中文摘要 | 第2-3页 |
Abstract | 第3-4页 |
中文文摘 | 第5-12页 |
绪论 | 第12-20页 |
1 甘蔗的遗传背景 | 第12-15页 |
1.1 甘蔗的遗传多样性及分子细胞遗传学 | 第12-14页 |
1.2 甘蔗与高粱基因组结构的保守性和共线性 | 第14-15页 |
2 植物糖代谢及果糖激酶概述 | 第15-18页 |
2.1 植物的糖代谢 | 第15-17页 |
2.2 植物果糖激酶研究进展 | 第17-18页 |
3 本研究的目的和意义 | 第18-20页 |
第一章 甘蔗果糖激酶基因家族的鉴定和演化分析 | 第20-36页 |
1 前言 | 第20页 |
2 实验材料和方法 | 第20-22页 |
2.1 实验材料 | 第20页 |
2.2 实验仪器 | 第20-21页 |
2.3 实验试剂 | 第21页 |
2.4 实验方法 | 第21-22页 |
2.4.1 甘蔗BAC文库的测序 | 第21页 |
2.4.2 甘蔗果糖激酶基因家族及其单倍型基因结构注释 | 第21-22页 |
2.4.3 基因家族系统进化树的构建和结构比较 | 第22页 |
3 实验结果与分析 | 第22-34页 |
3.1 甘蔗果糖激酶基因家族的鉴定及比较分析 | 第22-24页 |
3.2 甘蔗果糖激酶基因家族单倍型分析 | 第24-30页 |
3.2.1 甘蔗果糖激酶基因家族结构域和基因单倍型分析 | 第24-28页 |
3.2.2 甘蔗果糖激酶基因家族各单倍型基因结构注释 | 第28页 |
3.2.3 甘蔗果糖激酶基因家族基因选择压力分析 | 第28-30页 |
3.3 植物果糖激酶基因家族系统分析和结构注释 | 第30-34页 |
3.3.1 植物果糖激酶基因家族系统分析 | 第30-31页 |
3.3.2 植物果糖激酶基因家族结构注释及分析 | 第31-34页 |
4 讨论 | 第34-36页 |
第二章 甘蔗果糖激酶基因家族的表达量分析 | 第36-62页 |
1 前言 | 第36页 |
2 实验材料和方法 | 第36-41页 |
2.1 植物材料 | 第36-37页 |
2.1.1 成熟前期和成熟期甘蔗材料 | 第36-37页 |
2.1.2 激素处理的甘蔗材料 | 第37页 |
2.2 试剂和仪器 | 第37-38页 |
2.2.1 试剂 | 第37-38页 |
2.2.2 仪器 | 第38页 |
2.3 实验方法 | 第38-41页 |
2.3.1 甘蔗组织总RNA的提取 | 第38-39页 |
2.3.1.1 总RNA的初提 | 第38-39页 |
2.3.1.2 RNA样品的消化 | 第39页 |
2.3.1.3 RNA重新抽提 | 第39页 |
2.3.1.4 RNA样品检测 | 第39页 |
2.3.2 甘蔗RNA-seq文库构建 | 第39-40页 |
2.3.3 甘蔗RNA-seq分析 | 第40页 |
2.3.4 甘蔗果糖激酶基因家族qRT-PCR分析 | 第40-41页 |
3 结果及分析 | 第41-58页 |
3.1 苗期、成熟前期和成熟期甘蔗果糖激酶基因家族共表达分析 30 | 第41-45页 |
3.2 甘蔗果糖激酶基因家族响应激素胁迫的共表达分析 | 第45-58页 |
3.2.1 甘蔗果糖激酶基因家族响应PEG激素胁迫的共表达分析 | 第45页 |
3.2.2 甘蔗果糖激酶基因家族响应ABA激素胁迫的共表达分析 | 第45-46页 |
3.2.3 甘蔗果糖激酶基因家族响应IAA激素胁迫的共表达分析 | 第46-48页 |
3.2.4 甘蔗果糖激酶基因家族响应GA激素胁迫的共表达分析 | 第48-49页 |
3.2.5 甘蔗果糖激酶基因家族响应GA激素胁迫的共表达分析 | 第49-50页 |
3.2.6 甘蔗果糖激酶基因家族响应Et激素胁迫的共表达分析 | 第50-58页 |
3.3 RNA-Seq数据qRT-PCR验证 | 第58页 |
4 讨论 | 第58-62页 |
第三章 拟南芥果糖激酶纯合突变体鉴定 | 第62-72页 |
1 前言 | 第62页 |
2 实验材料和方法 | 第62-66页 |
2.1 植物材料 | 第62-63页 |
2.2 试剂和仪器 | 第63页 |
2.2.1 试剂 | 第63页 |
2.2.2 仪器 | 第63页 |
2.3 实验方法 | 第63-66页 |
2.3.1 甘蔗果糖激酶同源基因的拟南芥T-DNA突变体的搜查 | 第63-64页 |
2.3.2 拟南芥T-DNA插入突变体纯合体鉴定策略 | 第64页 |
2.3.3 引物设计与合成 | 第64-65页 |
2.3.4 拟南芥突变体的基因组提取 | 第65页 |
2.3.5 拟南芥突变纯合体苗期根长和茎长的比较 | 第65-66页 |
2.3.6 拟南芥纯合突变体两两杂交,筛选纯合双突变体 | 第66页 |
3 结果与分析 | 第66-71页 |
3.1 拟南芥ScFRK基因家族的T-DNA突变体 | 第66页 |
3.2 拟南芥ScFRK基因家族纯合突变体的筛选 | 第66-68页 |
3.2.1 拟南芥ScFRK基因家族纯合突变体的引物设计 | 第66-67页 |
3.2.2 拟南芥ScFRK纯合突变体的筛选 | 第67-68页 |
3.3 拟南芥突变纯合体苗期根长和茎长的比较 | 第68-70页 |
3.4 拟南芥纯合双突变体表现观察 | 第70-71页 |
4 讨论 | 第71-72页 |
第四章 甘蔗果糖激酶家族基因的功能分析 | 第72-90页 |
1 前言 | 第72页 |
2 实验材料与方法 | 第72-77页 |
2.1 植物材料 | 第72页 |
2.2 试剂和仪器 | 第72-73页 |
2.2.1 试剂 | 第72-73页 |
2.2.2 仪器 | 第73页 |
2.3 实验方法 | 第73-77页 |
2.3.1 甘蔗ScFRK基因家族的cDNA克隆和启动子引物设计 | 第73-74页 |
2.3.2 Gateway技术 | 第74-75页 |
2.3.3 质粒提取 | 第75页 |
2.3.4 转化根癌农杆菌 | 第75页 |
2.3.5 农杆菌蘸花转化拟南芥法 | 第75页 |
2.3.6 用农杆菌蘸花转化拟南芥阳性苗的筛选 | 第75-76页 |
2.3.7 拟南芥研究材料的表型分析 | 第76页 |
2.3.8 甘蔗果糖激酶基因亚细胞定位 | 第76-77页 |
3 结果与分析 | 第77-88页 |
3.1 甘蔗果糖激酶基因的克隆 | 第77-78页 |
3.2 甘蔗果糖激酶基因载体的构建 | 第78-79页 |
3.2.1 过表达载体的构建 | 第78页 |
3.2.2 正常表达载体的构建 | 第78-79页 |
3.3 甘蔗果糖激酶基因的亚细胞定位 | 第79-81页 |
3.4 甘蔗果糖激酶基因遗传转化及功能分析 | 第81-88页 |
3.4.1 甘蔗果糖激酶基因遗传转化拟南芥 | 第81-82页 |
3.4.2 遗传转化拟南芥纯合突变体及野生型根茎长度的比较 | 第82-88页 |
4 讨论 | 第88-90页 |
第五章 结论 | 第90-92页 |
参考文献 | 第92-102页 |
攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第102-104页 |
致谢 | 第104-106页 |
个人简历 | 第106-110页 |