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氨基酸合成相关基因MoLYS20和MoCPA2在稻瘟病菌生长发育及致病过程中的功能研究

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-10页
上篇 文献综述第11-34页
    第一章 赖氨酸生物合成研究概述第12-22页
        1 赖氨酸合成途径第13-14页
        2 α-氨基乙二酸合成途径第14-15页
        3 高柠檬酸合酶研究进展第15-16页
        4 高柠檬酸合酶的定位第16-18页
        参考文献第18-22页
    第二章 精氨酸的合成途径研究概述第22-34页
        1 精氨酸合成途径第22-24页
        2 精氨酸合成代谢的调控第24页
        3 氨基甲酰磷酸合成酶研究概况第24-27页
        参考文献第27-34页
下篇 研究内容第34-78页
    第一章 赖氨酸合成代谢基因MOL YS20在稻瘟菌生长发育和致病过程中的功能分析第36-56页
        1 材料与方法第38-42页
            1.1 供试菌株与培养条件第38页
            1.2 稻瘟病菌DNA的提取第38页
            1.3 MoLys20的蛋白序列分析和系统发育分析第38-39页
            1.4 目的基因敲除突变体的获得与互补第39-40页
                1.4.1 MoLYS20基因敲除突变体的构建第39页
                1.4.2 MoLYS20基因敲除突变体的筛选及验证第39-40页
                1.4.3 MoLYS20基因敲除突变体基因拷贝数分析第40页
                1.4.4 MoLys20基因敲除突变体的基因互补第40页
            1.5 稻瘟病菌MoLYS20基因敲除突变体的表型观测第40-41页
                1.5.1 突变体在不同培养基上的生长表型观察第40页
                1.5.2 产孢量统计及孢子形态观察第40-41页
            1.6 突变体致病性分析第41页
                1.6.1 大麦叶片离体接种第41页
                1.6.2 大麦背面表皮侵入分析第41页
                1.6.3 水稻叶片喷雾接种第41页
            1.7 基因的表达及亚细胞定位第41-42页
                1.7.1 基因的表达及亚细胞定位观察第41-42页
                1.7.2 MoLys20缺失NLS转化子的观察第42页
        2 结果与分析第42-51页
            2.1 MoLys20蛋白序列及系统发育树分析第42-43页
            2.2 MoLYS20基因敲除突变体的获得及互补验证第43-44页
            2.3 MoLYS20基因参与调控稻瘟病菌的营养生长第44-46页
            2.4 MoLYS20基因参与分生孢子的产生第46-47页
            2.5 MoLYS20基因参与致病过程第47-50页
            2.6 MoLys20亚细胞定位于细胞核第50-51页
        3 讨论第51-53页
        参考文献第53-56页
    第二章 精氨酸合成代谢基因MOCPA2在稻瘟菌生长发育和致病过程中的功能分析第56-78页
        1 材料与方法第58-62页
            1.1 供试菌株与培养条件第58页
            1.2 稻瘟病菌DNA、RNA的提取第58页
            1.3 MoCpa2的蛋白序列分析和系统发育分析第58页
            1.4 MoCPA2基因敲除突变体的获得与互补第58-60页
                1.4.1 MoCPA2基因敲除突变体的构建第58-59页
                1.4.2 MoCPA2基因敲除突变体的筛选及验证第59页
                1.4.3 MoCPA2基因敲除突变体基因拷贝数分析第59页
                1.4.4 MoCPA2基因敲除突变体的基因互补第59-60页
                1.4.5 实时定量PCR分析第60页
            1.5 稻瘟病菌MoCPA2基因敲除突变体的表型观测第60-61页
                1.5.1 突变体在不同培养基上的生长表型观察第60页
                1.5.2 产孢量统计及孢子形态观察第60页
                1.5.3 附着胞形成及附着胞膨压测定第60-61页
            1.6 突变体致病性分析第61-62页
                1.6.1 大麦叶片离体接种第61页
                1.6.2 大麦背面表皮侵入分析第61页
                1.6.3 水稻叶鞘注射接种第61页
                1.6.4 水稻叶片喷雾接种第61-62页
            1.7 基因的表达及亚细胞定位第62页
                1.7.1 基因的表达及亚细胞定位观察第62页
        2 结果与分析第62-72页
            2.1 MoCpa2蛋白序列及系统发育树分析第62-63页
            2.2 MoCPA2基因敲除突变体的获得及互补验证第63-65页
            2.3 MoCPA2基因参与调控稻瘟病菌的营养生长第65-66页
            2.4 MoCPA2基因参与分生孢子的产生第66-67页
            2.5 MoCPA2基因参与致病过程第67-70页
            2.6 附着胞形成及附着胞膨压测定第70-71页
            2.7 MoCpa2亚细胞定位于细胞质中第71-72页
        3 讨论第72-74页
        参考文献第74-78页
附录第78-82页
    附录1 试验常用的培养基第78-81页
    附录2 实验所用引物第81-82页
攻读硕士学位期间发表的研究论文第82-84页
致谢第84页

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