| 中文摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3-4页 |
| 中文文摘 | 第5-10页 |
| 绪论 | 第10-20页 |
| 第一节 DNA修复机制 | 第10-13页 |
| 第二节 基因编辑 | 第13-18页 |
| 2.1 锌指核酸酶 | 第13-15页 |
| 2.2 类转录激活样效应核酸酶 | 第15-16页 |
| 2.3 规律成簇间隔短回文重复序列和Cas蛋白 | 第16-17页 |
| 2.4 ZFN、TALEN、CRISPR/Cas三大技术比较 | 第17-18页 |
| 第三节 基因整合“安全港” | 第18-19页 |
| 第四节 本研究的意义 | 第19-20页 |
| 第一章 材料与方法 | 第20-40页 |
| 第一节 实验材料 | 第20页 |
| 第二节 实验仪器与软件 | 第20-22页 |
| 第三节 实验试剂 | 第22-24页 |
| 第四节 试剂准备 | 第24-25页 |
| 第五节 实验方法与步骤 | 第25-37页 |
| 第六节 引物序列 | 第37-40页 |
| 第二章 实验结果与分析 | 第40-58页 |
| 第一节 靶向AAVS1位点的sgRNA的设计与验证 | 第40-50页 |
| 2.1.1 靶向AAVS1位点的sgRNA的设计 | 第40-41页 |
| 2.1.2 LentiCRISPRv2-sgRNA的构建 | 第41-43页 |
| 2.1.3 LentiCRISPRv2-sgRNA打靶效率的检测 | 第43-46页 |
| 2.1.4 LentiCRISPRv2-sgRNA脱靶的检测 | 第46-50页 |
| 第二节 利用LentiCRISPRv2-sgRNA和AAV-CAGGS-EGFP在细胞AAVS1位点上进行EGFP基因的插入 | 第50-55页 |
| 2.2.1 利用LentiCRISPRv2-sgRNA和AAV-CAGGS-EGFP在HEK 293T细胞上进行EGFP基因的插入 | 第51-53页 |
| 2.2.2 利用LentiCRISPRv2-sgRNA和AAV-CAGGS-EGFP在人牙间充质细胞上进行EGFP基因的插入 | 第53-55页 |
| 第三节 利用LentiCRISPRv2-sgRNA和donor在人细胞AAVS1位点上进行可诱导型Cas9表达盒的插入 | 第55-58页 |
| 2.3.1 利用LentiCRISPRv2-sgRNA和donor实现在HEK293T细胞上插入可诱导型Cas9表达盒 | 第56-58页 |
| 第三章 讨论 | 第58-60页 |
| 第四章 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-68页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第68-70页 |
| 致谢 | 第70-72页 |
| 个人简历 | 第72-74页 |
