 IBDV B87株及BC6/85 株感染SPF鸡后病毒在机体内的动态分布研究 | 第45-60页 |
4.1 实验材料 | 第45-47页 |
4.1.1 实验种毒 | 第45页 |
4.1.2 实验动物 | 第45页 |
4.1.3 试剂与仪器 | 第45页 |
4.1.4 实验动物分组及处理 | 第45-46页 |
4.1.5 组织样品的处理 | 第46页 |
4.1.6 IBDV基因组RNA的提取 | 第46-47页 |
4.1.7 合成cDNA | 第47页 |
4.1.8 荧光定量RT- PCR反应 | 第47页 |
4.2 实验结果的数据分析方法 | 第47-48页 |
4.3 结果 | 第48-59页 |
4.3.1 实验组 1~6 组织样品检测的Ct值结果 | 第48-54页 |
4.3.2 各个组织样品检测的Ct值结果 | 第54-59页 |
4.4 小结与讨论 | 第59-60页 |
第五章 结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附录 | 第68-72页 |
附录1 所用溶液及其配制 | 第68-70页 |
附录2 目的基因的测序结果 | 第70-72页 |
作者简历 | 第72页 |